研究GST標簽蛋白，原來可以這么簡單
為什么要研究GST標簽蛋白？谷胱甘肽巰基轉移酶（GST）是在真核細胞中天然存在的大小26KDa的蛋白。GSTs可以催化外源性物質結合到谷胱甘肽（GSH）上，因而對諸多環境毒素包括化療藥物、殘留的藥物、除草劑及致癌物起到解毒作用。許多研究人員將GST的DNA序列整合到表達載體上來生產帶有GST標簽的融合蛋白。GST能夠快速折疊穩定并且具有良好的溶解性，因而可以促進融合蛋白的表達與溶解。此外，還可以利用GST與其底物GSH之間的結合來進行蛋白純化和檢測。目前，GST標簽蛋白被應用于多種研究技術，例如pull-down、親和層析及ELISA。為了方便廣大研究人員，Nicoya Lifesciences也推出了用于固定GST標簽蛋白的GST功能芯片，令您的表面等離子共振分析更加快速簡便。 什么是SPR技術？ 表面等離子共振技術（SPR）可以用于分析多種類型的分子間相互作用分析，包括蛋白與蛋白、蛋白與小分子、蛋白與核酸、蛋白與適配子、......閱讀全文
GST標簽蛋白純化介質使用介紹
GST標簽蛋白純化介質 Affinity Resin for GST-tag Protein一、GST標簽蛋白純化介質簡介：? ? ?GST標簽蛋白純化介質專為GST(谷胱甘肽硫轉移酶)標簽融合蛋白的純化而設計,采用該產品可快速從細胞發酵液中提取含有GST標簽的目標蛋白，上海惠誠生物提供GST標簽蛋
研究GST標簽蛋白，原來可以這么簡單
為什么要研究GST標簽蛋白？谷胱甘肽巰基轉移酶（GST）是在真核細胞中天然存在的大小26KDa的蛋白。GSTs可以催化外源性物質結合到谷胱甘肽（GSH）上，因而對諸多環境毒素包括化療藥物、殘留的藥物、除草劑及致癌物起到解毒作用。許多研究人員將GST的DNA序列整合到表達載體上來生產帶有GST標簽的融
GST標簽抗體GST標簽與IFIP等多種應用
近年來在原核表達體系中，谷胱甘肽S轉移酶GST表達純化系統的應用更為普遍，它的來源是日本血吸蟲的25kDa大小的GST蛋白。GST標簽系統具有蛋白表達產率高、表達產物純化方便，以及利于GST抗體制備等特點和優勢。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可從細菌裂解液中提取，在不變性的條件下通過親和層析得到。G
親和層析－－GST標簽（谷胱甘肽）
低耐壓：谷胱甘肽瓊脂糖微球大包裝填料谷胱甘肽瓊脂糖凝膠提供了一步純化方法，并允許對含有谷胱甘肽結合序列的蛋白質進行快速、溫和以及高特異性的純化。通過使用含有還原型谷胱甘肽的緩沖液洗脫，已結合的 GST融合蛋白容易從填料中被取代。?該填料用于純化谷胱甘肽 -S- 轉移酶(GST) 以及帶有 GST 標
GST蛋白純化步驟
制備細胞裂解物：1.每100ml培養物的細胞沉淀懸于4mlPBS；2.加入溶菌酶至終濃度1mg/ml，冰上放置30min；3.用針筒將10ml 0.2%Triton X-100強行注入細胞裂解物中，劇烈震動數次混勻；4.加入DNase和RNase至終濃度5μg/ml，4℃震動溫育10min；5.4℃
GST融合蛋白純化方法
Abstract:?Many people have vented out frustration over insoluble GST-fused proteins. This is a protocol for enzymatically active soluble GST-fused pro
酵母GST蛋白純化方法
GST Fusion Protein Purification from Yeast5 ml overnight culture of your favorite yeast in your favorite medium.Inoculate 50 ml and grow 30o C shaking
GST－融合蛋白沉降實驗
實驗材料 細胞裂解液其中蛋白質 35S 用標記試劑、試劑盒 裂解緩沖液SDS 聚丙烯酰胺凝膠探針GST 蛋白儀器、耗材 沸水浴翻轉祥品旋轉儀谷胱甘肽瓊脂糖球珠實驗步驟 材料緩沖液和溶液將緩沖液稀釋到適當濃度。裂解緩沖液20 mmol/LTris-Cl(pH8.0)200 mml/L NaCl1 mm
GST－融合蛋白沉降實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞裂解液 其中蛋白質 35S 用標記 試劑、試劑盒 裂解緩沖液 SDS 聚丙烯酰胺凝膠
GST－融合蛋白沉降實驗
GST 沉降實驗與 far western(方案 2) 相比有—個優點：探針蛋白是在更自然的環境下與可能的搭檔蛋白孵育，因而增強了相互作用的有效性。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。實驗材料細胞裂解液其中蛋白質 35S 用標記試劑、試劑盒裂解
GST融合蛋白的準備
Preparation of Glutathione-S-Transferase (GST) Fusion ProteinsMargret B. Einarson and Elena N. Pugacheva?Foxx Chase Cancer Center, Philadelphia, PA 19
GST融合蛋白（GST－fusion－protein－purification）的表達與純化
原理GST 純化系統是利用GST （glutathione-S-transferase ）融合蛋白與固定的谷胱甘肽（GSH）通過硫鍵共價親和，通過GSH交換洗脫的原理來進行純化 。1ml樹脂大約可結合5-8 mg融合蛋白，并可反復使用數次。試劑u IPTG（異丙基硫代-β-D-半乳糖苷） 2
GST融合蛋白純化的原理
GST純化系統其實就是凝膠親和層析系統。該純化柱中，凝膠手臂上通過硫鍵結合一個谷胱甘肽。然后利用谷胱甘肽與谷胱甘肽巰基轉移酶（即GST）之間酶和底物的特異性作用力，使得帶GST標簽的融合蛋白能夠與凝膠上的手臂谷胱甘肽結合，從而將帶標簽的蛋白與其他蛋白分離開。
常見蛋白標簽6xHis標簽
6xHis標簽，也稱為多組氨酸標簽（polyhistidine ），His6標簽或hexa組氨酸標簽，這是一種在轉染的細胞中目標蛋白的C端或N端上由至少6個組氨酸殘基鏈接上所組成的氨基酸序列，它的序列如下所示：相對小的分子量，低的免疫原性，親水性和在去污劑和其他添加劑存在的情況下的易變性，因此在天然
GST融合蛋白的親和純化實驗
實驗方法原理 瓊脂糖顆粒和誘餌蛋白復合體在洗滌時并不會損失而且所有反應都含有等量的誘餌蛋白。為了證明在洗滌期間沒有任何材料損失，應使用 1/10 的 GST 融合體加樣做平行 SDS-PAGE 凝膠電泳并染色以便更確切地比較 GST 融合體蛋白帶。另外，融合蛋白的降解可能導致誘餌蛋白的量減少
GST融合蛋白的親和純化實驗
GST 共結合純化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 瓊脂糖顆粒和誘餌蛋白復合體在洗滌時并不會損失而且所有反應都含有等量的誘餌蛋白。為了證明在洗滌期間沒有任何材料損失，應使用
GST融合蛋白的親和純化實驗
實驗方法原理瓊脂糖顆粒和誘餌蛋白復合體在洗滌時并不會損失而且所有反應都含有等量的誘餌蛋白。為了證明在洗滌期間沒有任何材料損失，應使用 1/10 的 GST 融合體加樣做平行 SDS-PAGE 凝膠電泳并染色以便更確切地比較 GST 融合體蛋白帶。另外，融合蛋白的降解可能導致誘餌蛋白的量減少，尤其是當
GST融合蛋白純化——篩選表達株
Purification of GST fusion proteins in?E.coli?GSTSugden lab,McArdle Laboratory for?Cancer Research?,University of Wisconsin-Madison Medical SchoolScre
蛋白共沉淀檢測實驗_備擇－用GST融合蛋白
實驗材料全細胞抽提物試劑、試劑盒谷胱甘肽-瓊脂糖或者谷胱甘肽-瓊脂糖漿抗體免疫共沉淀緩沖液氯化鈉蛋白 A G-瓊脂糖漿2 × 樣品緩沖液（用于 SDS-PAGE 膠）儀器、耗材20 ml 注射器和 18-G 針頭漢密爾頓注射器實驗步驟1. 按照蛋白 A/G-瓊脂糖漿所述的方式準備兩份樣本（見「用蛋白
有適合免疫沉淀IP的GST抗體嗎
有適合免疫沉淀IP的GST抗體嗎？近年來在原核表達體系中，谷胱甘肽S轉移酶GST表達純化系統的應用更為普遍，它的來源是日本血吸蟲的25kDa大小的GST蛋白。GST標簽系統具有蛋白表達產率高、表達產物純化方便，以及利于GST抗體制備等特點和優勢。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可從細菌裂解液中提取，在
用－GST－融合蛋白檢測蛋白質蛋白質相互作用實驗
GST 融合蛋白作為在細菌中表達的重組蛋白，從它們被介紹以來，已用于成千上萬個研究項目中（Smith and johnson 1988)。它們常常被用于制備抗體，這些抗體可用于研究蛋白質-蛋白質相互作用以及分析生化反應。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W
用－GST－融合蛋白檢測蛋白質蛋白質相互作用實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 結合到谷胱甘肽-球脂糖的 GST 融合蛋白 試劑、試劑盒 堿性緩沖液 封閉緩沖液 相
用－GST－融合蛋白檢測蛋白質蛋白質相互作用實驗
實驗材料 結合到谷胱甘肽-球脂糖的 GST 融合蛋白試劑、試劑盒 堿性緩沖液 封閉緩沖液 相互作用緩沖液PK 緩沖液還原型谷胱甘肽于 Tris-Cl中洗滌緩沖液 1 洗滌緩沖液 2蛋白酶蛋白激酶 A[y-32P]ATP儀器、耗材 與待篩選蛋白結合的膜或濾膜Sephadex G-50 轉柱實驗步驟 材
GST瓊脂糖凝膠蛋白產量低原因分析
???本產品為基于三甘醇（16 原子間隔臂）的谷胱甘肽瓊脂糖，可快速、溫和, 特異性地純化包含谷胱甘肽結合序列的非變性蛋白質，如谷胱甘肽-S-轉移酶（GST）、谷胱甘肽過氧化物酶等，尤其適用于在大腸桿菌、昆蟲細胞和哺育動物細胞中表達的GST 融合表達蛋白。該填料具有很好的物理和化學穩定性，使用
如何選擇合適的GST抗體？
GST標簽系統具有蛋白表達產率高、表達產物純化方便，以及利于GST抗體制備等特點和優勢。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可從細菌裂解液中提取，在不變性的條件下通過親和層析得到，也可以直接被位點特異性蛋白酶裂解去除。正是由于以上的優點，商品化的GST融合蛋白表達體系以及GST標簽抗體系統至今仍被廣泛應用
GST抗體IFIP等多種應用
GST標簽系統具有蛋白表達產率高、表達產物純化方便，以及利于GST抗體制備等特點和優勢。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可從細菌裂解液中提取，在不變性的條件下通過親和層析得到，也可以直接被位點特異性蛋白酶裂解去除。正是由于以上的優點，商品化的GST融合蛋白表達體系以及GST標簽抗體系統至今仍被廣泛應用
用于蛋白質表達的標簽實驗（一）
一、設計具有標簽的蛋白質時需要考慮的因素親和力和可溶性的選擇在大腸埃布氏菌中生產外源蛋白時面臨兩個挑戰: 一? 是所用蛋白質表達系統的表達水平很低; 二是所表達的蛋白質被錯誤折疊進不溶性的聚集體—包涵體中。弱啟動子、低轉錄起始或稀有密碼子的存在引起的表達問題都可以通過在裝配過表達質粒時將矯正
形形色色的蛋白標簽（二）
體內標記 對于in vivo標記，人們通常用化學標記的營養物喂養細胞，讓它們摻入新合成的蛋白、核酸或代謝物。之后收獲細胞，分離出這些分子，從整體上查看細胞行為，或利用抗體或其他捕獲試劑來研究某個蛋白。 蛋白質組研究人員常用的方法是SILAC，即細胞培養中氨基酸的穩定同位素標記。兩
形形色色的蛋白標簽（一）
一提到蛋白研究，首先跳入腦海的當然是抗體。的確，很多蛋白實驗都離不開抗體。然而，即使抗體公司時不時推出新產品，但許多蛋白還是沒有相應的抗體，我們只能望電腦興嘆。而且，也有很多抗體無能為力的情況，比如觀察蛋白在細胞內的運輸。所幸，各種各樣的蛋白標簽讓我們能夠從容應對這些挑戰。 遺傳標簽
如何選擇合適的GST抗體？
GST標簽系統具有蛋白表達產率高、表達產物純化方便，以及利于GST抗體制備等特點和優勢。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可從細菌裂解液中提取，在不變性的條件下通過親和層析得到，也可以直接被位點特異性蛋白酶裂解去除。正是由于以上的優點，商品化的GST融合蛋白表達體系以及GST標簽抗體系統至今仍被廣泛