結締組織染色實驗
實驗方法原理 膠原纖維是由膠原蛋白聚合與纏繞嫘旋排列而成的,具有雙折光性,經過特殊染色后,能夠在偏光顯微鏡下觀察到四種不同型的膠原纖維。由于膠原纖維分子中含有堿性氨基酸,能夠與酸性染料進行結合反應。常用麗春紅-苦味酸(2,4,6-三硝基苯酚)染色法。實驗材料 石蠟組織切片試劑、試劑盒 麗春紅 S 水溶液苦味酸飽和液無水乙醇二甲苯中性樹膠儀器、耗材 過濾紙實驗步驟 麗春紅-苦味酸染色液:0.5% 麗春紅 S(Ponceau S)水溶液 12 ml,苦味酸飽和液 88 ml。1. 石蠟組織切片,常規脫蠟至水。2. 麗春紅-苦味酸染色液染色 5 min。3. 直接用無水乙醇分化與脫水。4. 用過濾紙吸干。5. 二甲苯透明和中性樹膠封固。注意事項 1. 麗春紅-苦味酸混合液可室溫存放,使用滴染方法。2. 無水乙醇脫水時,應將切片斜放,減少多余水分。其他 結果:膠原纖維呈紅色,背景呈黃色。......閱讀全文
結締組織染色實驗
實驗方法原理 膠原纖維是由膠原蛋白聚合與纏繞嫘旋排列而成的,具有雙折光性,經過特殊染色后,能夠在偏光顯微鏡下觀察到四種不同型的膠原纖維。由于膠原纖維分子中含有堿性氨基酸,能夠與酸性染料進行結合反應。常用麗春紅-苦味酸(2,4,6-三硝基苯酚)染色法。實驗材料 石蠟組織切片試劑、試劑盒 麗春紅 S 水
結締組織染色實驗——結締組織三色染色法
實驗方法原理結締組織中含有大量的細胞間質纖維和基質組分,主要成分為蛋白和多糖,常用 Masson 染色方法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒酸性復紅麗春紅橘黃 G乙酸冰醋酸磷鉬酸亮綠實驗步驟Masson 染色液:酸性復紅 1 g,麗春紅 1 g,橘黃 G 2 g,0.5% 乙酸 100 ml。亮綠染
結締組織染色實驗——膠原纖維染色
結締組織廣泛分布于入體和動物體內,而疏松結締組織在組織損傷后的修復過程中,纖維細胞可轉化為活躍的成纖維細胞。成纖維細胞能形成膠原纖維、彈力纖維和網狀纖維以及基質等成分。致密結締組織的間質內含有大量纖維,排列緊密,細胞和基質比較少,主要含有彈性纖維,又稱為彈性致密結締組織。網狀結締組織由網狀細胞和網狀
結締組織染色實驗——網狀纖維與膠原纖維染色
實驗方法原理網狀纖維是網狀結締組織中的一種纖維,由交錯排列的纖細的纖維組成。由于網狀纖維由含有糖蛋白的膠原蛋白組成,這種組織蛋白質易與氨性銀結合,再選用酸性染料染色液,能夠顯示網狀纖維與膠原纖維的二種組織結構成分。常用 Gomori 銀與麗春紅-苦味酸復合染色法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒二甲
結締組織染色實驗——彈力纖維與膠原纖維染色
實驗方法原理彈力纖維由隨機交聯盤繞的一些肽鏈組成,含有豐富的二硫鍵糖蛋白成分,所以可稱為彈性蛋白。易與染色液中堿基結合,為了能夠更好地顯示彈力纖維和膠原纖維成分,選用維多利亞藍、麗春紅和苦味酸組合雙重染色方法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒維多利亞藍糊精間苯二酚蒸餾水乙醇三氯化鐵水溶液濃鹽酸苯酚二
結締組織染色實驗——膠原蛋白、彈力蛋白和黏蛋白染色
實驗方法原理黏蛋白是多糖與蛋白質結合的復合物,組織內含有硫酸根等成分,帶有酸性物質,可稱為酸性黏液(黏蛋白)。彈力纖維中的彈性蛋白由一種凝膠狀的肽鏈組成,通過非極性吸附顯色。膠原纖維是由纖維母細胞產生的一種膠原蛋白鉸鏈而成,易與酸性染料結合。經過組合染色后,可分別顯示膠原蛋白、彈力蛋白和黏蛋白成分。
結締組織的染色方法
結締組織的染色方法?一般所說的結締組織是指纖維性結締組織而言,其結構特點是細胞間質內基質外含有較多的纖維成分,主要是膠原纖維、彈性纖維和網狀纖維,我們僅簡述這三種纖維的常見染色方法。?(1)Mallory三色染色法:常用于判定多種組織、器官的病變程度及修復情況,區分腫瘤組織中的纖維成分與平滑肌。?染
特染:-結締組織染色
一、Mallory三色染色法1. 試劑配制(1)重鉻酸鉀液 重鉻酸鉀2.5g,醋酸5ml,蒸餾水95ml(2)苯胺藍桔黃G液 苯胺藍0.5g,桔黃G2g,磷鎢酸1g,蒸餾水100ml(3)酸性復紅液 酸性復紅0.5g,蒸餾水100ml2.染色步驟(1)中性甲醛液固定組織,石蠟切片,常規脫蠟至水。(2
脂肪及結締組織的染色方法
實驗概要掌握脂肪及結締組織的染色方法。脂肪的染色方法:脂肪染色常用脂溶性色素,如蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ、油紅O等。這類染料既能溶于有機溶劑如乙醇、丙酮,又能溶于脂肪。由于該類染料在脂質中溶解度較大,染色時染料便從染液中轉移到被染的脂質中去,使脂質呈染液的顏色。主要用于顯示組織臟器的脂肪變性和類脂質的異常沉著
脂肪及結締組織的染色方法
實驗步驟脂肪的蘇丹Ⅲ(Ⅳ)染色方法:1) 冰凍切片用70%乙醇漂洗,不超過30s。2) 切片入蘇丹Ⅲ(Ⅳ)染液中3~15min或延長至1h。3)?新50%~70%乙醇分化,直至洗去切片上的浮色為止,蒸餾水洗。4) 用稀釋1倍的明礬蘇木精淺染核1min或稍長。5) 用濾紙將切片及周圍的水分吸干。6)
結締組織觀察實驗
1. 了解結締組織的特點和分類。2. 掌握疏松結締組織的纖維及各種細胞成分。3. 了解致密結締組織、脂肪組織、軟骨和骨的基本結構特點。實驗材料大白鼠小白鼠試劑、試劑盒臺盼藍生理鹽水溶液甘油瑞特染液儀器、耗材解剖器一套注射器及針頭滴管載玻片蓋玻片顯微鏡實驗步驟一、材料和用具大白鼠或小白鼠。皮下結締組織
結締組織觀察實驗(一)
實驗材料 大白鼠小白鼠試劑、試劑盒 臺盼藍生理鹽水溶液甘油瑞特染液儀器、耗材 解剖器一套注射器及針頭滴管載玻片蓋玻片顯微鏡實驗步驟 一、材料和用具大白鼠或小白鼠。皮下結締組織經活體染色及彈性纖維染色和H-E染色的平鋪片、氣管切片(H-E染色)、小腸切片(H-E染色)、小白鼠腸系膜平鋪片(蘇丹Ⅲ染色)
結締組織觀察實驗(二)
(二)高倍鏡觀察膠原纖維束較粗大,纖維束內由許多平行排列的膠原纖維組成,但在切片上不易區分。在纖維束之間分布有排列成單行細長的腱細胞(成纖維細胞),但在切片上只能看到染成藍紫色橢圓形或桿狀的胞核。兩個鄰近細胞的胞核常常很靠近。胞質不易顯示。脂肪組織(一)小腸或氣管切片(H-E染色)的觀察1.低倍鏡觀
結締組織類細胞培養實驗
成纖維細胞培養實驗 巨噬細胞培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 包括人在內的各種成纖維細胞都很容易培養,也是其它組織培養時的副產物,極易獲得。人的成纖維細胞不僅
糖類染色實驗——糖原染色
實驗方法原理糖原由多糖衍化而來,是單純的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或無水乙醇直接固定才能較好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反應(PAS)染色法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒高碘酸蒸餾水堿性復紅鹽酸焦亞硫酸鈉(偏重亞硫酸鈉)雙重蒸餾水
疏松結締組織形態學觀察實驗
實驗步驟 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 1. 染色:乙醛復紅肉眼觀察:此種標本顏色深淺不一,可見許多染色較深的細絲。2. 低倍鏡觀察:纖維交叉成網,細胞散在于纖維之間。選擇著色淺的部位,轉高倍鏡觀察。3. 高
疏松結締組織形態學觀察實驗
實驗步驟1. 染色:乙醛復紅肉眼觀察:此種標本顏色深淺不一,可見許多染色較深的細絲。2. 低倍鏡觀察:纖維交叉成網,細胞散在于纖維之間。選擇著色淺的部位,轉高倍鏡觀察。3. 高倍鏡觀察:注意分辨兩種纖維和兩種細胞。(1) 膠原纖維:數量多,染成粉紅色。纖維粗大,有分支,在自然松弛狀態下呈波浪狀。(2
姐妹染色單體分化染色實驗
實驗方法原理細胞被培養在含有 5-溴脫氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培養基中,當細胞在DNA 合成時,BUdR 能作為核苷酸的前體取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被摻入到新合成的DNA中。在第一個細胞周期時,由于半保留復制的機制,中期染色體的每條染色單體D
姐妹染色單體分化染色實驗
實驗方法原理 細胞被培養在含有 5-溴脫氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培養基中,當細胞在DNA 合成時,BUdR 能作為核苷酸的前體取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被摻入到新合成的DNA中。在第一個細胞周期時,由于半保留復制的機制,中期染色體的每條染色單體
姐妹染色單體分化染色實驗
實驗概要本文介紹了姐妹染色單體分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)的實驗原理、操作步驟及注意事項等。實驗原理姐妹染色單體分化染色法(Sister ?chromatid ?differentiation,SCD)是20世紀70年代中期發展起來的染色體處
糖類染色實驗——黏液物質染色
實驗方法原理在人體和動物體中能夠分泌黏液物質,依其物質中含有的酸基不同,所以分為中性黏液、酸性黏液和混合性黏液,也可被稱為中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖,常用 Mowry 阿爾辛藍高碘酸 Shiff 反應(ABPAS)染色方法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒阿爾辛藍 8 GS冰醋酸蒸餾水麝香
核酸染色實驗
實驗方法原理 在一般情況下,通過鹽酸水解后使 DNA 殘基分解堿基,然后從碳鍵處打斷糖苷鍵而游離出醛基,再與無色復紅液(Schiff)進行反應,形成紫紅色的復合物(DNA)。常用 Feuhgen-Rossenbeck 染色法(孚爾根染色法)。實驗材料 石蠟組織切片試劑、試劑盒 Schiff 試劑染色
Hoechst染色實驗
Hoechst染色時無需用DAB來顯色,它直接結合細胞的DNA ,經過紫外光激發后發出藍色熒光。試劑、試劑盒Hoechst染料二甲基亞砜染料二苯亞胺甲基水楊酸儀器、耗材熒光顯微鏡水浴鍋烘箱培養箱實驗步驟1. ?用水按1:500稀釋1 mg/ml 的Hoechst 染液至終濃度2 μg/ml。將稀釋染
Hoechst染色實驗
試劑、試劑盒 Hoechst染料二甲基亞砜染料二苯亞胺甲基水楊酸儀器、耗材 熒光顯微鏡水浴鍋烘箱培養箱實驗步驟 1. ?用水按1:500稀釋1 mg/ml 的Hoechst 染液至終濃度2 μg/ml。將稀釋染液加于切片上或將玻片浸于染液中,置室溫2 min。2. ?室溫下,在水中洗2 min,晾干
鈣質染色實驗
實驗方法原理 鈣質即鈣化物質,在各種組織中都可以形成鈣質,這種鈣鹽沉積物也可被稱為鈣鹽沉著,形態多樣化,有的呈顆粒狀和片塊狀等。其主要成分為磷酸鈣和碳酸鈣。常用 Dahl-McGec-Russell 茜素紅 S 法染色。實驗材料 石蠟組織切片試劑、試劑盒 二甲苯無水乙醇中性樹膠蒸餾水茜素紅乙酸淡綠氫
鈣質染色實驗
鈣質沉積于骨組織或病理變化的組織中,多見于組織壞死、動脈粥樣硬化和腫瘤等鈣化的組織。在茜素的作用下,可與鈣形成有色的螯合物(鈣質)成分。實驗方法原理鈣質即鈣化物質,在各種組織中都可以形成鈣質,這種鈣鹽沉積物也可被稱為鈣鹽沉著,形態多樣化,有的呈顆粒狀和片塊狀等。其主要成分為磷酸鈣和碳酸鈣。常用 Da
莢膜染色實驗
實驗方法原理 莢膜是包圍在細菌細胞外的一層粘液狀或膠質狀物質,其成分為多糖、糖蛋白或多肽。由于莢膜與染料的親和力弱不易著色;而且可溶于水,易在用水沖洗時被除去。所以通常用襯托染色法染色,使菌體和背景著色,而莢膜不著色合在菌體周圍形成一透明圈。由于莢膜含水量高。制片時通常不用熱固定,以免變形影響觀察。
Hoechst染色實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 Hoechst染料 二甲基亞砜染料 二苯亞胺 甲基
鞭毛染色實驗
實驗方法原理 鞭毛染色的基本原理,是在染色前先用媒染劑處理含使它沉積在鞭毛上,使鞭毛直徑加粗,然后再進行染色。實驗材料 蘇云金芽孢桿菌假單胞菌金黃色葡萄球菌試劑、試劑盒 硝酸銀鞭毛染色液0.01% 美藍水溶液儀器、耗材 載玻片蓋玻片凹載玻片無菌水凡士林顯微鏡實驗步驟 1. 菌種的準備 要求用活躍生長
糖類染色實驗
實驗方法原理 糖原由多糖衍化而來,是單純的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或無水乙醇直接固定才能較好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反應(PAS)染色法。實驗材料 石蠟組織切片試劑、試劑盒 高碘酸蒸餾水堿性復紅鹽酸 焦亞硫酸鈉(偏重亞硫酸鈉)雙