臨床基因擴增檢驗實驗室標本制備區的污染防治
下述操作在該區進行:臨床標本的保存,核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定RNA時cDNA的合成。要正確使用加樣器。由于在加樣操作中可能會發生氣溶膠所致的污染,所以應避免在本區內不必要的走動。可通過在本區內設立正壓條件避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。為避免樣本間的交叉污染,加入待測核酸后,必須蓋好含反應混合液的反應管。對具有潛在傳染危險性的材料,必須有明確的樣本處理和滅活程序。用過的加樣器吸頭必須放入專門的消毒(例如含次氯酸鈉溶液)容器內。實驗室桌椅表面每次工作后都要清潔,實驗材料(原始血標本、血清標本、提取中的標本與試劑的混合液等)如出現外濺,則必須分別處理并作出記錄。對實驗臺適當的紫外照射(254nm波長,與工作臺面近距離)適合于滅活去污染。可移動紫外線管燈可用來確保工作后對實驗臺面的充分照射。樣本處理對核酸擴增有很大影響,必須使用有效的核酸提取方法,可在開展臨床標本檢測前對提取方法進行評價。用于RNA......閱讀全文
臨床基因擴增檢驗實驗室標本制備區的污染防治
下述操作在該區進行:臨床標本的保存,核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定RNA時cDNA的合成。要正確使用加樣器。由于在加樣操作中可能會發生氣溶膠所致的污染,所以應避免在本區內不必要的走動。可通過在本區內設立正壓條件避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。為避免樣本間的交叉污染,加入
臨床基因擴增檢驗實驗室標本擴增區的污染防治
下述工作在本區內進行:DNA或cDNA擴增。此外,已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。在巢式PCR測定中,通常在第一輪擴增后必須打開反應管,因此巢式擴增有較高的污染危險性,第二次加樣必須在本區內進行。不能
臨床基因擴增檢驗實驗室標本擴增產物分析區的污染防治
下述操作在本區內進行:擴增片段的測定。 核酸擴增后產物的分析方法多種多樣,如膜上或微孔板上探針雜交方法(同位素標記或非同位素標記)、瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、Southern轉移、核酸測序方法等。目前國內的商品試劑盒絕大部分均采用非同位素標記的微孔板上探針雜交方法,即PCR-ELIS
臨床基因擴增檢驗實驗室試劑貯存和準備區的污染防治
貯存試劑和用于標本制備的材料應直接運送至試劑貯存和準備區,不能經過產物分析區。在打開含有反應混合液的離心管或試管前,應將其快速離心數秒。試劑原材料必須貯存在本區內,并在本區內制備成所需的貯存試劑。當貯存試劑溶液經檢查可用后,應將其分裝貯存備用,避免由于經常打開反應管吸液而造成污染。含反應混合液的離心
基因擴增技術的標本制備
在將Taq DNA聚合酶引入PCR反應，并使之達到自動化之后，PCR反應已變得十分的簡單了。但是PCR樣品的采集及制備卻并非同樣簡單，而且，許多PCR的失敗都歸因于標本的制備不當。用于PCR的標本必須經適當處理后才能使用，因為標本中的許多雜質能抑制Taq DNA聚合酶的活性。另外，處理標本可使待擴增
臨床基因擴增檢驗技術
PCR技術是由Cetus公司和加利福尼亞大學1985年聯合創造的，主要貢獻者為Kary B mulis和HeneryA、Erlich。該方法首先被應用于人β-珠蛋白DNA的擴增及鐮刀狀紅細胞貧血病的產前診斷。自85年首次報道PCR方法以來，PCR被廣泛應用于分子克隆、序列分析、基因突變、遺傳病、傳染
檢驗科要建PCR實驗室需要了解的套路
標準的PCR實驗區?試劑準備區、標本制備區、擴增區、產物分析區、各區配套的緩沖區及公共走廊。臨床基因擴增檢驗實驗室設計的核心問題是如何避免污染。?因此，實驗室的平面布局、空調通風系統設計、氣流控制等都是圍繞這個核心問題進行的。為避免交叉污染，進入各個工作區域必須嚴格遵循單一方向進行，即只能從試劑貯存
臨床基因擴增檢驗實驗室工作規范（三）
(七)污染 在實際工作中，常見有以下幾種污染類型：擴增片段的污染(產物污染)；天然基因組DNA的污染、試劑污染(貯存液或工作液)以及標本間交叉污染(如氣溶膠從一個陽性標本擴散到原本陰性的標本)。臨床基因擴增檢驗實驗室中污染的最主要來源是擴增產物的污染。由于一旦發生污染后，再圍繞實驗室來尋找污染源不僅
臨床基因擴增檢驗實驗室工作規范（三）
(七)污染 在實際工作中，常見有以下幾種污染類型：擴增片段的污染(產物污染)；天然基因組DNA的污染、試劑污染(貯存液或工作液)以及標本間交叉污染(如氣溶膠從一個陽性標本擴散到原本陰性的標本)。臨床基因擴增檢驗實驗室中污染的最主要來源是擴增產物的污染。由于一旦發生污染后，再圍繞實驗室來尋找污染源不僅
臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標準
根據《臨床檢驗擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》，制定本標準 一、 臨床基因擴增檢驗實驗室區域設置原則 （一） 臨床基因擴增檢驗實驗室區域設置原則 1、 試劑儲存和準備區 2、 標本制備區 3、 擴增反應混合物配制和擴增區 4、 擴增產物分析區 如使用全自動分
臨床基因擴增檢驗實驗室工作規范（一）
為使基因擴增檢驗技術有效地應用于臨床，更好地為疾病的預防、診斷和治療服務，保證檢驗質量，特制定本規范。一、臨床基因擴增檢驗實驗室的規范化設置及其管理臨床基因擴增檢驗實驗室的規范化設置詳見《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》(衛醫發[2002]10號文)附件《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標準》。為
臨床基因擴增檢驗實驗室質量保證
(一)標本的采集 常用于基因擴增檢測的臨床標本包括EDTA或枸櫞酸鈉抗凝全血或骨髓、血清或血漿、痰、腦脊液、尿及分泌物等。采血液等樣本時,應使用一次性密閉容器,如真空采血管。當使用非密閉采樣系統時,如尿、分泌物和骨髓的采樣,必須注意防止來自采樣者的皮屑或分泌物的污染。采樣時必須戴一次性手套。
臨床基因擴增檢驗實驗室工作規范（二）
(四)擴增產物分析區下述操作在本區內進行：擴增片段的測定。核酸擴增后產物的分析方法多種多樣，如膜上或微孔板上探針雜交方法(同位素標記或非同位素標記)、瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、Southern轉移、核酸測序方法等。目前國內的商品試劑盒絕大部分均采用非同位素標記的微孔板上探針雜交方法，即PC
臨床基因擴增檢驗實驗室樣本的處理辦法
(一)標本的采集 常用于基因擴增檢測的臨床標本包括EDTA或枸櫞酸鈉抗凝全血或骨髓、血清或血漿、痰、腦脊液、尿及分泌物等。采血液等樣本時,應使用一次性密閉容器,如真空采血管。當使用非密閉采樣系統時,如尿、分泌物和骨髓的采樣,必須注意防止來自采樣者的皮屑或分泌物的污染。采樣時必須戴一次性手套。
基因擴增檢驗的實驗室規范（一）
為使基因擴增檢驗技術有效地應用于臨床，更好地為疾病的預防、診斷和治療服務，保證檢驗質量，特制定本規范。一、臨床基因擴增檢驗實驗室的規范化設置及其管理臨床基因擴增檢驗實驗室的規范化設置詳見《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》(衛醫發[2002]10號文)附件《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標準》。為
PCR基因擴增中污染來源及污染防治措施介紹
1、測定分析前的污染源測定分析前實驗材料的污染主要來自非病人標本來源的核酸。2、測定分析階段的污染源通常,測定分析階段的每一步都可能發生對樣本的污染。反應混合液的任何成分及核酸的制備和反應建立階段所涉及到的實驗設備的任何部位都是可能的污染源。如受污染的試劑(例如牛血清白蛋白,明膠或礦物油)、商品酶制
臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法
第一章 總 則第一條 為規范臨床基因擴增檢驗實驗室管理，保證臨床基因擴增檢驗質量，使臨床診斷和治療更為科學、合理，特制定本辦法。第二條 臨床基因擴增檢驗技術指以臨床診斷治療為目的，以擴增檢測 DNA 或 RNA 為方法的檢測技術，如聚合酶鏈反應（ PCR ）、連接酶鏈反應（ LCR ）、轉錄依賴的放
臨床基因擴增檢驗實驗室建設整體方案（一）
PCR實驗室整體解決方案三部曲分為三個部分1、?????????臨床基因擴增檢驗實驗室建設整體服務方案2、?????????區域精準醫學中心聯防聯控建設方案3、 ??一站式快速分子診斷篩查移動實驗室建設（方艙實驗室）好久沒跟大家互動了，筆者留下了幾篇爛尾的文章，就消失無蹤了，究其原因，一來國家政策對
臨床基因擴增檢驗實驗室建設整體方案（二）
一、PCR實驗室建設整體服務方案為XXXX醫療機構提供專業的臨床基因擴增檢驗實驗室設計與建設、質控體系搭建、人才技能培訓、實驗室運營管理經驗輸出、區域化供應等服務支持。1、服務流程1）確認意向，簽訂合同：客戶需求了解，項目效益評估，裝修現場條件評估。2）建設規劃，布局設計：指導分區布局設計和平面布置
臨床基因擴增檢驗實驗室建設整體方案（三）
3、PCR實驗室可開展的項目已執業登記醫學檢驗科（分子生物學專業或者臨床細胞分子遺傳學專業）可開展的項目名稱請參考《醫療機構臨床檢驗項目目錄（2013年版醫療機構臨床檢驗項目目錄（2013年版）》。項目列舉如下：項目類型項目臨床指引肝炎艾滋系列傳染病檢測產品乙型肝炎病毒HBV-DNA乙型肝炎病人抗病
臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法
第一章 總 則第一條 為規范臨床基因擴增檢驗實驗室管理，保證臨床基因擴增檢驗質量，使臨床診斷和治療更為科學、合理，特制定本辦法。第二條 臨床基因擴增檢驗技術指以臨床診斷治療為目的，以擴增檢測DNA或RNA為方法的檢測技術，如聚合酶鏈反應（PCR）、連接酶鏈反應（LCR）、轉錄依賴的放大系統（TAS）
PCR實驗室建設你了解多少？
臨床基因擴增實驗又稱?PCR實驗，是專門用來檢驗艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測手段。它可以通過將病毒體內所含的基因進行擴增的方法，測出一些病毒含量不高的感染者體內是否含有特定的病毒。由于該檢測方法可以測出普通檢驗難以檢測出的病毒并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對樣品要求低等優點，
簡述基因擴增技術—聚合酶鏈反應的標本制備
在將Taq DNA聚合酶引入基因擴增技術—聚合酶鏈反應反應，并使之達到自動化之后，基因擴增技術—聚合酶鏈反應反應已變得十分的簡單了。但是PCR樣品的采集及制備卻并非同樣簡單，而且，許多PCR的失敗都歸因于標本的制備不當。用于PCR的標本必須經適當處理后才能使用，因為標本中的許多雜質能抑制Taq
基因擴增檢驗標本的處理保存及核酸提取方法(1)
應用聚合酶鏈反應（PCR）技術測定臨床標本中的病原體核酸成分，是一種高度敏感，且最為直接的檢測手段。由于臨床標本中含有蛋白質、脂類等物質，可干擾PCR反應，故在做PCR反應前必須進行核酸提取。經典的核酸提取方法通常是加去污劑（SDS等）裂解細胞，經蛋白酶處理、有機溶劑提取及乙醇沉淀等步驟。由于樣本的
基因擴增檢驗標本的處理保存及核酸提取方法(3)
RN A提取方法 下面以異硫氰酸胍結合氯仿-酚提取法介紹RNA的提取。 異硫氰酸胍是一種強用力的蛋白質變性劑，能迅速溶解蛋白質，導致細胞結構破碎， 核蛋白由于其二級結構的破壞消失而迅速與核酸分離。 RNase雖可耐受多種處理，（如煮沸）而不失活，但卻會被4mol/L異硫
基因擴增檢驗標本的處理保存及核酸提取方法(2)
標本的保存血清（漿）HBV：分離出的血清（漿）如不立即提取核酸，保存于-20℃待檢。HCV：盡快分離血清(漿), 如不立即提取RNA， 保存于-20℃待檢。長期保存：吸取200μl血清，加20u RNasin（RNA酶抑制劑），保存于-70℃。已發出結果報告的標本應及時轉移至冰箱保存，并由專人負責管
PCR臨床基因擴增檢驗實驗室的規范化設置及其管理
臨床基因擴增檢驗實驗室的規范化設置詳見《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》(衛醫發[2002]10號文)附件《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標準》。為避免污染,必須嚴格遵循《臨床基因擴增檢驗實驗室設置標準》設置臨床基因擴增檢驗實驗室。 臨床基因擴增檢驗實驗室四個隔開的工作區域中每一區域都須有
PCR實驗室平面布局
臨床基因擴增檢驗實驗室原則上分為四個單獨的工作區域： 試劑貯存和準備區、 標本制備區、擴增反應混合物配制和擴增區、擴增產物分析區。為避免 交叉污染，進入各個工作區域必須嚴格遵循單一方向進行，即只能從試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增反應混合物配制和擴增區→擴增產物分析區。各實驗區之間的試劑及樣品
基因擴增檢驗的實驗室規范（二）
(三)擴增區下述工作在本區內進行：DNA或cDNA擴增。此外，已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。在巢式PCR測定中，通常在第一輪擴增后必須打開反應管，因此巢式擴增有較高的污染危險性，第二次加樣必須在本區
建立PCR實驗室的基本條件
臨床基因擴增實驗室采用PCR技術用于臨床基因診斷，由于PCR技術對所檢測的核酸模板進行大量擴增，容易出現實驗室污染導致臨床檢測標本假陽性結果；另外由于PCR技術要求高、影響因素多（特別是RNA標本），實驗過程處理不當易導致核酸模板無擴增現象，導致臨床標本假陰性結果。因此臨床基因擴增檢驗實驗室技術驗收