正常人羊膜細胞（HAM）原代細胞培養
實驗材料： 1.人胎盤； 2.A/GA：含抗生素的A（慶大霉素，50μg/ml；兩性霉素B，1.25μg/ml；鏈霉素100μg/ml；青霉素100U/ml）； 3.丙三醇； 4.含50%丙三醇的DMEM； 5.胰蛋白酶/EDTA； 6.Millicell微孔膜組織培養插片； 7.塑料刮片和無菌棉拭子； 實驗方法： 1.用A/GA清洗組織； 2.分離人羊膜，用戴手套的手從胎盤上將羊膜鈍性分離下來，分離出的羊膜薄層包括上皮細胞，基底膜和一些基質組織； 3.用無菌棉拭子除去基底膜下的基質組織，使分離的羊膜盡可能的薄； 4.在監測供者血清以除外疾病的時期，可以將粗分離出的人羊膜保存在含有50%丙三醇的DMEM中，-70℃存放； 5.臨用前解凍人羊膜，用A清洗后將其切成直徑約為2mm的小塊； 6.用胰蛋白酶/EDTA消化組織塊，37℃，30min； 7.用塑料刮片輕刮消化......閱讀全文
正常人羊膜細胞（HAM）原代細胞培養
PriCells: 正常人羊膜細胞（HAM）原代細胞培養實驗材料：1.?人胎盤；2.?PBSA/GASP：含抗生素的PBSA（慶大霉素，50μg/ml；兩性霉素B，1.25μg/ml；鏈霉素100μg/ml；青霉素100U/ml）；3.?丙三醇；4.?含50%丙三醇的DMEM；5.?胰蛋白酶/EDT
正常人羊膜細胞（HAM）原代細胞培養
實驗材料： 1.人胎盤； 2.A/GA：含抗生素的A（慶大霉素，50μg/ml；兩性霉素B，1.25μg/ml；鏈霉素100μg/ml；青霉素100U/ml）； 3.丙三醇； 4.含50%丙三醇的DMEM； 5.胰蛋白酶/EDTA； 6.Millicell微孔膜組織培養插片；
正常人臍靜脈原代內皮細胞培養
PriCells -? 正常人臍靜脈原代內皮細胞培養一、實驗試劑1、培養基：?PriCells?Medium?+?10%?FBS?+?1%?P/S?+?PriCells?Supplement2、凍存液：?PriCells?Medium?+?20%?FBS?+?10%?DMSO3、洗滌液：?1?×?P
正常人原代角膜間質細胞的分離
正常人原代角膜間質細胞的分離實驗材料：1.?完整的人角膜；2.?GMF-Saline G；3.?中性蛋白酶Ⅱ；PriCellls原代細胞分離試劑盒4.?L型膠原酶，1mg/ml在DMEM/F12/GASP中；5.?GMF-Saline G配制的TrypLE Express或0.25%胰蛋白酶；6.?
正常人原代角膜間質細胞的分離
正常人原代角膜間質細胞的分離 實驗材料： 1.完整的人角膜； 2.GMF-Saline G； 3.中性蛋白酶Ⅱ；PriCellls原代細胞分離試劑盒 4.L型膠原酶，1mg/ml在DMEM/F12/GA中； 5.GMF-Saline G配制的TrypLE Expre或0.
原代細胞培養簡介
原代細胞（primary culture cell）是指從機體取出后立即培養的細胞。有人把培養的第1代細胞與傳10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫學基礎研究，如蛋白質組學、基因組學、細胞株（系）研究、DNA，RNA和遺傳學研究等，還可應用于當今熱門的
原代細胞培養的應用
1、為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段； 2、為傳代培養創造條件； 3、服務于臨床實踐，用于藥物篩選等。
原代細胞培養技術分類
一、組織塊直接培養法1、取材，用Hank's液洗滌三次，并剔除脂肪，結締組織，血液等雜物。2、用手術剪將組織剪切成1mm3左右的小塊，再用Hank's液洗三次。3、將組織塊轉移至培養瓶，并貼附于瓶底面。4、輕輕將培養瓶翻轉，瓶底朝上，向瓶內注入適量的培養液，將培養瓶放置在37℃恒溫箱
原代細胞培養之取材
取材作為原代細胞培養過程中的第一部至關重要，以下幾種取材技術，你都用過哪些方法呢？ 各類組織取材，操作及注意事項： 1.皮膚和粘膜 主要取皮片，面積一般2~4平方厘米。 2.內臟和實體瘤 1）無菌環境； 2）熟悉所需組織的類型和部位； 3）要避開破潰、壞死液化部分，以防污染，盡量去
正常人骨膜內成骨細胞原代培養
實驗材料：骨組織來源：手術切除之骨組織；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1&time，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素，pH7.2；3. 消化液：0.25%胰蛋白酶溶液，1mg/mlⅠ型膠原酶溶液；4. 培養液：RPMI 1640培養基，配制培養液時加入15%的小牛血清，并用
正常人骨膜內成骨細胞原代培養
正常人骨膜內成骨細胞原代培養實驗材料：1.?骨組織來源：手術切除之骨組織；2.?清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素，pH7.2；3.?消化液：0.25%胰蛋白酶溶液，1mg/mlⅠ型膠原酶溶液；4.?培養液：RPMI?1640培養基，配制培
正常人甲狀腺細胞的原代培養方法
實驗材料： 1. 甲狀腺細胞材料來源：人孤立性良性甲狀腺腺瘤旁邊正常組織、甲狀腺功能亢進甲狀腺組織或甲狀腺腫瘤組織均可作為研究的材料； 2. 不含Ca2+和Mg2+的1&time，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素，pH7.2； 3. 培養用液：DME
正常人甲狀腺細胞的原代培養方法
實驗材料：1.????? 甲狀腺細胞材料來源：人孤立性良性甲狀腺腺瘤旁邊正常組織、甲狀腺功能亢進甲狀腺組織或甲狀腺腫瘤組織均可作為研究的材料；2.????? 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素，pH7.2；3.????? 培養用液：DMEM培養液
原代細胞培養方法有哪些
你主要要原代培養那種細胞，不同的細胞方法肯定不同。如一般懸浮細胞，如血液細胞，就分離后，直接培養。培養組織中的細胞，就需要消化過后，進行培養。也有用組織塊培養的
原代細胞培養之——培養技術
原代細胞的培養也叫初代培養?是從供體取得組織細胞在體外進行的首次培養，是建立細胞系的第一步，是一項基本技術。原代細胞因剛從組織中分離開，生物學特性未發生很大變化，仍保留原來的遺傳特性，也最接近和反映體內生長特性，適宜用于藥物敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。 原代細胞往往有多種細胞組成，比較混雜，即使
原代細胞培養優點與用途？
一、優點 (1) 細胞剛離開機體，生物學性狀與原體內細胞比較接近，相比之下，細胞系的一個缺點是它們往往與原始的組織有不一樣的遺傳和表型，而原代細胞保持了細胞在體內的許多重要標志和功能。 (2) 細胞的初代培養也是建立各種細胞株（系）的必經階段。 二、原代細胞培養的臨床應用： (1) 細胞
原代細胞培養之——取材技術
細胞的來源多樣，培養方法也各不相同，凡是來源于胚胎、組織器官及外周血，經特殊分離方法制備而來的原初培養的細胞稱之為原代細胞。原代細胞經分散接種之手段稱為傳代。凡能經傳代方式進行再次培養的細胞稱為傳代細胞。若能穩定生長傳至10~20代以上的細胞可確立為細胞系。若有條件能開展單細胞克隆、純化，經大量擴增
原代細胞培養之——細胞分離技術（二）
（2）?膠原酶（Collagenase）消化法? 膠原酶是一種從細菌中提取出來的酶，對膠原有很強的消化作用。適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織，它對細胞間質有較好的消化作用，對細胞本身影響不大，可使細胞與膠原成分脫離而不受傷害。該酶分離效果好，即使有鈣、鎂離子存在仍有活性，故可用PBS和含血清的
原代細胞培養之——細胞分離技術（一）
原代細胞的分離和制作人或動物體內（或胚胎組織）由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養中生長繁殖，即使采用1mm3的組織塊，也只有少量處于周邊的細胞可能生存和生長，若需獲取大量細胞，必須將現有的組織塊充分散開，使細胞解離出來，常采用的方法如下： 一、懸浮細胞的分離方法 組織材料若來自血液、羊水
細胞培養原代培養的原理
將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養。細胞培養是生物學和醫學研究最常用的手段之一，可分為原代培養和傳代培養兩種。原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養。由于
原代胚胎成纖維細胞培養
實驗器材手術小直剪刀三把、眼科直鑷子三把、眼科彎鑷子兩把、玻璃平 皿三套、200目尼龍濾網、50ML、15ML離心管和手術刀片。以上物品均需要高壓滅菌消毒處理。實驗試劑無Ca2+和Mg2+的 PBS、0.05%胰酶0.53mmol/L EDTA溶液、小鼠胚成纖維細胞（MEF）生長培養基：高糖DMEM
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
原代細胞培養可應用于：（1）分子生物學；（2）細胞生物學；（3）遺傳學；（4）免疫學；（5）腫瘤學；（6）病毒學等領域。實驗方法原理原代細胞培養，是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官，在體外培養，直到第一次傳代為止。這種培養，首先用無菌操作的方法，從動物體內取出所需的組織（或器官），經胰酶消化，
原代腎上皮細胞培養實驗
實驗方法原理將自皮質切除的組織快切成碎塊，沖洗后放入膠原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，搖晃消化。定時用吸管研磨組織塊，然后收集分離的細胞。用一定孔徑大小的濾網過濾細胞懸液，除去未消化的組織塊。然后，洗細胞，清除消化酶。用添加血清的培養液混懸細胞，將細胞接種于塑料培養器皿。實驗材料腎組織片試劑、試劑盒DME
原代腎上皮細胞培養實驗
原代腎上皮細胞培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將自皮質切除的組織快切成碎塊，沖洗后放入膠原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，搖晃消化。定時用吸管研磨組織塊，然后收集分離的細胞。
超實用原代細胞培養小知識
很多老師在設計科研實驗的時候都會很迷茫，到底用什么細胞好？ 越來越多的老師開始傾向于原代細胞的科研實驗，在設計實驗中，原代細胞和細胞株到底該怎么選擇呢？原代細胞的定義：原代細胞的培養是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養。因此，較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養，此時的細胞保持原有細胞的基
原代神經細胞培養操作步驟
1．取出生后1-3天內的大鼠腦組織后，先仔細剝除腦膜和血管等纖維成分，置入Hanks液中漂洗1～2次后，置于30～50倍體積的Hank液中，腦組織比較柔軟，反復吹打即可制成細胞懸液。 2．為排除脂肪成分和其它碎塊，把懸液注入離心管中，在室溫直立5～10分鐘后，細胞或細胞團塊自然下沉，脂肪等
原代胚胎成纖維細胞培養
實驗方法原理細胞培養是模擬機體內生理條件，將細胞從機體內取出，在人工條件下培養，使細胞生存、生長、繁殖和傳代，從而可以進行細胞生命過程、細胞癌變等問題的研究。由體內直接取出組織或細胞進行細胞培養叫做原代細胞培養，也有的把第1代細胞與傳10代以內的細胞培養統稱為原代細胞培養。一般來說，用幼嫩狀態的組織
原代細胞培養的幾種常見技術
原代細胞傳代技術一、貼壁細胞的消化法傳代1、吸除或倒掉瓶內舊培養液。2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或與EDTA混合液）輕輕搖動培養瓶，使瓶底細胞都浸入溶液中。3、消化2-5分鐘后把培養瓶放置在顯微鏡下進行觀察，發現原貼壁的細胞逐漸趨于圓形，在還未漂起時，棄去消化液，加入培養液終止消化。4、用吸管
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
鼠胚原代細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代細胞培養，是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官，在體外培養，直到第一次傳代為止。這種培養，首先用無菌操作的方法，從動物
原代細胞培養中的常見錯誤
當培養原代細胞時，重要的是要記住，他們不是細胞系，不能同等對待。我們非常熟悉研究人員在培養原代細胞時遇到的常見問題。這里有六個在原代細胞培養中的常見錯誤，以及如何糾正這些錯誤。?錯誤1：一小管原代細胞在水浴中解凍一段時間糾正1：原代細胞對解凍過程非常敏感，因此將小瓶置于37℃水浴中，保持并輕輕旋轉直