昆蟲細胞的保存和培養實驗
實驗材料昆蟲試劑、試劑盒胎牛血清臺盼藍乙醇儀器、耗材培養瓶培養箱細胞計數器攪拌臺轉子離心機實驗步驟1. 將4 ml 含10%胎牛血清的完全昆蟲細胞培養基加入一個25 cm2 培養瓶。取出一支凍存Sf9細胞的安瓿,迅速置于37℃水浴,用手前后劇烈搖動融化之,當安瓿的內容物幾乎完全融化時,將安瓿浸入70%乙醇,消毒外壁。2. 打碎安瓿頸部,將內容物轉移至25 cm2 培養瓶,用手輕輕搖動培養瓶,使細胞分散均勻,于27℃溫育2~3 h 直到細胞貼壁。 3. 除去舊培養液,換5 ml 含10%胎牛血清的新鮮完全培養液。繼續溫育,每3天換液一次,直到細胞生長匯片。4. 準備一個新的25 cm2 培養瓶,加入4 ml 含10%胎牛血清的完全培養液5. 當Sf9細胞已生長匯片時,棄去培養瓶中的培養液。加入新鮮的完全培養液,用移液管輕柔......閱讀全文
昆蟲細胞的保存和培養實驗
實驗材料 昆蟲試劑、試劑盒 胎牛血清臺盼藍乙醇儀器、耗材 培養瓶培養箱細胞計數器攪拌臺轉子離心機實驗步驟 1. ?將4 ml 含10%胎牛血清的完全昆蟲細胞培養基加入一個25 cm2 培養瓶。取出一支凍存Sf9細胞的安瓿,迅速置于37℃水浴,用手前后劇烈搖動融化之,當安瓿的內容物幾乎完全融化時,將安
昆蟲細胞的保存和培養實驗
實驗材料昆蟲試劑、試劑盒胎牛血清臺盼藍乙醇儀器、耗材培養瓶培養箱細胞計數器攪拌臺轉子離心機實驗步驟1. ?將4 ml 含10%胎牛血清的完全昆蟲細胞培養基加入一個25 cm2?培養瓶。取出一支凍存Sf9細胞的安瓿,迅速置于37℃水浴,用手前后劇烈搖動融化之,當安瓿的內容物幾乎完全融化時,將安瓿浸入7
昆蟲細胞的保存培養實驗
基本方案實驗方法原理實驗材料草地夜蛾(Sf 9)細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒70%乙醇 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
昆蟲細胞的保存培養實驗
實驗材料草地夜蛾(Sf 9)細胞試劑、試劑盒70%乙醇0.4%(m V)臺盼藍儀器、耗材無血清昆蟲細胞培養基60 mm 培養皿或 25 cm2 培養瓶 27℃ 培養箱旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐實驗步驟1. 將 3 ml 含 10% 胎牛血清的昆蟲細胞培養基 TNM-FH
昆蟲細胞的保存培養實驗
實驗方法原理 實驗材料 草地夜蛾(Sf 9)細胞試劑、試劑盒 70%乙醇0.4%(m V)臺盼藍儀器、耗材 無血清昆蟲細胞培養基60 mm 培養皿或 25 cm2 培養瓶 27℃ 培養箱旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐實驗步驟 1. 將 3 ml 含 10% 胎牛血清的昆蟲細
昆蟲細胞的保存培養實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 草地夜蛾(Sf 9)細胞
昆蟲病毒的培養實驗
實驗方法原理培養昆蟲病毒主要采取組織培養和感染宿主兩種方法,后者比較容易成功,使用更為廣泛。本實驗以斜紋夜蛾(Prodenialitura)核型多角體感染宿主來培養病毒。斜紋夜蛾能危害棉花、蔬菜等多種作物。核型多角體病毒是多角體病毒侵入宿主細胞后,在細胞核內形成多角體,多角體內包含著很多病毒粒子。斜
昆蟲病毒的培養實驗
實驗方法原理 培養昆蟲病毒主要采取組織培養和感染宿主兩種方法,后者比較容易成功,使用更為廣泛。本實驗以斜紋夜蛾(Prodenialitura)核型多角體感染宿主來培養病毒。斜紋夜蛾能危害棉花、蔬菜等多種作物。核型多角體病毒是多角體病毒侵入宿主細胞后,在細胞核內形成多角體,多角體內包含著很多病毒粒子。
昆蟲細胞轉染實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 昆蟲細胞 試劑、試劑盒
昆蟲細胞轉染實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 昆蟲細胞 試劑、試劑盒
昆蟲細胞轉染實驗
實驗材料昆蟲細胞試劑、試劑盒胎牛血清脂質體轉染劑儀器、耗材培養皿錐形瓶培養箱離心機轉子實驗步驟1. ?接種2x106個Sf9細胞于60 mm 培養皿,在含10%胎牛血清的完全培養液或無血清培養液中培養,于27℃培養30~60 min,讓細胞貼壁。2. ?相應于毎一待轉染的培養皿,吸取40 ul 無菌
昆蟲細胞轉染實驗
實驗材料 昆蟲細胞試劑、試劑盒 胎牛血清脂質體轉染劑儀器、耗材 培養皿錐形瓶培養箱離心機轉子實驗步驟 1. ?接種2×106個Sf9細胞于60 mm 培養皿,在含10%胎牛血清的完全培養液或無血清培養液中培養,于27℃培養30~60 min,讓細胞貼壁。2. ?相應于毎一待轉染的培養皿,吸取40
關于昆蟲細胞培養的發展和關鍵點介紹
隨著生命科學的迅速發展,細胞工程愈來愈受到人們的重視。以昆蟲細胞為對象的細胞培養技術在現代實驗生物學上具有重要的價值,已經廣泛地應用于醫學、農業及生物學的各個領域。昆蟲細胞是農業生物應用方面的高新技術,主要是提取來自昆蟲的一類真核細胞。通過培養制造宿主的病毒,這些病毒可以引起昆蟲流行病,但對人畜和植
盤基網柄菌培養物發育和儲存實驗_細胞和孢子長期保存
實驗材料細胞懸液試劑、試劑盒DMSO儀器、耗材HL5 培養基Eppendorf 管或凍存管實驗步驟一、凍存細胞1. 用新鮮的 HL5 培養基收獲細胞,使其密度為 2X106?到 4X106,將等分為 1 ml 的細胞懸液加入到 1.5 ml 的 Eppendorf 管或凍存管中,置于冰上。2. 加入
昆蟲細胞共轉染實驗
基本方案 用線性化桿狀病毒DNA ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 草地夜蛾(Sf 9)細胞
昆蟲細胞共轉染實驗
實驗材料草地夜蛾(Sf 9)細胞含目的基因的重組桿狀病毒轉移質粒陽性對照載體:pVL 1392 - XylE試劑、試劑盒ORF 1629 缺失的線性 AcMNPV DNA轉染緩沖液 B轉染緩沖液A500 mmol/L 兒茶酚/50 mmol/L 硫酸氫鈉儀器、耗材含 10% 胎牛血清(FBS)的 T
昆蟲細胞共轉染實驗
實驗方法原理 實驗材料 草地夜蛾(Sf 9)細胞含目的基因的重組桿狀病毒轉移質粒陽性對照載體:pVL 1392 - XylE試劑、試劑盒 ORF 1629 缺失的線性 AcMNPV DNA轉染緩沖液 B轉染緩沖液A500 mmol/L 兒茶酚/50 mmol/L 硫酸氫鈉儀器、耗材 含 10% 胎牛
如何使昆蟲細胞適應新的培養液
市場上供應的大多數培養液的配方非常接近,這使得細胞很容易適應新的培養液。這里我將詳細介紹一個方法,這個方法是保守的,在大多數情況下可以進行刪減一些步驟。最簡單最節省時間的情況是把細胞直接分裝到新的培養液中,觀察幾代以保證細胞的生長參數是可以接受的。這個方法適于懸浮細胞,不過也很容易擴展到貼壁細胞。細
細胞培養標本的采集及保存
細胞培養標本的采集及保存:1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放
微藻助力,讓昆蟲化石完整保存
?來自法國普羅旺斯艾克斯組的蜘蛛化石。圖片來自Alison Olcott一項研究發現,法國南部出土的2250萬年前的蜘蛛化石之所以保存得異常完好,或許要得益于硅藻這種微藻的分泌物。化石記錄中很少能看到體型小而脆弱的動物被完整地保存下來,比如蜘蛛、昆蟲、兩棲動物。最新描述的這種由硅藻協助的過程,或對人
培養細胞的形態觀察和計數實驗
實驗方法原理 體外培養的細胞主要有兩種狀態。一種是能貼附在培養支持物上的細胞,如HeLa 細胞、NIH3T3 等,叫貼壁型細胞,體外培養的細胞大多屬于這種細胞。另一種細胞并不貼附在容器的壁上,而是懸浮在培養液中生長,如HL60 細胞,叫做懸浮型細胞,這類細胞主要是血液原性或癌原性細胞。在細胞
昆蟲細胞的擴增
實驗方法原理用機械法從細胞單層分離細胞,在 27°C 條件下和懸浮狀態下進行擴增培養。實驗材料Sf9細胞二甲基亞砜Pluronic F68試劑、試劑盒生長培養液儀器、耗材培養瓶旋轉培養瓶和磁力攪拌器27°C培養箱實驗步驟常規維持培養1. 通過刮取法或用培養液沖洗細胞(( ATCC # CRL-171
昆蟲細胞的擴增
實驗方法原理?用機械法從細胞單層分離細胞,在 27°C 條件下和懸浮狀態下進行擴增培養。實驗材料?Sf9細胞二甲基亞砜Pluronic F68試劑、試劑盒?生長培養液儀器、耗材?培養瓶旋轉培養瓶和磁力攪拌器27°C培養箱實驗步驟 常規維持培養1. 通過刮取法或用培養液沖洗細胞(( ATCC # CR
昆蟲細胞的擴增
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用機械法從細胞單層分離細胞,在 27°C 條件下和懸浮狀態下進行擴增培養。 實驗材料 Sf9細胞 二甲基亞砜
常規培養細胞計數、保存、運輸等法
?細胞懸液制備后,要計算所含的細胞數量。一般以細胞數/毫升表示。用品:細胞懸液 培養液 計數板程序用酒精沖洗計數板后 擦凈,將蓋片覆在計算板上,微微移向一側,以便滴加細胞懸液.取一吸管伸入培養瓶,輕輕吸打細胞懸液混勻。從蓋片邊緣滴加細胞懸液,使其充滿計數板和蓋片間的空隙中注意:勿使液體漫過蓋片或出現
常規培養細胞計數、保存、運輸等法
程序用酒精沖洗計數板后 擦凈,將蓋片覆在計算板上,微微移向一側,以便滴加細胞懸液.取一吸管伸入培養瓶,輕輕吸打細胞懸液混勻。從蓋片邊緣滴加細胞懸液,使其充滿計數板和蓋片間的空隙中注意:勿使液體漫過蓋片或出現氣泡。鏡下觀察計數 計算計數板的四角大格內的細胞數,壓線者只計算左側和上方的,右和下的不計算在
免疫細胞的分離和保存技術
概述臨床上的各種類型的免疫缺陷、自身免疫病以及腫瘤等疾病均可出現淋巴細胞或淋巴亞群的數量和功能的變化。因此用體外方法對機體具有免疫反應的外周血淋巴細胞及其亞群的數目或比例以及它們所顯示的功能的強弱進行檢測,是判斷機體細胞免疫水平的一種重要手段。這對于臨床認識疾病、探討其發病機制、觀察病情變化、判斷預
新生大鼠心臟細胞的分離和培養實驗
實驗材料?Sprague Dawley 幼鼠試劑、試劑盒?胰酶液乙醇儀器、耗材?攪拌臺燒杯實驗步驟 組織消化和分離細胞1. 在細胞操作間內,放一個加熱攪拌臺,上放一個裝有 100 ml 滅菌水的容量 600 ml 的燒杯,加熱至 37℃。2. 準備胰酶液。用水浴或溫箱使胰酶液溫度保持在 37℃。3.
新生大鼠心臟細胞的分離和培養實驗
分離及培養程序 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 Sprague Dawley 幼鼠 試劑、試劑盒
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