大化所等揭示金屬釕配合物誘導DNA相分離微觀分子機制
近日,中國科學院大連化學物理研究所分子模擬與設計研究組研究員李國輝團隊與中山大學教授毛宗萬團隊合作,在揭示金屬釕配合物誘導DNA相分離微觀分子機制研究中取得進展。 細胞內生物大分子在正確的時間及空間實現一定秩序的聚集以達到“液-液”相分離(liquid-liquid phase separation, LLPS)的現象調節著諸多細胞活動,已成為生命科學領域研究、關注的熱點。其中,DNA“液-液”相分離直接調控包括基因轉錄、翻譯和染色體高級結構組裝等重要過程。同時,DNA LLPS異常可導致致癌基因表達、基因組失活、轉錄激活失控等與疾病直接相關的細胞過程。 該研究中,合作團隊提出了一種具有高度DNA親和性及光開關屬性的金屬釕配合物以實現活體細胞DNA分子相分離過程的實時檢測。此外,金屬釕配合物在體內外均顯示出有效的腫瘤抑制活性。李國輝團隊通過多尺度分子動力學模擬,闡明了釕配合物通過正電親脂性三苯基膦取代基和柔性長烷基鏈在D......閱讀全文
葉綠體DNA分離
設備:Hitachi CS-150GXL或CS-120GXL微量超速離心機,S100AT6 轉頭,5PA 密封管(如果用4PC管,可接比例減少各層液量)溶液配制:A液:0.35Msorbitol(山梨醇),50mM Tris—Hcl (PH8.0) 25mM EDTA—Na2B液:5%(w/w)So
DNA分子均需要高速醫用離心機進行分離研究
數據顯示,2009年至2011年國內品牌離心機組的市場占有率分別是8.0%、7.6%、7.8%,市場容量分別是27.5億元、32億元、42億元.搶占制冷技術zui高點,這是每次有中央空調企業推出離心機新產品后,屢屢被提及的詞匯.多年來,離心機技術一直被視為中央空調行業的技術壁壘.而在2013年,這一
酵母DNA的快速分離
實驗方法原理 根據該方案制備的酵母 DNA 可以用作 PCR 反應的模板。在 E. coli 和 Saccharomyces cerevisiae 中均能復制的穿梭質粒也可以從酵母中提取,并且可以用于轉化 E. coli。實驗材料 酵母細胞試劑、試劑盒 乙醇酚氯仿醋酸鈉STES 緩沖液TE儀器、耗材
酵母DNA的快速分離
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 根據該方案制備的酵母 DNA 可以用作 PCR 反應的模板。在 E. coli 和 Saccharomyces cerevisiae 中均能復制的穿梭質粒也可以從酵母中提取,并且可以用于轉化 E. coli。
酵母DNA的快速分離
根據該方案制備的酵母 DNA 可以用作 PCR 反應的模板。在 E. coli 和 Saccharomyces cerevisiae 中均能復制的穿梭質粒也可以從酵母中提取,并且可以用于轉化 E. coli。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理根據該方案制備的酵母 DNA 可
DNA分離在什么時期
不可以,有絲分裂只有在間期才進行dna的復制,之后dna會隨著染色體運動,不再復制。
SDS法分離植物DNA
實驗概要Dellaporta,Wood?和?Hicks (1983)?法分離植物總基因組DNA,通過實驗掌握SDS法從植物葉片提取DNA?的原理和方法。主要試劑提取緩沖液?[?詳細信息:100mM Tris.Cl,;50mM EDTA; 500mM Nacl;40mmol/L?巰基乙醇,隨用隨加。]
DNA分子雜交原理
DNA分子雜交的原理是,具有互補堿基序列的DNA分子,可以通過堿基對之間形成氫鍵等,形成穩定的雙鏈區.如果兩DNA有一段相同堿基的話,就能形成氫鍵,且形成穩定的雙鏈區
大化所等揭示金屬釕配合物誘導DNA相分離微觀分子機制
近日,中國科學院大連化學物理研究所分子模擬與設計研究組研究員李國輝團隊與中山大學教授毛宗萬團隊合作,在揭示金屬釕配合物誘導DNA相分離微觀分子機制研究中取得進展。 細胞內生物大分子在正確的時間及空間實現一定秩序的聚集以達到“液-液”相分離(liquid-liquid phase separat
分子蒸餾——高新分離技術
分子蒸餾是一種高新分離技術,近十幾年來,在國際上得到了十分迅速的發展。特別是隨著綠色食品的興起,這種純物理分離技術更加倍受青睞。鑒于分子蒸餾是一種溫和的分離技術,特別適用于高沸點熱敏性物質的分離,因此,它可廣泛用于石油化工、生物制藥、食品工業、日化工業、香精香料、農藥及塑料工業等。分子蒸餾技術的特點
分子印跡分離技術概述
? ??分子印跡分離技術是指獲得在空間結構和結合位點上與某一分子(印跡分子)完全匹配的聚合物的過程。1、分子印跡分離技術的原理:??????? 當印跡分子與聚合物單體接觸時會形成多重結合位點,通過聚合過程這種作用被記憶下來,當除去印跡分子后,聚合物中形成了與印跡分子空間結構完全匹配的具有多重結合位點
分子印跡分離技術概述
分子印跡分離技術是指獲得在空間結構和結合位點上與某一分子(印跡分子)完全匹配的聚合物的過程。1、分子印跡分離技術的原理:當印跡分子與聚合物單體接觸時會形成多重結合位點,通過聚合過程這種作用被記憶下來,當除去印跡分子后,聚合物中形成了與印跡分子空間結構完全匹配的具有多重結合位點的空穴,這樣的空穴將對印
用甲酰胺從哺乳動物細胞中分離高分子質量DNA
實驗方法原理 本方案是 Kupiec 等所述方法(1987) 的改良版本,包括用蛋白酶 K 消化細胞和組織,用高濃度甲酰胺分離 DNA-蛋白質復合物(染色質用火棉膠袋充分透析去除蛋白酶和有機溶劑等過程。甲酰胺是一種離子化溶劑,能分離蛋白質-DNA 復合物并使蛋白變性和釋放,但他并不明顯影
用甲酰胺從哺乳動物細胞中分離高分子質量DNA
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本方案是 Kupiec 等所述方法(1987) 的改良版本,包括用蛋白酶 K 消化細胞和組織,用高濃度甲酰胺分離 DNA-蛋白質復合物(染色質用火棉膠袋充分透析去除蛋白酶和有機溶劑等過程。甲酰胺是一種離子化溶劑,能分離蛋白質
用甲酰胺從哺乳動物細胞中分離高分子質量DNA
本方案是 Kupiec 等所述方法(1987) 的改良版本,包括用蛋白酶 K 消化細胞和組織,用高濃度甲酰胺分離 DNA-蛋白質復合物(染色質用火棉膠袋充分透析去除蛋白酶和有機溶劑等過程。甲酰胺是一種離子化溶劑,能分離蛋白質-DNA 復合物并使蛋白變性和釋放,但他并不明顯影響蛋白酶 K 的活性。本實
PCR擴增分離目的DNA片段
一、目的了解多聚合酶鏈反應DNA 擴增技術的基本原理和實驗應用,掌握PCR反應基本技術。二、原理PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶鏈式反應是1986 年由Kallis Mullis 發現。這項技術已廣泛地應用于分子生物學各個領域,它不僅可用于基因分離克隆和核酸序列分
標本DNA的分離與純化
用5-10ml 1xNTE(NaCl 100mmol/L ,Tris-HCl 10mmol/l pH7.4,EDTa 1mmol/L pH8.0)調整細胞為2×107個(組織應切碎置液氮冰凍,高速攪切成粉末后,加入緩沖液)。加1/10-1/20體積(V)10mg/ml蛋白酶(Sigma Ⅷ型),
DNA分子雜交的意義
分類學上不同物種的DNA分子之間可以進行分子雜交,但是,遠緣物種的DNA分子之間進行雜交分子的可能性遠比近緣物種的要小得多。例如,細菌與真核細胞DNA分子之間形成雜交分子的可能性很小;不同細菌的 DNA分子之間雜交時,能形成某些互補片段;人的DNA分子與小鼠的 DNA分子之間雜交時,只有少量的人DN
分子蒸餾分離的原理
從統計學上看,不同種類的分子逸出液面后不與其它分子碰撞的飛行距離是不同的,輕分子的平均自由程大,重分子的平均自由程小。如果冷凝面與蒸發面的間距小于輕分子的平均自由程,大于重分子的平均自由程,這樣輕分子到達冷凝面被冷卻收集,從而破壞了輕分子的動態平衡,使輕分子不斷逸出,重分子因達不到冷凝面互相碰撞而返
分子蒸餾分離的原理
? ? ? 從統計學上看,不同種類的分子逸出液面后不與其它分子碰撞的飛行距離是不同的,輕分子的平均自由程大,重分子的平均自由程小。如果冷凝面與蒸發面的間距小于輕分子的平均自由程,大于重分子的平均自由程,這樣輕分子到達冷凝面被冷卻收集,從而破壞了輕分子的動態平衡,使輕分子不斷逸出,重分子因達不到冷凝面
哺乳動物-DNA-的快速分離
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 根據本方案制備的哺乳動物 DNA 約 20~50 kb,適于作 PCR 反應的模板。DNA 產量在 0.5 到 3.0 μg/mg 組織之間變化,或者是 5~15 μg/300μl 全血。
植物細胞葉綠體DNA的分離純化
實驗方法原理本實驗首先是制備植物新鮮組織勻漿、過濾,分離出完整的葉綠體,然后通過蔗糖密度梯度離心,把葉綠體與其他亞細胞結構分離開來。完整葉綠體經蛋白酶K酶解后,再通過酚-氯仿抽提獲得高純度的葉綠體DNA。實驗材料植物新鮮幼嫩葉片試劑、試劑盒緩沖液A(提取緩沖液)緩沖液B(裂解緩沖液)TE緩沖液蔗糖溶
堿法分離質粒DNA的原理
現在質粒提取無論手提還是試劑盒,其根本原理大多還是堿裂解法:當菌體在NaOH和 SDS溶液中裂解時,蛋白質與DNA發生變性,當加入中和液后,質粒DNA分子能夠迅速復性,呈溶解狀態,離心時留在上清中;蛋白質與染色體DNA不變性 而呈絮狀,離心時可沉淀下來。進一步的質粒DNA獲取,手提是經過苯酚、氯仿抽
小量培養物中分離-BAC-DNA
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 小量 BAC DNA 是從 5 ml BAC 轉化細胞培養物中制備的。DNA 的制備采用堿裂解法。BAC DNA 的產量可達 0.1~0.4? μg,足夠用于限制酶切分析、PCR 或 Southern 印跡。
大量培養物中分離-BAC-DNA
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 BAC 重組子的精細分析,包括詳細的限制酶切圖譜、DNA 測序或亞克隆,所需 DNA 量都超過小量制備所能提供的量。本方案的制備流程適用于重組 BAC 的大規模培養物。500 ml BAC 轉化菌的平均產量為 20~25 μ
堿法分離質粒DNA的原理
現在質粒提取無論手提還是試劑盒,其根本原理大多還是堿裂解法:當菌體在NaOH和 SDS溶液中裂解時,蛋白質與DNA發生變性,當加入中和液后,質粒DNA分子能夠迅速復性,呈溶解狀態,離心時留在上清中;蛋白質與染色體DNA不變性 而呈絮狀,離心時可沉淀下來。進一步的質粒DNA獲取,手提是經過苯酚、氯仿抽
大量培養物中分離-BAC-DNA
BAC 重組子的精細分析,包括詳細的限制酶切圖譜、DNA 測序或亞克隆,所需 DNA 量都超過小量制備所能提供的量。本方案的制備流程適用于重組 BAC 的大規模培養物。500 ml BAC 轉化菌的平均產量為 20~25 μg BAC DNA。還可用柱層析對 DNA 產物進一步純化。本實驗來源「分子
質粒DNA的分離、純化和鑒定
材料、設備及試劑 一、材料 含質粒的E. coli DH5α或JM系列菌株,1.5ml塑料離心管(又稱eppendorf管),離心管架。 二、設備 微量取液器(20μl,200μl,1000μl), 臺式高速離心機,恒溫振蕩搖床, 高壓蒸汽消毒器(滅菌鍋), 渦旋振蕩器, 電泳儀,瓊脂糖平板
堿法分離質粒DNA的原理
現在質粒提取無論手提還是試劑盒,其根本原理大多還是堿裂解法:當菌體在NaOH和 SDS溶液中裂解時,蛋白質與DNA發生變性,當加入中和液后,質粒DNA分子能夠迅速復性,呈溶解狀態,離心時留在上清中;蛋白質與染色體DNA不變性 而呈絮狀,離心時可沉淀下來。進一步的質粒DNA獲取,手提是經過苯酚、氯仿抽
植物細胞葉綠體DNA的分離純化
實驗方法原理 本實驗首先是制備植物新鮮組織勻漿、過濾,分離出完整的葉綠體,然后通過蔗糖密度梯度離心,把葉綠體與其他亞細胞結構分離開來。完整葉綠體經蛋白酶K酶解后,再通過酚-氯仿抽提獲得高純度的葉綠體DNA。實驗材料 植物新鮮幼嫩葉片試劑、試劑盒 緩沖液A(提取緩沖液)緩沖液B(裂解緩沖液)TE緩沖液