OverlapPCR（重疊PCR）的基本原理
Overlap PCR（重疊PCR）重疊PCR的應用是非常廣泛的，他的原理其實很簡單：比如說有兩個基因或者說一個啟動子和一個基因，你要將他們連接到一 起，我們首先想到的方法當然是借助于酶切的方法，但有時我們并不一定能構找到合適的酶切位點，或者說我們找到了酶切位點，但這種酶非常特殊或者又很貴，我 們可能只用一次，這樣購買酶就變成了一種浪費，難道沒有別的辦法了嗎？當然有，那就是重組PCR技術。舉個例子可能更容易說明。比如兩個基因，一個命名 為A，一個命名為B。A的序列為5- atgcatgctagctagaacgctacgctgactaccccctgatc-3B的序列為5- atgctagtagctagccccccccaggggataattttttaaaacg-3首先我們要設計引物，假設引物的序列為：A1:5-ATGCATGCTAGCTAGAACGCT-3A2:5-ggggggctagctactagcatgatcagggg......閱讀全文
Realtime－PCR
實驗概要The ?exponential amplification via reverse transcription polymerase chain ?reaction provides for a highly sensitive technique in which a very low
重疊延伸PCR
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 重疊延伸PCR技術（gene splicing by overlap extension PCR，簡稱SOE PCR）由于采用具有
揭示COVID19影像學特征與SARS和MERS存在顯著重疊
冠狀病毒可引起多種動物的多系統感染。迄今為止，已有三種冠狀病毒可在人類中引起嚴重的呼吸道感染：嚴重急性呼吸道綜合征（SARS）冠狀病毒（SARS-CoV）、中東呼吸綜合征（MERS）冠狀病毒（MERS-CoV）和新型冠狀病毒SARS-CoV-2（之前稱為2019-nCoV）。SARS-CoV-2
研究揭示人類創造力遺傳基礎新進展
創造力是人類特有的一項重要特質，一般被描述為“發現新問題，產生新想法、視角，以及發明創造，從而傳達或解決問題的能力”，是人類文明進步的重要推動因素。雖然創造力被認為與智力等特質有關，但研究表明，與智力相比，創造力在人類進化史中的形成時期更晚，大約在60000到30000年前的舊石器時代晚期，可能
北京生科院提出環形RNA全長轉錄本重建和定量新方法
國際學術期刊Genome Medicine 在線發表了中國科學院北京生命科學研究院計算基因組學實驗室趙方慶團隊題為Reconstruction of full-length circular RNAs enables isoform-level quantification 的最新研究成果。該研
昆明植物所醉魚草屬植物的自然雜交與漸滲研究取得進展
醉魚草屬植物在全世界約有104種，是觀賞價值極高的一個屬。我國有23個種，5個變種，主要分布于東喜馬拉雅-橫斷山區域，該區域被認為是醉魚草屬植物的分布和多樣性中心。自然雜交一直被認為是東喜馬拉雅-橫斷山區物種多樣性形成的一個重要途徑，該屬同樣如此。盡管分類學家基于形態，推測了自然雜交在醉魚草屬植
ICPMS各部分功能和原理——質量分析器
質量分析器是不同種類的質譜儀的主要區別之處，四極桿分析器是一種成熟的質量分析儀器，利用了四極桿對不同核質比的元素離子的篩選作用，達到順序分析離子質量的目的。 四極桿的主要原理如下圖所示： 四極桿的兩對電極，分別加上了正負直流電壓和相位差為180度的射頻信號，離子在四極桿中旋轉、振蕩，當合理設置直流電
PNAS：果蠅體內一關鍵蛋白，或可延長20％的壽命
圖片來源：網絡 在最新一期的《PNAS》期刊上，來自于布朗大學的科學家們最新發現，果蠅體內Sirt4蛋白的表達受到抑制時，會導致其壽命縮短。相反，一旦上調Sirt4蛋白，則可以延長果蠅的壽命。 更重要的是，缺乏Sirt4蛋白會增加果蠅對饑餓的敏感性、降低其生育和活動能力，以及無法調用身體內存儲的
Combined－Flow－Cytometric－Measurement－of－Two－CellSurface－Antigens
INTRODUCTIONFlow cytometry is frequently used to assess nucleic acid content?in individual cells. Based on DNA content alone, however, cells?in the qu
重疊延伸PCR
重疊延伸PCR技術主要用于獲得其它依靠限制性內切酶消化方法難以得到的產物。可用于：（1）基因的定點突變；（2）融合基因的構建；（3）長片段基因的合成；（4）基因敲除以及目的基因的擴增實驗方法原理重疊延伸PCR技術（gene splicing by overlap extension PCR，簡稱SO
DAPI染DNA的原理及使用方法
DAPI ?即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，分子式為C16 H15 N5 ·2C3 H6 O3 ，分子量457.48。DAPI 是一種能夠與DNA強力結合的熒光染料。它結合到雙鏈DNA小溝的AT堿基對處，一個DAPI分子
Application－Note:－Qdot?－Nanocrystal－Conjugates－in－Flow－Cytometry
實驗概要Researchers today ?are trying to maximize the information that they get out of flow ?cytometry experiments by looking at more parameters in a sing
心理所研究揭示不同認知控制過程的時程和頻譜特性
認知控制(執行控制)是指個體在目標導向的行為(goal-oriented behavior)中，目的性地對其他認知過程(如知覺、注意、工作記憶等)進行自上而下調控的過程。具體而言，認知控制涉及到對信息加工流程的計劃、控制和調節。一方面認知控制涉及到對多種基礎認知過程的調控，另一方面它又指向與
DAPI染DNA的原理及使用方法
DAPI 即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，分子式為C16 H15 N5 ·2C3 H6 O3 ，分子量457.48。DAPI 是一種能夠與DNA強力結合的熒光染料。它結合到雙鏈DNA小溝的AT堿基對處，一個DAPI分子可
載體多克隆位點（MCS）改造
加、減、換一個載體 的MCS的位點 （給一個表達 載體加、減、換小表達標簽，如His6， His10，strep II等，和MCS改造是一樣的），其實技術 不是問題，問題在于位點的選擇 ，因為載體設計 時應該設計者也考慮過mcs的問題，應該給使用者越多的選擇越好，但為什么有的載體只給有
PCR實驗指導與常見問題分析7
11. All products in my multiplex reaction are weak. How can I improve the yield?Decrease annealing time in small steps (2o C)Decrease extension temper
三代基因測序組裝算法和軟件研發獲突破
DNA基因測序技術從上世紀70年代起，歷經三代技術后，目前已發展成為一項相對成熟的生物產業。測序技術的應用也擴展到了生物、醫學、制藥、健康、農林、園藝、花卉、環保、法醫等許多領域，并成為一項與我們衣食住行密切相關的高技術產業。據最新統計，2012年全球基因測序市場的產值已超過百億，按最近幾年增長
Methods－for－the－Measurement－of－a－Bacterial－Enzyme－Activity－in－Cell－Lysates3
Different enzyme assays for ACTase study in H. pyloriACTase properties were studied?in situ?in cell-free extracts to obtain information on enzyme func
概述老年人肺氣腫的并發癥
1.下呼吸道感染 肺氣腫患者由于年老體弱，營養不良，機體免疫力下降，氣道狹窄和分泌物潴留而易發生下呼吸道感染。患者多因此由穩定期轉入加重期。值得注意的是，老年患者合并感染時往往沒有發熱，白細胞總數也不高。咳嗽、氣促加劇，痰量增加，痰變膿性是下呼吸道感染最早和最重要的征象。 2.自發性氣胸 多因
心理所揭示不同認知控制過程的特異性
認知控制是指產生、維持和調整一系列目標導向行為的加工過程。它的一個核心問題是各種沖突的解決到底是領域特異性的還是領域一般性的。沖突監測模型（the conflict-monitoring model）認為，認知控制是領域一般化的，存在一個由一個沖突監測模塊和一個沖突執行模塊組成的沖突控制環路，這
高通量篩選：化合物庫在藥物研發過程中的應用MedChe...2
二、化合物庫使用方法及使用注意事項? 化合物庫篩選過程主要包括化合物庫選擇、實驗方案設計、實驗進行、實驗結果檢測、實驗方案優化等步驟。進行化合物庫篩選，要根據自己的實驗目的選擇合適的化合物庫，設計適合的實驗方案，并設計好化合物作用結果的檢測指標及檢測方法。化合物庫篩選的實驗方案設計至少需要包括以下
PCR技術盤點
PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程，由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成：模板DNA的變性，模板DNA與引物的退火(復性)，引物的延伸。重復循環變性--退火--延伸三過程，就可獲得更多的“半保留復制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成一個循環需2～4分鐘，2～3小時就能
數據非依賴采集DIA－解決方案（二）
二、特點與優勢?數據非依賴采集（DIA）：? 采集所有離子及碎片譜圖，不丟失任何信息，重現性好；? 數據易于追溯，即使目前的水平無法發現某些蛋白/ 化合物，未來可以回溯；? 無需優化方法，對于易降解樣品可以即刻采集，獲得數據后再深入挖掘；? 基于碎片離子（即母子離子對）定量，選擇性好，與 SRM/M
PCR技術盤點
PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程，由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成：模板DNA的變性，模板DNA與引物的退火(復性)，引物的延伸。重復循環變性--退火--延伸三過程，就可獲得更多的“半保留復制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成一個循環需2～4分鐘， 2～3小
不得不看的載體構建的心得與體會
這兩年在美帝凈做克隆實驗了，以前讀PHD時候還覺得自己分子克隆挺牛X的，來這邊之后做了各種各樣的構建才知道以前是坐井觀天，剛才粗粗統計了一下，在美帝一年零八個月，我構建的質粒的超過四百個，其中有很簡單從PCR構建到拿WB結果的一共不到一周，也有巨難的花了四個月時間換了幾次strategy才弄好激動得
不得不看的載體構建的心得與體會
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IJMS：科學家揭示人類阿爾茲海默病和心臟病之間的遺傳學關聯
目前有研究證據支持異常脂質代謝與阿爾茲海默病風險之間的關聯，同樣地，觀察性研究結果表明，阿爾茲海默病與冠狀動脈疾病之間也存在共病關聯，然而，目前研究人員并不清楚阿爾茲海默病發生背后的復雜生物學機制，其與脂質和冠狀動脈疾病特征之間的關聯，他們也不是很清楚，相互矛盾的證據進一步強調了對這一研究領域正
ProcartaPlex－免疫檢測常見問題及解決方案
eBioscience公司Luminex液相蛋白芯片檢測試劑——ProcartaPlex可以為您的生物學研究提供各種多因子檢測方案，包括細胞因子、生長因子、趨化因子和其他蛋白。在選擇試劑盒及操作時會遇到很多問題，現將常見問題及答復匯總如下，供您參考： 如果不小心將整個試劑盒保存在-20°C. 這個試
趙方慶團隊提出環形RNA轉錄本重建和定量新方法
在以往的研究中，環形RNA的識別方法主要是利用環形RNA特有結構——反向剪接序列特征進行識別。然而，由于二代測序的讀長普遍較短，研究者們雖然可以獲得大量的反向剪接位點，卻無法高通量獲得環形RNA的完整內部結構信息，也無法對不同可變剪接產物進行精確定量。 2018年1月19日，Genome Me
IJMS：科學家揭示人類阿爾茲海默病和心臟病之間的遺傳學關聯
目前有研究證據支持異常脂質代謝與阿爾茲海默病風險之間的關聯，同樣地，觀察性研究結果表明，阿爾茲海默病與冠狀動脈疾病之間也存在共病關聯，然而，目前研究人員并不清楚阿爾茲海默病發生背后的復雜生物學機制，其與脂質和冠狀動脈疾病特征之間的關聯，他們也不是很清楚，相互矛盾的證據進一步強調了對這一研究領域正