染色體CBG標本制備實驗
實驗方法原理 異染色質在整個分裂間期及分裂期都是濃縮的,因而其大小較為恒定。它們通常位于著絲粒附近,或在染色體臂上呈現“團塊”,這些染色質主要由C顯帶技術呈現,故稱為C帶。CBG即C帶、Ba(OH)2、Giemsa的簡寫。C帶的根本特征是選擇性地從染色體臂抽取DNA,但在C帶區有很強抗性,仍保留大部分DNA,Giemsa染色后可見效果良好的C帶。抽取DNA的過程由三個連續操作形成。首先,酸處理可使DNA脫嘌呤,但未使DNA骨架斷裂;其次熱堿處理可使DNA變性,促進繼發的DNA溶解;最后,熱鹽溶液使DNA骨架斷開并使碎片溶解進入溶液中。因此,最終以Giemsa染料顯示出DNA的不同分布。在優良的C帶標本中,常染色質只呈現中期染色體的一般外貌,結構異染色質區著色很深。C帶在檢查1、9、16特別是Y染色體的異質區時尤為重要。實驗材料 染色體標本試劑、試劑盒 HClBa(OH)2SSCGiemsa染色液儀器、耗材 恒溫水浴箱染色缸顯微鏡......閱讀全文
染色體CBG標本制備實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 異染色質在整個分裂間期及分裂期都是濃縮的,因而其大小較為恒定。它們通常位于著絲粒附近,或在染色體臂上呈現“團塊”,這些染色質主要由C
染色體CBG標本制備實驗
實驗方法原理 異染色質在整個分裂間期及分裂期都是濃縮的,因而其大小較為恒定。它們通常位于著絲粒附近,或在染色體臂上呈現“團塊”,這些染色質主要由C顯帶技術呈現,故稱為C帶。CBG即C帶、Ba(OH)2、Giemsa的簡寫。C帶的根本特征是選擇性地從染色體臂抽取DNA,但在C帶區有很強抗性,仍保留大部
染色體CBG標本制備
一、原理????異染色質在整個分裂間期及分裂期都是濃縮的,因而其大小較為恒定。它們通常位于著絲粒附近,或在染色體臂上呈現“團塊”,這些染色質主要由C顯帶技術呈現,故稱為C帶。CBG即C帶、Ba(OH)2、Giemsa的簡寫。C帶的根本特征是選擇性地從染色體臂抽取DNA,但在C帶區有很強抗性,仍保留大
染色體CBG標本制備實驗——基本方案
實驗方法原理異染色質在整個分裂間期及分裂期都是濃縮的,因而其大小較為恒定。它們通常位于著絲粒附近,或在染色體臂上呈現“團塊”,這些染色質主要由C顯帶技術呈現,故稱為C帶。CBG即C帶、Ba(OH)2、Giemsa的簡寫。C帶的根本特征是選擇性地從染色體臂抽取DNA,但在C帶區有很強抗性,仍保留大部分
染色體GTG標本制備實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 非顯帶染色體除可根據形態分辨部分染色體,其他多數染色體難以確認,而顯帶技術則可使染色體縱向長度上出現不同帶紋,以辨認全部染色體。GT
染色體GTG標本制備實驗
實驗方法原理 非顯帶染色體除可根據形態分辨部分染色體,其他多數染色體難以確認,而顯帶技術則可使染色體縱向長度上出現不同帶紋,以辨認全部染色體。GTG即G帶,Trypsin(胰酶),Giemsa的簡寫。Giemsa染料是噻嗪——曙紅染料,染色體的著色有賴于在原位形成噻嗪--曙紅(2∶1)的沉淀物。著色
染色體GTG標本制備實驗
非顯帶染色體除可根據形態分辨部分染色體,其他多數染色體難以確認,而顯帶技術則可使染色體縱向長度上出現不同帶紋,以辨認全部染色體。GTG即G 帶,Trypsin(胰酶),Giemsa的簡寫。Giemsa染料是噻嗪——曙紅染料,染色體的著色有賴于在原位形成噻嗪--曙紅(2∶1)的沉淀物。實驗方法原理非顯
染色體提前凝集標本制備實驗
基本實驗實驗方法原理七十年代初,由于發現M期細胞內有某種促進染色體凝集因子,它無種屬特異性,所以在細胞融合和染色體技術的基礎上,建立了制備染色體提前凝集標本的方法。即讓M期細胞與間期(I期)細胞融合,從而誘導I期細胞染色質提前濃縮成染色體。形成的這種染色體稱提前凝集的染色體(PrematurelyC
染色體提前凝集標本制備實驗
實驗方法原理七十年代初,由于發現M期細胞內有某種促進染色體凝集因子,它無種屬特異性,所以在細胞融合和染色體技術的基礎上,建立了制備染色體提前凝集標本的方法。即讓M期細胞與間期(I期)細胞融合,從而誘導I期細胞染色質提前濃縮成染色體。形成的這種染色體稱提前凝集的染色體(PrematurelyConde
染色體GTG標本制備
一、原理????非顯帶染色體除可根據形態分辨部分染色體,其他多數染色體難以確認,而顯帶技術則可使染色體縱向長度上出現不同帶紋,以辨認全部染色體。GTG即G帶,Trypsin(胰酶),Giemsa的簡寫。Giemsa染料是噻嗪--曙紅染料,染色體的著色有賴于在原位形成噻嗪--曙紅(2∶1)的沉淀物。著
體外培養細胞的染色體標本制備實驗
實驗材料細胞實驗步驟1. 體外培養的細胞,在倒置鏡下觀察到有較多的分裂細胞(傳代后24h,圓形發亮的細胞)時,加入秋水仙素溶液,終濃度為0.3μg/ml培養液;?2. 繼續培養3h;?3. 胰酶消化收集細胞至離心管;?4. 離心1000轉/min,離心10min,去上清;?5. Hanks液洗,離心
體外培養細胞的染色體標本制備實驗
實驗材料?細胞實驗步驟?1. 體外培養的細胞,在倒置鏡下觀察到有較多的分裂細胞(傳代后24h,圓形發亮的細胞)時,加入秋水仙素溶液,終濃度為0.3μg/ml培養液;?2. 繼續培養3h;?3. 胰酶消化收集細胞至離心管;?4. 離心1000轉/min,離心10min,去上清;?5. Hanks液洗,
絨毛標本分裂中期染色體涂片制備實驗
實驗材料絨毛樣本試劑、試劑盒HBSS胰酶 EDTA HBSS 溶液膠原蛋白酶溶液完全培養基秋水仙胺枸櫞酸鈉甲醛 冰乙酸儀器、耗材無菌 Watchmaker 精細鑷冷試管搖床試管混合器Sorvall GLC-2B 離心設備HL-4轉子和6個 15ml 離心管塑料培養皿倒置顯微鏡或解剖顯微鏡熱氣增濕器空
絨毛標本分裂中期染色體涂片制備實驗
實驗材料 絨毛樣本試劑、試劑盒 HBSS胰酶 EDTA HBSS 溶液膠原蛋白酶溶液完全培養基秋水仙胺 枸櫞酸鈉甲醛 冰乙酸儀器、耗材 無菌 Watchmaker 精細鑷冷試管搖床試管混合器Sorvall GLC-2B 離心設備HL-4轉子和6個 15ml 離心管塑料培養皿倒置顯微鏡或解剖顯微鏡熱氣
染色體提前凝集標本制備
實驗方法原理 七十年代初,由于發現M期細胞內有某種促進染色體凝集因子,它無種屬特異性,所以在細胞融合和染色體技術的基礎上,建立了制備染色體提前凝集標本的方法。即讓M期細胞與間期(I期)細胞融合,從而誘導I期細胞染色質提前濃縮成染色體。形成的這種染色體稱提前凝集的染色體(PrematurelyCond
胸腹水染色體標本制備
某些腫瘤細胞可脫落入胸腹水中,并繼續生長、增值。因此,由胸腹水細胞可制備較好的染色體標本。胸腹水細胞染色體分析對惡性腫瘤具有輔助診斷的價值。如分裂相多,異倍性,有結構畸變,常支持陽性診斷。二、用品和試劑同外周血染色體制備。三、操作步驟1. 新鮮胸腹水20-40毫升,以1000rpm離心10分鐘。棄去
動物染色體標本的制備
秋水仙素阻斷細胞分裂法 實驗材料 蟾蜍 試劑、試劑盒 秋水仙素 生理鹽水 甲醇 冰醋
水稻根尖染色體標本制備
實驗概要? ? ? ? 水稻根尖染色體標本制備實驗步驟1.取材: 選取水稻種子,充分浸種后,將它們擺在鋪有濾紙的培養皿內,在約28℃條件下發芽培養,當胚根長至1~1.5cm時,剪下備用。2.預處理?? ? 壓片法:采用0.1%秋水仙素處理2h左右? ? 去壁低滲法可采用以下四種方法處理 ? ? ??
胸腹水染色體標本制備
一、原理????某些腫瘤細胞可脫落入胸腹水中,并繼續生長、增值。因此,由胸腹水細胞可制備較好的染色體標本。胸腹水細胞染色體分析對惡性腫瘤具有輔助診斷的價值。如分裂相多,異倍性,有結構畸變,常支持陽性診斷。二、用品和試劑????同外周血染色體制備。三、操作步驟????l.新鮮胸腹水20—40毫升,以1
動物染色體標本的制備
一、實驗目的1. 了解染色體標本制備的基本原理2. 掌握滴片法制備染色體標本的一般步驟二、實驗原理每一物種的細胞一般都具有一定數目、形狀和大小的染色體,在秋水仙素的作用下可使分裂細胞阻斷在中期,此時染色體形態最典型,然后通過低滲、固定、染色等步驟,便可在顯微鏡下呈現出其形態。三、實驗用品器具:顯微鏡
水稻根尖染色體標本制備
1.取材: 選取水稻種子,充分浸種后,將它們擺在鋪有濾紙的培養皿內,在約28℃條件下發芽培養,當胚根長至1~1.5cm時,剪下備用。2.預處理?壓片法:采用0.1%秋水仙素處理2h左右去壁低滲法可采用以下四種方法處理處理方法 0.002mol/L8-羥基喹啉 α-溴萘飽和溶液 低溫(-4℃) 卡諾氏
動物染色體標本的制備
秋水仙素阻斷細胞分裂法 實驗材料 蟾蜍 試劑、試劑盒 秋水仙素 生理鹽水 甲醇 冰醋
正常細胞常規核型的標本制備_腫瘤細胞染色體標本制備
實驗方法原理利用腫瘤細胞無限繁殖的特點,掌握其體外生長動態,取處于對數生長期的細胞便可獲得豐富的分裂相。腫瘤細胞染色體異常包括兩個方面:1. ?結構異常 ?即在腫瘤細胞常出現的染色體畸變,包括雙著絲點染色體、環狀染色體、斷裂的染色體、染色體裂隙及微小體等。2. ?數目異常 ?由于腫瘤細胞分裂失去應有
去壁低滲法制備植物染色體標本實驗
實驗材料黑麥(Secalecereale)、大麥(Hordeumvulgare)種子或洋蔥(Alliumcepa)鱗莖試劑、試劑盒對二氯苯飽和溶液甲醇冰醋酸70%酒精纖維素酶果膠酶Giemsa原液磷酸緩沖液(pH6.8~7.2)KCl儀器、耗材恒溫培養箱顯微鏡載玻片酒精燈實驗步驟1.取材:先將種子浸
去壁低滲法制備植物染色體標本實驗
?一、實驗目的: ? 1、掌屋植物染色體標本的去壁低滲方法 ? 2、了解中期染色體的形態結構 ? 二、實驗原理: ? 植物細胞有很堅實的細胞壁,染色體很難像動物染色體那樣平整地貼在載玻片上,可通過纖維素酶和果膠酶處理去掉細胞壁;用低滲溶液處理可以提高染色體的分散程度。陳瑞陽等(1979,19
洋蔥根尖有絲分裂染色體標本制備及觀察實驗
實驗方法原理 有絲分裂是細胞均等增殖的過程,是體細胞分裂的主要方式.在有絲分裂過程中,細胞內每條染色體都能復制一份,然后分配到子細胞中,因此兩個子細胞與母細胞所含的染色體在數目、形態和性質上均是相同的,在各種生長旺盛的植物組織中均存在著有絲分裂。分生組織→固定→解離→染色→壓片→觀察(間期、早期、中
羊水細胞染色體標本的制備
一、原理人的羊水細胞能長成單層并可連續進行傳代培養,但它們的一些特征與一般成纖維細胞不同。在羊水中存在著各種不同類型的胎兒細胞,依據其外形和生長特征可區分為以下三類:上皮細胞(E)、成纖維細胞(F)和羊水細胞(AF)。E細胞在胰酶消化的連續培養中不再生長,所以在培養過程中的生長期最短。AF細胞在再培
羊水細胞染色體標本的制備
一、原理????人的羊水細胞能長成單層并可連續進行傳代培養,但它們的一些特征與一般成纖維細胞不同。在羊水中存在著各種不同類型的胎兒細胞,依據其外形和生長特征可區分為以下三類:上皮細胞(E)、成纖維細胞(F)和羊水細胞(AF)。E細胞在胰酶消化的連續培養中不再生長,所以在培養過程中的生長期最短。AF細
正常細胞常規核型標本制備_人淋巴細胞染色體標本制備
實驗方法原理在淋巴母細胞分裂高峰時加入秋水仙素,破壞細胞紡錘體的形成,使細胞停止在分裂中期。然后收集細胞,低滲處理,使細胞脹大,染色體伸展。接著進行固定并除去中期分裂相中殘存的蛋白質,使染色體清晰且分散良好。再結合離心技術去掉紅細胞碎片,然后采用空氣干燥法制片獲得中期染色體標本。實驗材料HeLa細胞
骨髓細胞染色體標本的制備
一、原理骨髓染色體標本制備通常用于白血病患者,特別是慢性或急性粒細胞性白血病,因為骨髓反映粒系統細胞增生情況,這些病人不宜用外周血。即使是淋巴細胞性白血病,也不主張用外周血,因為加PHA刺激外周血培養,只能獲得正常淋巴細胞分裂相,并不能反映那些病理淋巴細胞的染色體改變。骨髓細胞屬不斷增殖的細胞,培養