離體神經突觸的代謝性標記實驗
mRNA 和 rRNA 存在于樹突和軸突內(VanMinnen1994;Steward1997)。令人疑惑不解的是,位于胞體外區域的 mRNA 是否真的被翻譯。下面的方法可以證明神經突起確實可以不依賴胞體而合成蛋白。現代神經科學研究技術作者:U.Windhorst & H. Johansson 翻譯:趙志奇 陳軍試劑、試劑盒固定劑溫育液氯霉素放射自顯影乳劑顯影劑SDS樣本緩沖液實驗步驟一、放射自顯影神經元在條件培養基中培養 2d,如第十章所述。1.用一個鋒利的微電極從胞體分離神經突起,并用牽引電極將胞體移出培養皿 (見第十章)。2.在培養液中加入終濃度 0.lmmol/L 氯霉素,阻斷線粒體蛋白的合成。3.小心移去培養液并用溫育液洗滌 6 次,每次 Imin。保證軸突始終被一小部分液體覆蓋;一旦干了,軸突便會崩解。4.在含 0.5mCi/ml 反式-35S 和 0.1 mmol/L 氯霉素......閱讀全文
離體神經突觸的代謝性標記實驗
mRNA 和 rRNA 存在于樹突和軸突內(VanMinnen1994;Steward1997)。令人疑惑不解的是,位于胞體外區域的 mRNA 是否真的被翻譯。下面的方法可以證明神經突起確實可以不依賴胞體而合成蛋白。現代神經科學研究技術作者:U.Windhorst?&?H. Johansson? 翻
離體神經突觸的代謝性標記實驗
試劑、試劑盒 固定劑溫育液氯霉素放射自顯影乳劑顯影劑SDS樣本緩沖液實驗步驟 一、放射自顯影神經元在條件培養基中培養 2d,如第十章所述。1.用一個鋒利的微電極從胞體分離神經突起,并用牽引電極將胞體移出培養皿 (見第十章)。2.在培養液中加入終濃度 0.lmmol/L 氯霉素,阻斷線粒體蛋白的合成。
離體神經突觸的代謝性標記實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 固定劑 溫育液 氯霉素 放射自顯影乳劑 顯影劑 SDS樣本緩沖液 實驗步驟
梨離體葉片再生實驗
實驗概要試驗研究了基本培養基、激素配比、細胞分裂素、生長素、培養基添加物、蔗糖濃度、pH值及葉齡與接種方式對梨離體葉片不定芽再生的影響,優化了再生條件,建立起了高效、穩定的離體葉片再生體系。實驗材料金花和豐產兩種梨樹的離體葉片。實驗步驟1. 培養基的配制?試驗所用的培養基為MS (Murashige
視神經損傷模型實驗—熒光金逆行性標記
實驗方法原理在上丘和外側膝狀體進行熒光金逆行性標記存活的節細胞。這種方法常結合視神經夾傷模型使用。上丘逆行性標記可分為兩種,損傷前標記及損傷后標記。損傷前標記用于研究存活的節細胞,一般在損傷前3d進行標記。損傷后標記一般用于研究存活的纖維及再生纖維,一般在處死前3d進行標記。實驗材料實驗動物試劑、試
離體蛙心標本的制備實驗
實驗材料蛙儀器、耗材蛙板小玻板粗剪刀直剪刀大鑷子小鑷子眼科剪刀探針玻璃分針大燒杯小燒杯滴管培養皿棉線任氏液鋅銅叉實驗步驟(1)暴露蛙心:取蟾蜍一只,毀壞腦和脊髓,將其仰臥固定在蛙板上。從劍突下將胸部皮膚向上剪開或剪掉,然后剪掉胸骨,打開心包,暴露心臟和動脈干。?(2)觀察心臟的解剖結構:在腹面可以看
離體蛙心標本的制備實驗
實驗材料 蛙儀器、耗材 蛙板小玻板粗剪刀直剪刀大鑷子小鑷子眼科剪刀探針玻璃分針大燒杯小燒杯滴管培養皿棉線任氏液鋅銅叉實驗步驟 (1)暴露蛙心:取蟾蜍一只,毀壞腦和脊髓,將其仰臥固定在蛙板上。從劍突下將胸部皮膚向上剪開或剪掉,然后剪掉胸骨,打開心包,暴露心臟和動脈干。?(2)觀察心臟的解剖結構:在腹面
胡蘿卜根離體培養實驗
實驗概要學習胡蘿卜離體根培養的基本方法;掌握誘導愈傷組織的基本技術。主要試劑1. MS 培養基 ? 10 mg/L 2,4-D ? 2 mg/L 6-BA2. 70% 乙醇3. 0.1% 升主要設備1. 超凈工作臺2. 滅菌鍋3. 顯微鏡4. 接種器械5. 不銹鋼打孔器6. 燒杯( 500ml )7
氨基酸代謝標記實驗
暫未評分點評實驗,有機會獲丁當獎勵?+收藏氨基酸代謝標記實驗標簽:氨基酸 代謝 標記精編分子生物學實驗指南第五版 第十章代謝標記技術用于研究蛋白質的生物合成、加工、細胞內運輸、分泌、降解和物理化學特性。內容來源于《精編分子生物學實驗指南(第五版)》? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
氨基酸代謝標記實驗
實驗方法原理 在含有放射性標記氨基酸的培養基中,短期培養細胞(800 Ci/mmol)/[35S]標記蛋白質水解產物試劑、試劑盒 PBS(冷凍)37℃ 脈沖標記培養基儀器、耗材 配有液體同位素垃圾閥門的真空吸氣器實驗步驟 1. 室溫融化 [35S] 標記甲硫氨酸,并用預熱的(37℃)脈沖標記培養基制
豚鼠離體氣管標本制備實驗
實驗材料豚鼠儀器、耗材木棍Kerbs營養溶液手術剪實驗步驟1. 氣管連環標本 豚鼠1只,體重500g,用木槌擊斃,立即從腹面正中切開皮膚和皮下組織,細心分離出氣管,自甲狀軟骨下剪下整段氣管,置于盛有Kerbs營養溶液的平皿中,剪除氣管周圍組織。從軟骨環之間由前向后和由后向前進行交叉橫切,均不完全切斷
豚鼠離體氣管標本制備實驗
實驗材料 豚鼠儀器、耗材 木棍Kerbs營養溶液手術剪實驗步驟 1. 氣管連環標本 豚鼠1只,體重500g,用木槌擊斃,立即從腹面正中切開皮膚和皮下組織,細心分離出氣管,自甲狀軟骨下剪下整段氣管,置于盛有Kerbs營養溶液的平皿中,剪除氣管周圍組織。從軟骨環之間由前向后和由后向前進行交叉橫切
視神經損傷模型實驗——坐骨神經移植及熒光金逆行性標記
實驗方法原理實驗材料實驗動物試劑、試劑盒1%戊巴比妥鈉熒光金儀器、耗材手術顯微鏡顯微手術器械實驗步驟(1)-(5)與視神經橫斷模型及熒光金逆行標記相同,不再贅述。(6)在眼球后極1mm處以顯微剪剪斷視神經。(7)取自體大鼠一側坐骨神經約1cm長,準備移植。(8)采用11-0帶針縫合線將坐骨神經縫合到
單個神經細胞標記實驗
實驗方法原理本例所用技術和結果引自Bishop和King(1982),在該文獻中也可找到更詳細的技術指導(也可參考Kitai and Bishop 1981)。實驗材料貓的小腦 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑
單個神經細胞標記實驗
用辣根過氧化物酶對單個Purkmje細胞進行細胞內標記實驗實驗方法原理本例所用技術和結果引自Bishop和King(1982),在該文獻中也可找到更詳細的技術指導(也可參考Kitai and Bishop 1981)。實驗材料貓的小腦試劑、試劑盒利多卡因Karnovsky 型固定液甲酚紫儀器、耗材微
單個神經細胞標記實驗
用辣根過氧化物酶對單個Purkmje細胞進行細胞內標記實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本例所用技術和結果引自Bishop和King(1982),在該文獻中也可找到更詳細的
離體主動脈條的標本制備實驗
實驗材料 家兔大鼠試劑、試劑盒 克氏液儀器、耗材 玻璃棒麥氏浴管實驗步驟 取兔或大鼠一只,猛擊其頭致死,立即剖開胸腔,分離胸主動脈,盡可能于近心臟處把其切斷,迅速置于盛有克氏液并通以95%氧氣及5%二氧化碳的培養皿中,剔除血管外結締組織及脂肪,洗去凝血塊,輕輕套在較主動脈稍小的玻璃棒上。然后用眼科剪
離體主動脈條的標本制備實驗
實驗材料家兔大鼠試劑、試劑盒克氏液儀器、耗材玻璃棒麥氏浴管實驗步驟取兔或大鼠一只,猛擊其頭致死,立即剖開胸腔,分離胸主動脈,盡可能于近心臟處把其切斷,迅速置于盛有克氏液并通以95%氧氣及5%二氧化碳的培養皿中,剔除血管外結締組織及脂肪,洗去凝血塊,輕輕套在較主動脈稍小的玻璃棒上。然后用眼科剪把主動脈
突觸的含義以及橫過突觸空隙傳遞神經訊號的步驟
突觸(synapse)是神經纖維間的連繫。所有的神經纖維都是以軸突末稍(dendrite)連到其它神經纖維的樹突末稍(axonbrush)。而且在軸突末稍和樹突末稍間留有一個空隙,稱為突觸空隙(synspticcleft)。如下圖所示。??橫過突觸空隙傳遞神經訊號的步驟:?(1)神經訊號到達軸突末稍
重組蛋白質的代謝標記實驗
由于重組蛋白質表達的時候,宿主蛋白質的合成基本終止,因此體內代謝標記是檢測重組蛋白質的敏感方法。實驗材料蛋白質試劑、試劑盒胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸儀器、耗材培養瓶離心機轉子實驗步驟1. ?接種2.5×106細胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培養液的60 mm 肌組織培養皿中。對每一假定重組病
重組蛋白質的代謝標記實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質 試劑、試劑盒
重組蛋白質的代謝標記實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸儀器、耗材 培養瓶離心機轉子實驗步驟 1. ?接種2.5×106細胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培養液的60 mm 肌組織培養皿中。對每一假定重組病毒分別準備一個平皿供感染用,并準備一個對照平皿供野生型桿狀病毒感染。于27℃溫育
神經所發現炎性轉錄因子在神經肌肉接頭突觸形成中的作用
神經所研究發現炎性轉錄因子NFkappaB在神經肌肉接頭突觸形成中的作用 p65基因敲除引起小鼠神經肌肉接頭異常 8月19日,《神經科學雜志》(The Journal of Neuroscience)發表了中國科學院上海生命科學研究院神經科學研究所的研究成果:“NFkappaB
[離體]根培養的定義
中文名稱[離體]根培養英文名稱root culture定 義從植物體上切下來的根尖或其一部分放在瓊脂培養液上進行的無菌培養。可用于根的生長和分化的研究。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞培養與細胞工程(二級學科)
[離體]莖培養的定義
中文名稱[離體]莖培養英文名稱stem culture定 義將從幾微米到幾十微米的莖分生組織,幾十毫米的莖尖或更大的芽,幼嫩的莖段和小塊塊莖等從母體植株上切下,放在無菌的人工條件下使其生長發育形成植株的技術。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞培養與細胞工程(二級學科)
康乃馨的離體快繁
儀器 設備和 試劑 超凈工作臺、帶有吸水紙的成套的培養皿,無菌水 培養基? N 6 +1 mg/L 6-BA 剪刀、槍型鑷子 量筒、酒精燈、濾紙、蒸餾水、小刷子 95%乙醇、70%酒精、70%酒精棉球、0.2%升汞、甲醛、高錳酸鉀、來蘇爾
氨基酸代謝標記實驗_備擇方案-3-長期細胞標記
實驗方法原理長期標記意味著對細胞進行 6~32 h 持續的代謝標記。該方法特別適用于研究合成速度相對較慢的蛋白質或研究成熟的標記蛋白而不是生物合成的前體。穩定狀態的標記是長期標記的一種形式,在此過程細胞和放射性標記的氨基酸一起孵育直至放射性標記蛋白的合成和降解速率相當。如果蛋白質復合體中的亞基的初級
離體蛙心臟灌流
實驗概要1.學習蛙離體心臟灌流方法。2.觀察Na 、K 、Ca2 、H 、腎上腺素、乙酰膽堿等因素對心臟活動的影響。實驗原理? ? 心臟的正常節律性活動需要一個適宜的內環境(如Na 、K 、Ca2 等的濃度及比例、pH值和溫度),而內環境的變化則直接影響到心臟的正常節律性活動。在體心臟還受交感神經和
蛋白質磷酸化的測定實驗—代謝標記
實驗材料細胞儀器、耗材培養瓶實驗步驟1. 用 60 mm 或 100 mm 培養瓶,在完全培養基中培養細胞至所希望的密度。2. 用預熱的低磷酸培養基(無放射性磷酸鹽)沖洗兩次,然后加入含 0.5~1 mCi32P/ml 的低磷酸培養基(50~100 μmol/L 無機磷酸)。3. 培養結束后,回收?