細菌V.P實驗
實驗材料大腸埃希氏菌產氣腸桿菌普通變形桿菌枯草芽孢桿菌試劑、試劑盒NaOH溶液肌酸甲基紅試劑吲哚試劑乙醚溴甲基酚紫指示劑儀器、耗材超凈工作臺恒溫培養箱高壓滅菌鍋試管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培養基蛋白胨水培養基糖發酵培養基實驗步驟1. 標記試管 取裝有葡萄糖蛋白胨培養液的試管,根據需要將培養的細菌做好標記。2. 接種培養 以無菌操作分別接種少量菌苔至以上相應試管中,空白對照管不接種,置37℃恒溫箱中,培養24~48h。3. 觀察記錄 取出以上試管,振蕩2min。另取5支空試管相應標記菌名,分別加入3~5ml以上對應管中的培養液,再加入40%NaOH溶液10~20滴,并加入約0.5~1mg微量肌酸,振蕩試管,以使空氣中的氧溶入,置37℃恒溫箱中保溫15~30min后,若培養液呈紅色,記錄為V.P.試驗陽性反應(用“+”表示);若不呈紅色,記錄為V.P.試驗陰性反應(用“-”表示)。展開......閱讀全文
細菌V.P實驗
實驗材料 大腸埃希氏菌產氣腸桿菌普通變形桿菌枯草芽孢桿菌試劑、試劑盒 NaOH溶液肌酸甲基紅試劑吲哚試劑乙醚溴甲基酚紫指示劑儀器、耗材 超凈工作臺恒溫培養箱高壓滅菌鍋試管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培養基蛋白胨水培養基糖發酵培養基實驗步驟 1. 標記試管 取裝有葡萄糖蛋白胨培養液的試管,根據需要將
細菌V.P實驗
實驗材料大腸埃希氏菌產氣腸桿菌普通變形桿菌枯草芽孢桿菌試劑、試劑盒NaOH溶液肌酸甲基紅試劑吲哚試劑乙醚溴甲基酚紫指示劑儀器、耗材超凈工作臺恒溫培養箱高壓滅菌鍋試管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培養基蛋白胨水培養基糖發酵培養基實驗步驟1. 標記試管 取裝有葡萄糖蛋白胨培養液的試管,根據需要將培養的細
細菌V.P實驗
實驗材料大腸埃希氏菌產氣腸桿菌普通變形桿菌枯草芽孢桿菌試劑、試劑盒NaOH溶液肌酸甲基紅試劑吲哚試劑乙醚溴甲基酚紫指示劑儀器、耗材超凈工作臺恒溫培養箱高壓滅菌鍋試管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培養基蛋白胨水培養基糖發酵培養基實驗步驟1. 標記試管 取裝有葡萄糖蛋白胨培養液的試管,根據需要將培養的細
細菌V.P實驗
實驗材料大腸埃希氏菌產氣腸桿菌普通變形桿菌枯草芽孢桿菌試劑、試劑盒NaOH溶液肌酸甲基紅試劑吲哚試劑乙醚溴甲基酚紫指示劑儀器、耗材超凈工作臺恒溫培養箱高壓滅菌鍋試管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培養基蛋白胨水培養基糖發酵培養基實驗步驟1. 標記試管 取裝有葡萄糖蛋白胨培養液的試管,根據需要將培養的細
副溶血性弧菌PCR檢測技術
近年來,隨著微生物基因組學的發展,微生物基因檢測迎來了新的機遇。2000年,Makino等已經完成V.p的基因組測序,V.p毒力基因及特異的基因序列得到進一步確定。根據V.p特異基因序列,設計引物,進行PCR檢測,是現階段檢測V,p的最快速準確的方法。目前應用于檢測V.p的PCR方法主要有任意引物
細菌培養實驗
實驗步驟一、需氧培養法:本法是臨床細菌室最常用的培養方法,適合一般需氧和兼性厭氧菌的培養。需氧培養的常用溫度為 35-37℃,這適合于絕大多數致病菌的生長。此外,還有用 4℃ 培養,如李斯德菌除了能在 37℃ 中生長外。還能在 4℃ 中生長,而其他革蘭氏陽性菌則不能,故可用于鑒別。李斯德菌在 25℃
細菌培養實驗
一、需氧培養法:本法是臨床細菌室最常用的培養方法,適合一般需氧和兼性厭氧菌的培養。需氧培養的常用溫度為 35-37℃,這適合于絕大多數致病菌的生長。此外,還有用 4℃ 培養,如李斯德菌除了能在 37℃ 中生長外。還能在 4℃ 中生長,而其他革蘭氏陽性菌則不能,故可用于鑒別。李斯德菌在 25℃
細菌鑒定實驗
實驗方法原理 玻片凝集反應(slide agglutirlation)是將已知的抗體直接與未知的顆粒性抗原物質(如細菌,立克次體,鉤端螺旋體等)混合,在有適當電解質存在的條件下,如兩者對應便發生特異性結合而形成肉眼可見的凝集物,即為陽性:如兩者不對應便無凝集物出現,即為陰性。此法屬定性試驗,
副溶血性弧菌的PCR檢測的介紹
用于檢測V.p的PCR方法主要有任意引物PCR(abritrarilyprimedPCR,Ap-PCR)、針對任意引物PCR、多重PCR(muhiplex-PCR)、實時PCR(Real-timePCR)。 1、任意引物PCRMatsumoto等采用任意引物PCR對V.p進行檢測。他們針對V。
細菌細胞的制備實驗實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 弗氏破碎緩沖液勻漿緩沖液儀器、耗材 弗氏破碎器實驗步驟 1. 將 5~10 g 新鮮或凍存的細胞沉淀物垂懸于弗氏破碎緩沖液中或者適當的勻漿緩沖液中。通常 4L 的大腸桿菌培養物可以獲得大約 7.5 g 的細胞沉淀。2. 懸液中加入無 RNase 的 DNase 至終濃度為
細菌細胞的制備實驗實驗
細胞抽提物的制備 核糖體及多核糖體的分離 70S核糖體的純化 多核糖體的純化 將核糖體解離為大亞基和小亞基 ? ? ? ? ? ? 實驗材料
細菌細胞的制備實驗實驗
細胞抽提物的制備核糖體及多核糖體的分離70S核糖體的純化多核糖體的純化將核糖體解離為大亞基和小亞基實驗材料細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒弗氏破碎緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
細菌簡單染色實驗
實驗方法原理 常用堿性染料進行簡單染色,這是因為:在中性、堿性或弱酸性溶液中,細菌細胞通常帶負電荷,而堿性染料在電離時,其分子的染色部分帶正電荷(酸性染料電離時,其分子的染色部分帶正電荷)。因此堿性染料的染色部分很容易與細菌結合使細菌著色。經染色后的細菌細胞與背景形成鮮明的對比,在顯微鏡下更易于識別
細菌的生化實驗
各種細菌具有各自獨特的酶系統,因而對底物的分解能力不同,其代謝產物也不同。用生物化學方法測定這些代謝產物,可用來區別和鑒定細菌的種類。利用生物化學方法來鑒別不同細菌,稱為細菌的生物化學試驗或稱生化反應。生物化學試驗的方法很多,這里主要介紹碳水化合物的代謝試驗1.糖(醇、苷)類發酵試驗(1)原理:不同
細菌糖發酵實驗
實驗材料大腸埃希氏菌產氣腸桿菌普通變形桿菌枯草芽孢桿菌試劑、試劑盒NaOH溶液肌酸甲基紅試劑吲哚試劑乙醚溴甲基酚紫指示劑儀器、耗材超凈工作臺恒溫培養箱高壓滅菌鍋試管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培養基蛋白胨水培養基糖發酵培養基實驗步驟1. 試管標記 取分別裝有不同糖類(如葡萄糖、蔗糖和乳糖等)發酵培
細菌RNA制備實驗
實驗材料 RNA試劑、試劑盒 STET氯仿乙酸鈉氯化銫無水乙醇EDTA儀器、耗材 離心機分光光度計搖床實驗步驟 1. ?培養100 ml 大腸桿菌或500 ml 藍細菌至對數生長期,加入1/20體積終止緩沖液,置于冰上。2. ?于4℃用JA-10轉子17 700 g 離心5 min 收集細胞。3.
細菌芽孢染色實驗
實驗方法原理?用著色力強的染色劑孔雀緣或石炭酸復紅,在加熱條件下染色,使染料不僅進入菌體也可進入芽孢內卡進入菌體的染料經水洗后被脫色,而芽孢一經著色難以被水洗脫當用對比度大的復染劑染色后,芽孢仍保留初染劑的顏色,而菌體和芽孢囊被染成復染劑的顏色,使芽孢和菌體更易于區分。實驗材料?蠟樣芽孢桿菌(約2d
細菌的生化實驗
? 各種細菌具有各自獨特的酶系統,因而對底物的分解能力不同,其代謝產物也不同.用生物化學方法測定這些代謝產物,可用來區別和鑒定細菌的種類.利用生物化學方法來鑒別不同細菌,稱為細菌的生物化學試驗或稱生化反應.生物化學試驗的方法很多,這里主要介紹碳水化合物的代謝試驗1.糖(醇、苷)類發酵試驗? (1)原
細菌簡單染色實驗
實驗方法原理常用堿性染料進行簡單染色,這是因為:在中性、堿性或弱酸性溶液中,細菌細胞通常帶負電荷,而堿性染料在電離時,其分子的染色部分帶正電荷(酸性染料電離時,其分子的染色部分帶正電荷)。因此堿性染料的染色部分很容易與細菌結合使細菌著色。經染色后的細菌細胞與背景形成鮮明的對比,在顯微鏡下更易于識別,
細菌RNA制備實驗
革蘭氏陰性細菌中提取 革蘭氏陽性細菌中提取 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 RNA 試
細菌糖發酵實驗
實驗材料?大腸埃希氏菌產氣腸桿菌普通變形桿菌枯草芽孢桿菌試劑、試劑盒?NaOH溶液肌酸甲基紅試劑吲哚試劑乙醚溴甲基酚紫指示劑儀器、耗材?超凈工作臺恒溫培養箱高壓滅菌鍋試管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培養基蛋白胨水培養基糖發酵培養基實驗步驟 1. 試管標記 取分別裝有不同糖類(如葡萄糖、蔗糖和乳糖等
細菌RNA制備實驗——革蘭氏陰性細菌中提取
實驗材料RNA試劑、試劑盒STET氯仿乙酸鈉氯化銫無水乙醇EDTA儀器、耗材離心機分光光度計搖床實驗步驟1. ?培養100 ml 大腸桿菌或500 ml 藍細菌至對數生長期,加入1/20體積終止緩沖液,置于冰上。2. ?于4℃用JA-10轉子17 700 g 離心5 min 收集細胞。3. ?用2
細菌克隆的溶解實驗
試劑、試劑盒?IPTG溶源菌抽提緩沖液氯化鈉溶菌酶LB 瓊脂平板儀器、耗材?氣體恒溫箱液氮Millipore 濾紙水浴搖床牙簽或接種環噬菌體λgt11λgt18-23λZAP 和λZipLox 重組子大腸桿菌 Y1090 hsdR 菌株及 Y1089 菌株實驗步驟?材料緩沖液和溶液貯存液,緩沖液和試
細菌硫化氫實驗
實驗方法原理某些細菌分解培養基中胱氨酸等含硫氨基酸生成硫化氫,硫遇到培養基中的鉛鹽或鐵鹽(如硫酸亞鐵)形成黑褐色的硫化鉛(或硫化鐵)沉淀物。實驗步驟將乙型副傷寒桿菌和大腸桿菌分別穿刺接種于醋酸鉛培養基中,置37℃恒溫箱經18~24小時培養后,若出現黑色沉淀者為陽性。
細菌克隆的溶解實驗
細菌克隆的溶解實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 具有原噬菌體的細菌稱為溶原性細菌。噬菌體分為烈性噬菌體和溶原性噬菌體,在感染于寄主細菌細胞時,前者往往在菌體內增殖并將菌體裂
細菌的分布觀察實驗
儀器、耗材普通瓊脂培養基血平板鑷子實驗步驟1. 空氣中細菌的分布(1)方法:采用沉降法,暴皿15分鐘,常規培養24小時觀察結果。(2)結果觀察:培養基表面菌落生長情況。2. 皮膚表面細菌的分布(1)方法:采用涂抹法,將手指于酒精消毒前后分別涂抹瓊脂平板表面,常規培養24小時觀察結果。(2)結果觀察:
噬菌體侵染細菌實驗
這種說法有點偏頗。1、當噬菌體的DNA用32磷標記后,它吸附到大腸桿菌表面,然后把DNA注入到大腸桿菌里面,利用其中的原料復制子代的DNA。離心后,較輕的噬菌體懸浮在上清液中,大腸桿菌及一些較重的顆粒沉淀在底部,由于噬菌體中含有32磷的DNA都注入到大腸桿菌里面,所以上清液放射性很低,底部的沉淀物放
細菌克隆的溶解實驗
細菌克隆的溶解實驗可以用于:(1)從表達特定融合蛋白質的重組噬菌體構建噬菌體溶源菌;(2)從該溶源菌誘導合成并純化出融合的目的蛋白質。實驗方法原理具有原噬菌體的細菌稱為溶原性細菌。噬菌體分為烈性噬菌體和溶原性噬菌體,在感染于寄主細菌細胞時,前者往往在菌體內增殖并將菌體裂解。實驗材料大腸桿菌噬菌體試劑
細菌運動性觀察實驗
實驗方法原理 實驗材料 蘇云金芽孢桿菌假單胞菌金黃色葡萄球菌試劑、試劑盒 硝酸銀鞭毛染色液 Leifson 氏鞭毛染色液0.01% 美藍水溶液儀器、耗材 載玻片蓋玻片凹載玻片無菌水凡士林顯微鏡實驗步驟 玻片的準備、菌種材料的準備同鞭毛染色實驗。1. 涂凡士林取潔凈凹載玻片,在其四周涂少許凡士林(圖
細菌的革蘭氏染色實驗
實驗方法原理G+菌細胞壁肽聚糖含量多,結構致密,脂質少,乙醇不易滲入脫色;G-菌細胞壁肽聚糖含量少,結構疏松,脂質多,乙醇容易溶解脂質而滲入脫色。G+菌菌體含有大量核糖核酸鎂鹽,能與結晶紫、碘牢固結合,使乙醇不易將其脫色;G-菌菌體核糖核酸鎂鹽含量少,容易被乙醇脫色。G+菌等電點比G-菌低,在同樣P