基因擴增檢驗標本的處理保存及核酸提取方法(1)
應用聚合酶鏈反應（PCR）技術測定臨床標本中的病原體核酸成分，是一種高度敏感，且最為直接的檢測手段。由于臨床標本中含有蛋白質、脂類等物質，可干擾PCR反應，故在做PCR反應前必須進行核酸提取。經典的核酸提取方法通常是加去污劑（SDS等）裂解細胞，經蛋白酶處理、有機溶劑提取及乙醇沉淀等步驟。由于樣本的處理及保存對 DNA和RNA（尤其是RNA）的影響較大，因此在核酸測定時標本的處理及適當保存對測定結果的準確有效非常重要。臨床常見的標本有血清（漿）、全血、分泌物、棉拭子、膿液、體液、新鮮組織、石蠟切片等，這些臨床標本的處理和保存方法各有不同。臨床標本的處理血清（漿）標本一些病原體，如乙肝病毒（HBV）、丙肝病毒（HCV）、人類免疫缺陷病毒（HIV）等的PCR檢測常采用血清或血漿標本。HBV：標本通常由醫護人員采集，應注意避免溶血，如為血漿標本注意抗凝劑的選 擇，一般用EDTA-Na2或枸櫞酸納，不可使用肝素。標本為全血時，及時分離出......閱讀全文
基因擴增檢驗標本的處理保存及核酸提取方法(1)
應用聚合酶鏈反應（PCR）技術測定臨床標本中的病原體核酸成分，是一種高度敏感，且最為直接的檢測手段。由于臨床標本中含有蛋白質、脂類等物質，可干擾PCR反應，故在做PCR反應前必須進行核酸提取。經典的核酸提取方法通常是加去污劑（SDS等）裂解細胞，經蛋白酶處理、有機溶劑提取及乙醇沉淀等步驟。由于樣本的
基因擴增檢驗標本的處理保存及核酸提取方法(2)
標本的保存血清（漿）HBV：分離出的血清（漿）如不立即提取核酸，保存于-20℃待檢。HCV：盡快分離血清(漿), 如不立即提取RNA， 保存于-20℃待檢。長期保存：吸取200μl血清，加20u RNasin（RNA酶抑制劑），保存于-70℃。已發出結果報告的標本應及時轉移至冰箱保存，并由專人負責管
基因擴增檢驗標本的處理保存及核酸提取方法(3)
RN A提取方法 下面以異硫氰酸胍結合氯仿-酚提取法介紹RNA的提取。 異硫氰酸胍是一種強用力的蛋白質變性劑，能迅速溶解蛋白質，導致細胞結構破碎， 核蛋白由于其二級結構的破壞消失而迅速與核酸分離。 RNase雖可耐受多種處理，（如煮沸）而不失活，但卻會被4mol/L異硫
血細胞標本提取及檢驗
影響血常規檢驗結果的因素很多，下面對標本的采集、稀釋、儲存做一介紹。 1 ?標本的采集 為了取得準確、可靠的檢驗結果，必須取得高質量的標本。高質量的標本是高質量檢驗的第一步。保證血液標本中各項細胞的完整形態是作為血常規檢驗高質量的標本的最基本的要求。血液細胞檢驗標本的制備分為采集和抗凝2個步驟
血細胞標本提取及檢驗
劉惠，王秀娟? 中華醫學研究雜志 2006年1月 第6卷 第1期 影響血常規檢驗結果的因素很多，下面對標本的采集、稀釋、儲存做一介紹。 1? 標本的采集 為了取得準確、可靠的檢驗結果，必須取得高質量的標本。高質量的標本是高質量檢驗的第一步。保證血液標本中各項細胞的完整形態是作為血常規檢驗高質量
核酸標本采集后保存溫度
采集后24小時內可檢測到的標本，可在4℃保存；24小時內不能檢出的標本應保存在-70℃或以下(如無-70℃保存條件，應保存在-20℃冰箱中。...2.標本采集后在室溫下保存不超過4小時，并應在2~4小時內送至實驗室。
臨床基因擴增檢驗實驗室標本擴增區的污染防治
下述工作在本區內進行:DNA或cDNA擴增。此外,已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。在巢式PCR測定中,通常在第一輪擴增后必須打開反應管,因此巢式擴增有較高的污染危險性,第二次加樣必須在本區內進行。不能
臨床基因擴增檢驗實驗室工作規范（二）
(四)擴增產物分析區下述操作在本區內進行：擴增片段的測定。核酸擴增后產物的分析方法多種多樣，如膜上或微孔板上探針雜交方法(同位素標記或非同位素標記)、瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、Southern轉移、核酸測序方法等。目前國內的商品試劑盒絕大部分均采用非同位素標記的微孔板上探針雜交方法，即PC
基因擴增檢驗的實驗室規范（二）
(三)擴增區下述工作在本區內進行：DNA或cDNA擴增。此外，已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。在巢式PCR測定中，通常在第一輪擴增后必須打開反應管，因此巢式擴增有較高的污染危險性，第二次加樣必須在本區
PCR實驗室SOP文件（八）
實驗臺擺放規范1.目的：使實驗操作過程達到最優，保證檢測工作的正常進行。2.適用范圍：核酸擴增熒光檢測實驗室中用來處理樣品的實驗臺及置于其上的實驗用具，包括移液器架、標本架、吸頭盒、離心管架等物品。3.職責：本室工作人員應自覺遵守，由實驗室負責人監督執行。4.擺放規范：核酸擴增熒光檢測實驗室中用來處
臨床基因擴增檢驗實驗室質量保證
(一)標本的采集 常用于基因擴增檢測的臨床標本包括EDTA或枸櫞酸鈉抗凝全血或骨髓、血清或血漿、痰、腦脊液、尿及分泌物等。采血液等樣本時,應使用一次性密閉容器,如真空采血管。當使用非密閉采樣系統時,如尿、分泌物和骨髓的采樣,必須注意防止來自采樣者的皮屑或分泌物的污染。采樣時必須戴一次性手套。
王成彬：對新型冠狀病毒核酸檢測陽性率低的一點看法
作者：中華醫學會檢驗醫學分會主任委員? 王成彬 近期有媒體及專家反映新型冠狀病毒核酸檢測陽性率低、有的病例重復檢測多次陰性后出現陽性結果、咽拭子標本多次檢測陰性但最后在呼吸道灌洗液標本中檢測出陽性結果、CT影像篩查出現新型冠狀病毒肺炎特征但核酸檢測陰性等問題。經過與臨床分子診斷學專家、臨床檢驗
關于新型冠狀病毒核酸檢測陽性率低的一點看法
近期有媒體及專家反映新型冠狀病毒核酸檢測陽性率低、有的病例重復檢測多次陰性后出現陽性結果、咽拭子標本多次檢測陰性但最后在呼吸道灌洗液標本中檢測出陽性結果、CT影像篩查出現新型冠狀病毒肺炎特征但核酸檢測陰性等問題。經過與臨床分子診斷學專家、臨床檢驗醫學專家、臨床呼吸病醫學專家、臨床影像醫學專家交流，現
基因擴增技術的標本制備
在將Taq DNA聚合酶引入PCR反應，并使之達到自動化之后，PCR反應已變得十分的簡單了。但是PCR樣品的采集及制備卻并非同樣簡單，而且，許多PCR的失敗都歸因于標本的制備不當。用于PCR的標本必須經適當處理后才能使用，因為標本中的許多雜質能抑制Taq DNA聚合酶的活性。另外，處理標本可使待擴增
基因診斷檢驗標本的采集方法
常用基因檢測標本采集保存一、 所有用于采取基因診斷標本的試管或容器都必須是無菌的；二、 要求采取分泌物或咽拭子的標本需在試管內加入1ml的無菌生理鹽水；三、 要求用抗凝血的不可用肝素抗凝。四、 具體標本的采樣方法和注意事項：① 血清（DNA）: 采2～3ml靜脈血在一次性、無菌、密閉試管里,12小時
尿標本的收集保存與處理
一、尿液常規檢查標本種類：⑴．門診、急診患者適用隨機尿，即留取任何時間的尿液。本法方便病人，但結果易受飲食、運動、藥物量等多種因素影響，可致使低濃度或病理臨界濃度的物質和有形成分漏檢，也可能出現飲食性糖尿或藥物如維生素C等的干擾。⑵．住院患者可留取晨尿，即清晨起床后的第一次尿標本，為較濃縮和酸化的標
臨床基因擴增檢驗實驗室標本擴增產物分析區的污染防治
下述操作在本區內進行:擴增片段的測定。 核酸擴增后產物的分析方法多種多樣,如膜上或微孔板上探針雜交方法(同位素標記或非同位素標記)、瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、Southern轉移、核酸測序方法等。目前國內的商品試劑盒絕大部分均采用非同位素標記的微孔板上探針雜交方法,即PCR-ELIS
基因擴增檢驗的實驗室規范（一）
為使基因擴增檢驗技術有效地應用于臨床，更好地為疾病的預防、診斷和治療服務，保證檢驗質量，特制定本規范。一、臨床基因擴增檢驗實驗室的規范化設置及其管理臨床基因擴增檢驗實驗室的規范化設置詳見《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》(衛醫發[2002]10號文)附件《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標準》。為
臨床基因擴增檢驗實驗室樣本的處理辦法
(一)標本的采集 常用于基因擴增檢測的臨床標本包括EDTA或枸櫞酸鈉抗凝全血或骨髓、血清或血漿、痰、腦脊液、尿及分泌物等。采血液等樣本時,應使用一次性密閉容器,如真空采血管。當使用非密閉采樣系統時,如尿、分泌物和骨髓的采樣,必須注意防止來自采樣者的皮屑或分泌物的污染。采樣時必須戴一次性手套。
新型冠狀病毒肺炎病毒核酸檢測專家共識
今日，國際病毒分類委員會（International Committee on Taxonomy of Viruses, ICTV）宣布，新型冠狀病毒（2019-nCoV）的正式分類名為嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒2（severe acute respiratory syndrome coro
臨床基因擴增檢驗實驗室標本制備區的污染防治
下述操作在該區進行:臨床標本的保存,核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定RNA時cDNA的合成。要正確使用加樣器。由于在加樣操作中可能會發生氣溶膠所致的污染,所以應避免在本區內不必要的走動。可通過在本區內設立正壓條件避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。為避免樣本間的交叉污染,加入
新型冠狀病毒核酸和抗體檢測臨床應用專家共識
當前，復工復產逐步推進、疫情境外輸入壓力不斷增大，以及無癥狀感染者存在一定傳播風險等情況，對新型冠狀病毒檢測工作提出了新的要求。上海市衛生健康委員會貫徹《關于進一步做好疫情期間新冠病毒檢測有關工作的通知》聯防聯控機制綜發〔2020〕152號精神，發布加強本市醫療機構新型冠狀病毒檢測工作的通知，強調結
ELISA－實驗標本采集、處理和保存
一、ELISA 實驗中血清的采集、處理和保存1、 真空采血針采集 2 ml 新鮮血液，加入無菌試管中2、 采血后室溫靜置 1 小時3、 將采集血液用離心機 4℃，2500rpm 離心 10 min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉 淀。4、 取上清。 分裝凍存備用， 2-8℃ 下，可放置保存 24-
尿液標本采集及保存
一、尿液標本采集為保證尿液檢查結果的準確性，必須正確留取標本：①避免陰道分泌物、月經血、 糞便等污染；②無干擾化學物質 （如表面活性劑、消毒劑） 混入；③尿標本收集后及時 送檢及檢查 （2h 內），以免發生細菌繁殖、蛋白變性、細胞溶解等；④尿標本采集后應 避免強光照射，以免尿膽原等物質因光照分解或氧
ELISA實驗標本的采集、處理和保存
ELISA實驗標本的采集、處理和保存?能夠應用ELISA 實驗的樣本種類很多，有血清，血漿，細胞上清，細胞裂解液，尿液，關節滑液，腦脊液，肺泡灌洗液，各種組織的組織勻漿；采集和處理的方式都不相同。下面就列出了BioTNT 收集的給類樣本的采集、處理和保存方式。方法大多出自文獻和試劑盒說明
ELISA實驗標本的采集、處理和保存
ELISA實驗標本的采集、處理和保存 能夠應用ELISA 實驗的樣本種類很多，有血清，血漿，細胞上清，細胞裂解液，尿液，關節滑液，腦脊液，肺泡灌洗液，各種組織的組織勻漿；采集和處理的方式都不相同。下面就列出了BioTNT 收集的給類樣本的采集、處理和保存方式。方法大多出
各種體液標本的收集、保存與處理
一、尿液常規檢查【標本種類】 ⑴.門診、急診患者適用隨機尿，即留取任何時間的尿液。本法方便病人，但結果易受飲食、運動、藥物量等多種因素影響，可致使低濃度或病理臨界濃度的物質和有形成分漏檢，也可能出現飲食性糖尿或藥物如維生素C等的干擾。⑵.住院患者可留取晨尿，即清晨起床后的第一次尿標本，為較濃縮和
一文匯總新型冠狀病毒肺炎病毒核酸檢測專家共識
突發新型冠狀病毒（2019 novel coronavirus，2019-nCoV）肺炎疫情以來，感染病例快速上升。隨著疫情的發展和防控力度加大，全國各地乃至境外均有病例報道[1,2,3,4]，及時對急重癥及疑似患者進行診斷需要快速有效的方法，病毒核酸檢測可為診斷提供直接證據[5,6]。核酸檢測
PCR臨床基因擴增檢驗實驗室的規范化設置及其管理
臨床基因擴增檢驗實驗室的規范化設置詳見《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》(衛醫發[2002]10號文)附件《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標準》。為避免污染,必須嚴格遵循《臨床基因擴增檢驗實驗室設置標準》設置臨床基因擴增檢驗實驗室。 臨床基因擴增檢驗實驗室四個隔開的工作區域中每一區域都須有
核酸提取和核酸濃度、純度的原理及方法
【實驗原理】 DNA是遺傳信息的載體,是最重要的生物信息分子,是分子生物學研究的主要對象,因此DNA的提取也應是分子生物學實驗技術中最重要、最基本的操作。如不能有效的完成DNA提取方面的工作,那就根本談不上進行分子生物學方面的實驗。在DNA提取過程中應做到:1、根據不同研究需要,保證結構的相應