尿沉淀定量分析實驗
是根據流式細胞儀工作原理專為尿液沉渣分析而設計,這類儀器價格較低,分析效率較高,尿液標本可不用離心,主要用于尿液細胞成分(紅細胞、白細胞,和上皮細胞)的分析,這類儀器不僅可測定細胞數量,還可測量細胞容積和對某些細胞分類,如測定尿液紅細胞容積(MCV)及容積分布密度(RDVV),有助于鑒別紅細胞來源,(上尿路或下尿路出血)尿液白細胞實驗方法原理一、尿液沉渣分析儀法(一)、流式細胞儀法:是根據流式細胞儀工作原理專為尿液沉渣分析而設計,這類儀器價格較低,分析效率較高,尿液標本可不用離心,主要用于尿液細胞成分(紅細胞、白細胞,和上皮細胞)的分析,這類儀器不僅可測定細胞數量,還可測量細胞容積和對某些細胞分類,如測定尿液紅細胞容積(MCV)及容積分布密度(RDVV),有助于鑒別紅細胞來源,(上尿路或下尿路出血)尿液白細胞中,淋巴細胞嗜酸性粒細胞和中性粒細胞的分類計數,對泌尿系統感染和腎移植排斥的診斷和鑒別診斷有重要意義。但這類儀器還不能測量......閱讀全文
尿沉淀定量分析實驗
實驗方法原理一、尿液沉渣分析儀法(一)、流式細胞儀法:是根據流式細胞儀工作原理專為尿液沉渣分析而設計,這類儀器價格較低,分析效率較高,尿液標本可不用離心,主要用于尿液細胞成分(紅細胞、白細胞,和上皮細胞)的分析,這類儀器不僅可測定細胞數量,還可測量細胞容積和對某些細胞分類,如測定尿液紅細胞容積(MC
尿沉淀定量分析實驗
是根據流式細胞儀工作原理專為尿液沉渣分析而設計,這類儀器價格較低,分析效率較高,尿液標本可不用離心,主要用于尿液細胞成分(紅細胞、白細胞,和上皮細胞)的分析,這類儀器不僅可測定細胞數量,還可測量細胞容積和對某些細胞分類,如測定尿液紅細胞容積(MCV)及容積分布密度(RDVV),有助于鑒別紅細胞來源,
尿沉淀檢查
一、尿沉渣檢查的內容 正常人尿中可有很少量紅細胞,白細胞,上皮細胞,結晶,粘液絲,罕見有透明管型。 但如果有過多的血細胞和異常上皮細胞和管型,以及細菌,滴蟲,腫瘤細胞和病毒包涵體,那就提示有腎臟及泌尿系統的疾病或損傷。 其中,管型可根據橫徑大小分為(1)狹窄型(為1-2個紅細胞直徑大小),(2
沉淀反應實驗:環狀沉淀反應
可溶性抗原與相應的抗體混合,在電解質存在的條件下,兩者比例適合,即可有沉淀物出現,叫沉淀反應(Precipitation)。由于沉淀反應抗原多系膠體溶液。沉淀物主要是由抗體蛋白所組成。為了求得抗原與抗體的適宜比例,保證有足夠的抗體,而且抗原分子小,具有較大的反應面積,因此操作上通常是稀釋抗原,不稀釋
尿沉淀中紅細胞的決定水平
參考值 0~偶見/高倍視野(HPF)? ?? 決定水平 臨床意義及措施? ?? 3/HPF 0~偶見/HPF為正常,若超過3個/HPF應反復做尿液分析并應注意紅細胞的形態,必要時作12小時Addis計數。 ??? 5/HPF 出現5/HPF的情況時,如紅細胞形態正常提示應作尿培養和藥敏試驗(25%的
沉淀DNA的實驗——乙醇沉淀法
沉淀DNA的實驗可應用于分離DNA。實驗方法原理DNA 溶液是DNA以水合狀態穩定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪DNA周圍的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般實驗中,是加2倍體積的無水乙醇與DNA相混 合,其乙醇的最終含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇來替代懈水乙醇(因為無水乙醇的價格遠遠比9
免疫沉淀實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 裂解緩沖液稀釋緩沖液SDSTrisTSA儀器、耗材 轉子離心機實驗步驟 1. ?表面標記或生物合成標記的細胞在裂解緩沖液中于4℃放置1 h 后,再于4℃3 000 g 離心10 min 除去細胞核,然后將所得上清在10000 g 離心1 min。?2. ?一次性對上清進
環狀沉淀反應實驗
最簡單、古老的一種沉淀試驗。即在小口徑試管內加入已知抗血清,沿管壁加入待檢抗原于血清表面,若抗體與相應抗原發生反應,兩層液面交界處出現白色環狀沉淀,是為陽性,主要用于抗原的定性實驗。實驗方法原理當抗原與相應抗體形成一個接觸面時,如二者比例適當,接觸面上可形成一個乳白色的環狀物即為陽性沉淀反應。實驗材
沉淀DNA的實驗
乙醇沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 DNA 溶液是DNA以水合狀態穩定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪DNA周圍的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般實驗中,是加2倍體
沉淀DNA的實驗
實驗材料?DNA試劑、試劑盒?乙酸鈉乙醇儀器、耗材?EP管低溫離心機移液器-70度冰箱實驗步驟 酶切前確定待切樣品的濃度, 并選擇合適的限制性內切酶和配套Buffer。2. 在離心管中加入如下成分:10×Buffer ? 1μl待切樣品 xμl酶 0.5-1μl————————————
環狀沉淀反應實驗
實驗方法原理 當抗原與相應抗體形成一個接觸面時,如二者比例適當,接觸面上可形成一個乳白色的環狀物即為陽性沉淀反應。實驗材料 免疫血清試劑、試劑盒 抗原生理鹽水儀器、耗材 小沉淀管毛細吸管橡皮頭實驗步驟 1. ?取小沉淀管2只,以毛細吸管吸取抗人血清約0.2毫升,加入第一管,加時注意不能有氣泡。2.
免疫沉淀實驗
基本方案 制備抗體Sepharose 偶聯物 抗Ig血清免疫沉淀放射性標記抗原 免疫沉淀放射性標記抗原 ? ? ? ? ? ? 實驗材料
環狀沉淀反應實驗
環狀沉淀反應廣泛應用于法醫學的血跡鑒別和食物摻假的測定。通常這些可疑材料作為抗原,用標準抗血清加以鑒定。它具有用材少的優點,例如衣服等物品上的血跡用生理鹽水洗下就可作為抗原進行檢查。實驗方法原理可溶性抗原例如細菌的提取物,血清、病毒溶液等與相應抗體反應,在有電解質的情況下,會產生細微的沉淀稱為沉淀反
蛋白共沉淀檢測實驗
實驗方法原理 實驗材料 全細胞抽提物試劑、試劑盒 抗體免疫共沉淀緩沖液氯化鈉蛋白 A G-瓊脂糖漿2 × 樣品緩沖液(用于 SDS-PAGE 膠)儀器、耗材 20 ml 注射器和 18-G 針頭漢密爾頓注射器實驗步驟 1. 在冰上將以下組分加入離心管,雙份:0.5~1 mg 全細胞抽提物1 μg 抗
蛋白共沉淀檢測實驗
用蛋白A/G-瓊脂糖 備擇 用GST融合蛋白 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理實驗材料 全細胞抽提物 試劑、試劑盒 抗體 免疫共沉淀緩沖液
三氯乙酸沉淀實驗
試劑、試劑盒 丙酮分子量標準TCA+DOC加與不加2-巰基乙醇的樣品緩沖液儀器、耗材 聚丙烯微量離心管實驗步驟 材料與設備丙酮(Aldrich Chemical Co.Inc.)注:保存于室溫。不能放入冰箱。聚丙烯微量離心管 (1.5-ml)注:1. 用前將離心管洗干凈。2. 分析極少量蛋白質(
包涵體沉淀溶解實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 緩沖液 A N-十二烷基肌氨酸鈉(SKL) 考馬斯亮藍(CBB) 染色液 脫色液 快速蛋白質斑點印跡試驗用試劑
三氯乙酸沉淀實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 1. 三氯乙酸為酸性化合物,是陰離子型沉淀劑,在低于蛋白質等電點的PH值時,酸根與帶正點荷的蛋白質形成不溶性鹽而沉淀;2. 作為蛋白質變性劑使蛋白質構象發生改變,暴露出較多的疏水性基團, 使之聚集沉淀。3. 隨著蛋白質分子量的增
包涵體沉淀溶解實驗
試劑、試劑盒緩沖液 AN-十二烷基肌氨酸鈉(SKL)考馬斯亮藍(CBB) 染色液脫色液快速蛋白質斑點印跡試驗用試劑儀器、耗材SDS-PAGE 電泳裝置聚丙烯酰胺小膠(10%)分子量標準參照物實驗步驟材料與設備SDS-PAGE 電泳裝置聚丙烯酰胺小膠(10%)分子量標準參照物試劑緩沖液 AN-十二烷基
包涵體沉淀溶解實驗
試劑、試劑盒 緩沖液 AN-十二烷基肌氨酸鈉(SKL)考馬斯亮藍(CBB) 染色液脫色液 快速蛋白質斑點印跡試驗用試劑儀器、耗材 SDS-PAGE 電泳裝置聚丙烯酰胺小膠(10%)分子量標準參照物實驗步驟 材料與設備SDS-PAGE 電泳裝置聚丙烯酰胺小膠(10%)分子量標準參照物試劑緩沖液 AN-
三氯乙酸沉淀實驗
三氯乙酸沉淀實驗主要用于(1)蛋白質的沉淀純化;(2)試樣化合物的提取。實驗方法原理1. 三氯乙酸為酸性化合物,是陰離子型沉淀劑,在低于蛋白質等電點的PH值時,酸根與帶正點荷的蛋白質形成不溶性鹽而沉淀;2. 作為蛋白質變性劑使蛋白質構象發生改變,暴露出較多的疏水性基團, 使之聚集沉淀。3. 隨著蛋白
沉淀反應實驗:火箭電泳(rocket-electrophoresis)實驗
火箭電泳實際是一種定量免疫電泳。其原理為:在電場作用下,抗原在含定量抗體的瓊脂介質中泳動,二者比例在合適時在較短時間內形成狀似火箭或錐形的沉淀線,而此沉淀線的高度常與抗原量成正比關系,因此本法可以測定樣品中抗原的含量。1、材料(1)診斷血清(抗體):抗人IgG或IgA免疫血清(2)待檢血清(抗原):
沉淀反應實驗:瓊脂擴散(agar-diffusion)實驗
瓊脂擴散實驗瓊脂擴散是抗原抗體在凝膠中所呈現的一種沉淀反應。抗體在含有電解質的瓊脂凝膠中相遇時,便出現可見的白色沉淀線。這種沉淀線是一組抗原抗體的特異性復合物。如果凝膠中有多種不同抗原抗體存在時,便依各自擴散速度的差異,在適當部位形成獨立的沉淀線,因此廣泛地用于抗原成分的分析。瓊脂擴散實驗可根據抗原
免疫沉淀的實驗步驟
(1)收獲細胞,加入適量細胞IP裂解緩沖液(含蛋白酶抑制劑),冰上或者4℃裂解30min, 12,000g離心30 min后取上清;(2) 取少量裂解液以備Western blot分析,剩余裂解液將1μg相應的抗體和10-50 μl protein A/G-beads加入到細胞裂解液,4°C緩慢搖晃
免疫共沉淀實驗方法
免疫共沉淀(co-immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。 其原理是:當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋白質-蛋白質間的相互作用被保留了下來。如果用蛋白質x
免疫共沉淀的實驗過程
(1)轉染后24-48 h 可收獲細胞,加入適量細胞裂解緩沖液(含蛋白酶抑制劑),冰上裂解30min, 細胞裂解液于4°C, 最大轉速離心30 min后取上清;(2)取少量裂解液以備Western blot分析,剩余裂解液加1μg相應的抗體加入到細胞裂解液,4°C緩慢搖晃孵育過夜;(3)取10μl
沉淀反應實驗:免疫電泳(immune-electrophoresis)實驗
免疫電泳實驗免疫電泳實驗是先將抗原物質在瓊脂凝膠中做電泳分離,然后于凝膠槽中加入抗體血清。使抗原抗體進行雙向擴散,在比例適宜部位形成特異的抗原抗體沉淀弧線。每條沉淀弧線代表一組抗原抗體復合物,故可用抗原成分分析;且可以根據其遷移率與抗體所出現的特異反應進行鑒定。1、材料(1)待檢標本(抗原):正常人
免疫沉淀實驗——免疫沉淀放射性標記抗原
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒SDS儀器、耗材離心機實驗步驟1. ?按基本方案進行,但以下說明的操作步驟已經修改:(2b)按所需選用步驟4b所提供的其中之一備擇物(①,②,③)預澄清放射性抗原溶液。(4b)加入1 μl 抗原特異性抗血清,或3 μg 抗原特異性單抗,或抗質特異性雜交瘤培養上 清(克隆化細
免疫共沉淀的實驗過程介紹
(1)轉染后24-48 h 可收獲細胞,加入適量細胞裂解緩沖液(含蛋白酶抑制劑),冰上裂解30min, 細胞裂解液于4°C, 最大轉速離心30 min后取上清; (2)取少量裂解液以備Western blot分析,剩余裂解液加1μg相應的抗體加入到細胞裂解液,4°C緩慢搖晃孵育過夜; (3)
酸化丙酮/甲醇沉淀法實驗
試劑、試劑盒 鹽酸丙酮甲醇實驗步驟 材料鹽酸(高純;如 J,T-Baker 的 Ultrex 級)丙酮(高純;如 Aldrich 的金標級)甲醇(高純;如 Aldrich 或 Burdick&Jackson 的最同市售級)操作程序本操作程序是根據 Current Protocolsin Molecu