蛋白激酶C概述(二)
二、PKC的轉位與激活 1.PKC的轉位 PKC廣泛分布于多種組織、器官和細胞,靜止細胞中PKC主要存在于胞漿中,當細胞受到刺激后,PKC以Ca2+依賴的形式從胞漿中移位到細胞膜上,此過程稱之為轉位(translocation)。一般將PKC的轉位作為PKC激活的標志。 2.PKC的激活 PKC的活性依賴于鈣離子和磷脂的存在,但只有在磷脂代謝中間產物二酰基甘油(DAG)存在下,生理濃度的鈣離子才起作用,這是由于DAG能增加PKC對底物親和力的緣故。磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸(PIP2)在磷脂酶-C作用下水解生成DAG和IP3。IP3促進細胞內鈣離子的釋放,在激活PKC過程中與DAG起協同作用。乙酸豆塞外佛波酯(12-o-tertradecanoylphordol-13-acetate,TPA;或phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)是一種促腫瘤劑,由于基結構與DAG相似(圖8-......閱讀全文
蛋白激酶C概述(二)
? 二、PKC的轉位與激活 1.PKC的轉位 PKC廣泛分布于多種組織、器官和細胞,靜止細胞中PKC主要存在于胞漿中,當細胞受到刺激后,PKC以Ca2+依賴的形式從胞漿中移位到細胞膜上,此過程稱之為轉位(translocation)。一般將PKC的轉位作為PKC激活的標志。 2.PKC的激活 P
蛋白激酶C概述(一)
? 蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)是一類Ca2+、磷脂依賴性的蛋白激酶,在跨膜信號傳遞過程中起著重要作用。PKC通過催化多種蛋白質上Ser/Thr磷酸化,調節多種細胞的代謝、生長、增殖和分化。? 表 8-3 哺乳動物組織內的PKC亞類亞類氨基酸殘基分子量(kDa)激活劑表達組
蛋白激酶C的結構介紹
PKC的所有亞類都由一條單肽鏈組成,分子量大約為67-83kDa,其結構可分為四個保守區C1-C4(mPKC和aPKC缺少C2區)和五個可變區V1-V5。基中C1區可能是膜結合區,并且含有富含半胱氨酸的隨機重復序列Cys-X2-Cys-X13(14)-Cys-X2-Cys-X7-Cys-X7-C
蛋白激酶C的基本介紹
蛋白激酶C(protein kinase C,PKC) 蛋白激酶C是G蛋白偶聯受體系統中的效應物, 在非活性狀態下是水溶性的,游離存在于胞質溶膠中,激活后成為膜結合的酶。蛋白激酶C的激活是脂依賴性的,需要膜脂DAG的存在,同時又是Ca2+依賴性的,需要胞質溶膠中Ca2+濃度的升高。當DAG在質
關于蛋白激酶C的作用介紹
蛋白激酶C是一種細胞質酶,在未受刺激的細胞中,PKC主要分布在細胞質中, 呈非活性構象。一旦有第二信使的存在,PKC將成為膜結合的酶,它能激活細胞質中的酶,參與生化反應的調控, 同時也能作用于細胞核中的轉錄因子, 參與基因表達的調控, 是一種多功能的酶。 對糖代謝的控制 在肝細胞中, 蛋白激
蛋白激酶C異構體分析實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 有
蛋白激酶C異構體分析實驗
實驗材料 有 PKC 活性的酶樣品 試劑、試劑盒 [γ-32P] ATP 溶液PKC 反應緩沖液TCASDS - PAGE 樣品緩沖液 儀器、耗材 30℃ 水浴P81 磷酸纖維素膜離心管 實驗步驟 1. 每個分析反應按以下比例將各反應組分加入 1.5
蛋白激酶C異構體分析實驗
實驗方法原理 實驗材料 有 PKC 活性的酶樣品試劑、試劑盒 [γ-32P] ATP 溶液PKC 反應緩沖液TCASDS - PAGE 樣品緩沖液儀器、耗材 30℃ 水浴P81 磷酸纖維素膜離心管實驗步驟 1. 每個分析反應按以下比例將各反應組分加入 1.5 ml 微量離心管中:4 μl 5 × P
大鼠蛋白激酶C(PKC)ELISA檢測法
大鼠蛋白激酶C(PKC)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)?原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗大鼠?PKC?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的?PKC與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠PKC,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Strep
大鼠蛋白激酶C(PKC)酶聯免疫分析
大鼠蛋白激酶C(PKC)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿,細胞上清及相關液體樣本中蛋白激酶C(PKC)的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠蛋白激酶C(PKC)水平。用純化的大鼠蛋白激酶C(PKC)抗體包被微孔板
人蛋白激酶C(PKC)ELISA試劑盒
人蛋白激酶C(PKC)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗人?PKC?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的?PKC與單抗結合,加入生物素化的抗人PKC,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavi
人蛋白激酶C-(PKC)酶聯免疫分析
人蛋白激酶C?(PKC)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中蛋白激酶C(PKC)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人蛋白激酶C?(PKC)水平。用純化的人蛋白激酶C?(PKC)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往
蛋白激酶C(PKC)的結構特點和作用
蛋白激酶C(PKC)是一個絲氨酸和蘇氨酸特異性蛋白激酶家族,可被鈣和第二信使二酰甘油激活。pkc家族成員磷酸化多種蛋白質靶點,已知參與多種細胞信號傳導途徑。PKC家族成員也作為一類腫瘤啟動子佛波酯的主要受體。pkc家族的每一個成員都有一個特定的表達譜,并且被認為在細胞中起著獨特的作用。該基因編碼的蛋
蛋白激酶C基因的結構特點和主要作用
蛋白激酶C(PKC)是一個絲氨酸和蘇氨酸特異性蛋白激酶家族,可被鈣和第二信使甘油二酯激活pkc家族成員磷酸化多種蛋白質靶點,參與多種細胞信號傳導途徑。PKC家族成員也是一類腫瘤促進劑佛波酯的主要受體pkc家族的每個成員都有一個特定的表達譜,并被認為在細胞中發揮著獨特的作用。該基因編碼的蛋白是pkc家
關于蛋白激酶C的轉位與激活的介紹
轉位 PKC廣泛分布于多種組織、器官和細胞,靜止細胞中PKC主要存在于胞漿中,當細胞受到刺激后,PKC以Ca2+依賴的形式從胞漿中移位到細胞膜上,此過程稱之為轉位(translocation)。一般將PKC的轉位作為PKC激活的標志。 [2] 激活 PKC的活性依賴于鈣離子和磷脂的存在,但
人磷酸化蛋白激酶C(phosPKC)ELISA試劑盒
人磷酸化蛋白激酶C(phos-PKC)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗人?phos-PKC?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的?phos-PKC與單抗結合,加入生物素化的抗人phos-PKC,形成免疫復合物連接
大鼠磷酸化蛋白激酶C(PPKC)酶聯免疫分析
本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿,細胞上清及相關液體樣本中磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)水平。用純化的大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被
大鼠蛋白激酶C(PKC)酶聯免疫分析試劑盒使用說明
本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:???????????????????????????????????????????????????????? ?48T25pmol/L-800pmol/L?使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中蛋白激酶C(PKC)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體
蛋白激酶的分布
蛋白激酶在細胞內的分布遍及核、線粒體、微粒體和胞液。一般分為3大類。①底物專一的蛋白激酶:如磷酸化酶激酶,丙酮酸脫氫酶激酶等。②依賴于環核苷酸的蛋白激酶:如環腺苷酸(cAMP)蛋白激酶,環鳥苷酸(cGMP)蛋白激酶。③其他蛋白激酶:如組蛋白激酶等。cAMP蛋白激酶以活化型和非活化型兩種形式存在于生物
蛋白激酶的分類
已發現的蛋白激酶約有400多種,分子內都存在一個同源的由約270氨基酸殘基構成的催化結構區。在細胞信號傳導、細胞周期調控等系統中,蛋白激酶形成了縱橫交錯的網絡。這類酶催化從ATP轉移出磷酸并共價結合到特定蛋白質分子中某些絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸殘基的羥基上,從而改變蛋白質、酶的構象和活性。蛋白質磷酸化
蛋白激酶的研究歷史
50年代出現的蛋白激酶術語指催化酪蛋白,卵黃高磷蛋白或其他蛋白質磷酸化的酶。70年代在哺乳動物的十多種組織器官中又發現了一類很重要的蛋白激酶——環腺苷酸(cAMP)蛋白激酶,以后在昆蟲和大腸桿菌中也有報道。
酪蛋白激酶分析實驗
實驗方法原理 實驗材料?β-酪蛋白(溶于水)有酪蛋白激酶活性的酶樣品試劑、試劑盒?[γ-32P] ATP 溶液酪蛋白激酶反應緩沖液TCA SDS-PAGE 樣品緩沖液儀器、耗材?30℃ 水浴P81 磷酸纖維素膜離心管離心機實驗步驟 每個鑒定反應按以下比例將各反應組分加入 1.5 ml 微量離心管中:
蛋白激酶A的結構簡介
PKA全酶以四聚體形式存在,但PKA被靶向到特定組分時,也會在細胞中形成更高階的結構。經典的PKA全酶結構由兩個調節亞基(R亞基)和兩個催化亞基(C亞基)組成。催化亞基包含活性位點、在結合和水解ATP的蛋白激酶中發現的一系列典型殘基以及結合調節亞基的結構域。調節亞基具有結合到cAMP的結構域,該
蛋白激酶的研究歷史
?已發現的蛋白激酶約有400多種,分子內都存在一個同源的由約270氨基酸殘基構成的催化結構區。在細胞信號傳導、細胞周期調控等系統中,蛋白激酶形成了縱橫交錯的網絡。這類酶催化從ATP轉移出磷酸并共價結合到特定蛋白質分子中某些絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸殘基的羥基上,從而改變蛋白質、酶的構象和活性。蛋白質磷酸
酪蛋白激酶分析實驗
基本方案 用 β-酪蛋白 備擇方案 用多肽底物 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 β-酪蛋
關于蛋白激酶A的介紹
蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)又稱依賴于cAMP的蛋白激酶A(cyclic-AMP dependent protein kinase A),是一種結構最簡單、生化特性最清楚的蛋白激酶。 PKA全酶分子是由四個亞基組成的四聚體,其中兩個是調節亞基(regulatory s
簡述蛋白激酶的研究歷史
50年代出現的蛋白激酶術語指催化酪蛋白,卵黃高磷蛋白或其他蛋白質磷酸化的酶。70年代在哺乳動物的十多種組織器官中又發現了一類很重要的蛋白激酶——環腺苷酸(cAMP)蛋白激酶,以后在昆蟲和大腸桿菌中也有報道。
蛋白激酶A的功能背景介紹
1968年,化學家H. Fischer和Edwin G. Krebs發現了蛋白激酶A,更確切地說是腺苷3’, 5’-單磷酸(環AMP)依賴性蛋白激酶。他們因在磷酸化和去磷酸化以及它與蛋白激酶A活性的關系方面的工作而獲得了1992年的諾貝爾生理學或醫學獎。 PKA是研究得最廣泛的蛋白激酶之一,部
概述蛋白激酶的分布介紹
蛋白激酶在細胞內的分布遍及核、線粒體、微粒體和胞液。一般分為3大類。 ①底物專一的蛋白激酶:如磷酸化酶激酶,丙酮酸脫氫酶激酶等。 ②依賴于環核苷酸的蛋白激酶:如環腺苷酸(cAMP)蛋白激酶,環鳥苷酸(cGMP)蛋白激酶。 ③其他蛋白激酶:如組蛋白激酶等。 cAMP蛋白激酶以活化型和非活化
蛋白激酶的基本信息
蛋白激酶(protein kinases,簡稱PK)。催化蛋白質磷酸化過程的酶。蛋白質的磷酸化過程是神經信息在細胞內傳遞的最后環節.導致離子通道蛋白及通道門的狀態變化。在神經細胞內有許多種類。在半靜狀態下,處于小活動狀態。根據其活化條件的不同,可分為蛋白激酶A、蛋白激酶G、蛋白激酶C和鈣調蛋白的蛋白