分離小鼠胚胎實驗
分離小鼠胚胎可以用于:(1)體外培養小鼠胚胎,摸索適宜培養條件。(2)使用胚胎進行發育生物學研究。實驗方法原理胚胎是懷孕最初兩個月內的幼體。囊胚、胚的早期發育和胚胎發育是一個連續過程。在體節時期,三個胚層都發生了變化。外胚層在背部中線凹陷成溝,稱神經溝,溝的兩岸稱神經脊。神經脊逐漸接近、愈合,致使神經演變為縱貫胚體的神經管。神經管和神經脊將來演化為神經系統。內胚層隨著胚體卷曲成管狀,稱原腸,原腸依部位又分為前腸、中腸和后腸。實驗材料DBSS試劑、試劑盒70%乙醇儀器、耗材培養皿尖鑷子尖剪刀超凈工作臺本生燈實驗步驟1. 交配。將分籠的雄鼠和雌鼠合籠進行交配,雌鼠 3 天后可進入動情期,此時交配的成功率最高。這一過程可以有計劃地進行,使胚胎在適宜的時間產生。為確定成功交配的時間需每天早晨檢查雌鼠的陰栓。2. 計算胚胎發育時間:將發現陰栓的日子定為零天,胚胎發育時間由這一天開始計算。整個孕期約為 19~21 天,分離完整胚胎進行細胞培......閱讀全文
分離小鼠胚胎實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 胚胎是懷孕最初兩個月內的幼體。囊胚、胚的早期發育和胚胎發育是一個連續過程。在體節時期,三個胚層都發生了變化。外胚層在背部中線凹陷成溝,稱神經溝,溝的兩岸稱神經脊。神經脊逐漸接近、愈合,致使神經演變為縱貫胚體的神經管。神經管和神經
分離小鼠胚胎實驗
分離小鼠胚胎可以用于:(1)體外培養小鼠胚胎,摸索適宜培養條件。(2)使用胚胎進行發育生物學研究。實驗方法原理胚胎是懷孕最初兩個月內的幼體。囊胚、胚的早期發育和胚胎發育是一個連續過程。在體節時期,三個胚層都發生了變化。外胚層在背部中線凹陷成溝,稱神經溝,溝的兩岸稱神經脊。神經脊逐漸接近、愈合,致使神
分離小鼠胚胎實驗
實驗方法原理 無菌條件下切除孕鼠(已知懷孕時間)子宮,分離胚胎。實驗材料 DBSS試劑、試劑盒 70%乙醇儀器、耗材 培養皿尖鑷子尖剪刀超凈工作臺本生燈實驗步驟 1. 交配。將分籠的雄鼠和雌鼠合籠進行交配,雌鼠 3 天后可進入動情期,此時交配的成功率最高。這一過程可以有計劃地進行,使胚胎在適宜的時間
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
原代細胞培養可應用于:(1)分子生物學;(2)細胞生物學;(3)遺傳學;(4)免疫學;(5)腫瘤學;(6)病毒學等領域。實驗方法原理原代細胞培養,是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官,在體外培養,直到第一次傳代為止。這種培養,首先用無菌操作的方法,從動物體內取出所需的組織(或器官),經胰酶消化,
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
鼠胚原代細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代細胞培養,是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官,在體外培養,直到第一次傳代為止。這種培養,首先用無菌操作的方法,從動物
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
鼠胚原代細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代細胞培養,是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官,在體外培養,直到第一次傳代為止。這種培養,首先用無菌操作的方法,從動物
小鼠胚胎干細胞培養實驗
實驗方法原理 胚胎干細胞在體內外可以分化為各種類型的細胞。我們的體外分化方法有利于神經前體細胞通過在最少量的培養基內選擇(第3步),在有bFGF存在的情況下擴增(第4步)并最終分化在第5步。細胞全程培養在37℃,5%CO2,100%濕度條件下。一般體外誘導向神經細胞方向分化,也可以采用低濃度的RA進
小鼠胚胎干細胞培養實驗
體外分化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 胚胎干細胞在體內外可以分化為各種類型的細胞。我們的體外分化方法有利于神經前體細胞通過在最少量的培養基內選擇(第3步),在有bFGF存
小鼠胚胎干細胞培養實驗
體外分化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 胚胎干細胞在體內外可以分化為各種類型的細胞。我們的體外分化方法有利于神經前體細胞通過在最少量的培養基內選擇(第3步),在有bFGF存
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟
一般培養-保持胚胎干細胞處于未分化狀態 培養基 細胞復蘇 凍存細胞 明膠包被 細胞傳代 體外分化 培養基 包被有多聚鳥氨酸/纖維結合蛋白的培養板(使用或不使用蓋玻片) 體外分化方法 注:以下培養針對于小鼠的R1胚胎干細胞系,其它胚胎
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟
1、一般培養——保持胚胎干細胞處于未分化狀態?培養基細胞復蘇凍存細胞明膠包被細胞傳代?2 、體外分化?培養基:包被有多聚鳥氨酸/纖維結合蛋白的培養板(使用或不使用蓋玻片)?體外分化方法?注:以下培養針對于小鼠的R1胚胎干細胞系,其它胚胎干細胞的培養可以參考。不過人的胚胎干細胞培養不可以采用下面的pr
胚胎小鼠紋狀體神經干細胞的分離培養及鑒定
原代、傳代培養實驗材料孕13d的昆明種二級小鼠 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒胎牛血清 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
胚胎小鼠紋狀體神經干細胞的分離培養及鑒定
方法:神經干細胞的培養①原代細胞的培養:取孕13.5天昆明種二級孕小鼠,引臼脫頸處死,碘酒、乙醇消毒腹部,逐層剖開腹部皮膚、肌肉、腹膜,取出子宮,放入盛有D1-SGH液的器皿中。仔細剝離胎膜、羊膜,暴露胎鼠,剪開顱骨,取出胎鼠腦組織并轉移至另一盛有D1-SGH液的器皿中,體視顯微鏡下剝離腦膜,分離胎
胚胎小鼠紋狀體神經干細胞的分離培養及鑒定
原代、傳代培養 實驗材料 孕13d的昆明種二級小鼠 試劑、試劑盒 胎牛血清
小鼠單個核細胞的分離實驗
基 本 方 案 從 脾 臟 、胸腺和淋巴結制備細胞懸液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培養基新鮮分離的小鼠器官: < 6 周齡的小鼠胸腺; 6 周 至 6 個月齡的小鼠脾臟和淋巴結60 mmX 15 mm 培養皿剪 刀 和 鑷 子(保 存 在 7 0 % 乙醇的燒杯中)裝 有 19 G 針
小鼠單個核細胞的分離實驗
實驗步驟基 本 方 案 從 脾 臟 、胸腺和淋巴結制備細胞懸液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培養基新鮮分離的小鼠器官: < 6 周齡的小鼠胸腺; 6 周 至 6 個月齡的小鼠脾臟和淋巴結60 mmX 15 mm 培養皿剪 刀 和 鑷 子(保 存 在 7 0 % 乙醇的燒杯中)裝 有 19
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟(四)
第3步--ITSFn培養基在最少量培養基中選擇神經前體細胞1.在胚狀體接種在組織培養皿一天后將培養基換成ITSFn培養基2.并非所有胚狀體在這一時期都已經發生粘附,因此在移除培養基時要小心謹慎以使大部分胚狀體留在培養皿內。3.保持細胞在ITSFn中培養大約10天,根據需要更換培養基--大約每隔一天。
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟(二)
Geltin(明膠)包被準備500ml 0.1%geltin溶液1.將0.5 g明膠溶解在500ml無鈣鎂的PBS中(50-65℃水浴15~30分鐘)。2.最好在溶液沒有冷卻的情況下通過0.22 μm濾膜過濾,貯存在4℃。包被培養板或培養皿1.加入足量的明膠溶液覆蓋培養平面(15 cm培養皿加2ml
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟(三)
ITSFn and N3(分化培養基):配制一20×不含DMEM/F12的溶液。分裝在15ml 離心管中,(稀釋為1×,ITSFn 7.05ml,N3 12.55ml),0.2μm濾膜過濾,貯存在-20℃。將該溶液加入DMEM/F12中制備培養基,貯存于4℃。 貯存液??????????DMEM(高
小鼠胚胎干細胞培養實驗步驟(一)
一般培養-保持胚胎干細胞處于未分化狀態培養基細胞復蘇凍存細胞明膠包被細胞傳代體外分化培養基包被有多聚鳥氨酸/纖維結合蛋白的培養板(使用或不使用蓋玻片)體外分化方法注:以下培養針對于小鼠的R1胚胎干細胞系,其它胚胎干細胞的培養可以參考。不過人的胚胎干細胞培養不可以采用下面的protocol,需要用專用
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養實驗
胰酶消化法1 胰酶消化法2 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的胚胎成纖維細胞(MEF)從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置MEF
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養實驗
胰酶消化法1 胰酶消化法2 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的胚胎成纖維細胞(MEF)從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置MEF
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養實驗
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療相關研究。實驗方法胰酶消化法1胰酶消化法2實驗方法原理將小鼠的胚胎成纖維細胞(MEF)從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置MEF生長培養基中培養,使細胞得以生存、生
小鼠胚胎干細胞培養實驗——體外分化法
小鼠胚胎干細胞培養可以:(1)細胞保種;(2)用于干細胞研究;(3)用于細胞生理學、形態學等研究;(4)動物克隆。實驗方法原理胚胎干細胞在體內外可以分化為各種類型的細胞。我們的體外分化方法有利于神經前體細胞通過在最少量的培養基內選擇(第3步),在有bFGF存在的情況下擴增(第4步)并最終分化在第5步
雞胚胎成肌細胞的分離和培養實驗
細胞培養物的制備 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 HBSS 胰酶溶液 膠原溶液
雞胚胎成肌細胞的分離和培養實驗
細胞培養物的制備 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 HBSS 胰酶溶液 膠原溶液
胚胎小鼠紋狀體神經干細胞分離培養鑒定_原代傳代培養
實驗材料孕13d的昆明種二級小鼠試劑、試劑盒胎牛血清青霉素鏈霉素胰酶阻斷劑葡萄糖臺盼藍蔗糖酚紅磷酸氫二鉀磷酸氫二鈉FITC 偶聯熒光抗小鼠二抗氯化鈉氯化鉀碘酒乙醇儀器、耗材解剖剪虹膜剪眼科剪離心機自動雙重純水蒸餾器微孔濾膜濾器培養箱體視顯微鏡無菌超凈工作臺培養瓶96孔細胞培養板24孔細胞培養板6 孔
小鼠feeder細胞分離
You will need:13.5 day pregnant mouse (we use MTK NEO inbred white mice)2 sets sterile instrumentsone containing a pair of curved forceps and a pair o
小鼠胚胎干細胞的培養
實驗概要了解小鼠胚胎干細胞的培養方法。主要試劑1. 貯存液 DMEM(高糖) 胎牛血清 L-谷氨酰胺(200mM) MEM NEAA(10mM) HEPES(1M) β-巰基乙醇(55Mm) 轉鐵蛋白50mg/ml 胰島素5mg/ml 亞硒酸鈉300μM 黃體酮(20μM) 腐
小鼠胚胎干細胞的培養
完全培養基: 高糖DMEM (GIBCO 12430); 15%胎牛血清(BIOCHROM S0615); 0.1 mmol/L非必需氨基酸(GIBCO 11140-050); 2 mmol/L谷氨酰胺(GIBCO 25030); 0.1 mmol/L β-巰基乙醇(GIBCO 21985); 1