什么是TLC檢測
薄層色譜法(TLC),系將適宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上,成一均勻薄層。待點樣、展開后,根據比移值(Rf)與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值(Rf)作對比,用以進行藥品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,也用于跟蹤反應進程。基本原理薄層色譜法是一種吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同,使在流動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中,連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,從而達到各成分的互相分離的目的。薄層層析可根據作為固定相的支持物不同,分為薄層吸附層析(吸附劑)、薄層分配層析(纖維素)、薄層離子交換層析(離子交換劑)、薄層凝膠層析(分子篩凝膠)等。一般實驗中應用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。吸附是表面的一個重要性質。任何兩個相都可以形成表面,吸附就是其中一個相的物質或溶解于其中的溶質在此表面上的密集現象。在固體與氣體之......閱讀全文
TLC點樣注意點
點樣注意點?點樣量:原點位置對樣品容積的負荷量有限,體積不宜太大,一般為0.5~10μl,樣品的濃度通常為0.5~2 mg,太濃時展開劑從原點外圍繞行而不是通過整個原點把它帶動向前,使斑點拖尾或重疊,降低分離效率。點樣量太小,不能檢出清晰的斑點影響判斷。點樣量太多,展開劑不能全部負載,容易產生拖尾現
TLC分析與顯色
分析與顯色由于被分離出的化學品可能是無色的,因此下列幾種方法可用于讓沒有可見光吸收的斑點顯色:通常在可使用少量的熒光化合物,如錳-活化的鋅硅酸鹽加入到吸附相當中,使得吸附物在黑光(UV254)下可以顯色。固定相在熒光下本身顯綠色,因此化合物的斑點可以掩蓋掉熒光下的綠色從而達到顯色目的。碘蒸氣是對于大
薄層色譜(TLC)定義
薄層色譜(TLC)是一種非常有用的跟蹤反應的手段,還可以用于柱色譜分離中合適溶劑的選擇。薄層色譜常用的固定相有氧化鋁或硅膠,它們是極性很大(標準)或者是非極性的(反相)。流動相則是一種極性待選的溶劑。在5.301中以及大多數實驗室實驗中,都將使用標準硅膠板。將溶液中的反應混合物點在薄板上,然后利用毛
TLC邊緣效應
邊緣效應展開劑在薄層上運行時,極性較弱的展開劑和沸點較低的溶劑在薄層板兩邊沿處較易揮發,使薄層板上展開劑的比例不一致,極性發生變化,因此產生了邊緣效應。解決方法? ?增加層板缸中溶劑蒸氣濃度,在層板缸內壁貼上浸濕展開劑的濾紙或選擇內徑和長度適宜的層析缸進行層析;選擇適宜的單一溶劑代替混合溶劑;采用共
博暉創新TLCCMS用于蘇丹紅檢測
蘇丹紅 蘇丹紅是工業染劑,不是食品添加劑,具有致癌性,卻被添加在辣椒粉、咸鴨蛋等食物里增加色澤,給食品安全帶來隱患。含有致癌物質蘇丹紅蘇丹紅具有多種化學結構,最常見的是蘇丹紅I、II、III、IV號 實驗室檢測蘇丹紅原料準備: 辣椒粉購自當地超市,經乙腈萃取、過濾成辣椒粉溶液蘇丹紅染料原液經稀
黃曲霉毒素檢測方法薄層分析法(TLC)
TLC法是檢測黃曲霉素最為經典的方法,也是以前最為常用的方法,至今仍為一些檢測機構所用,也是一種國標方法。其原理是針對不同的試樣,用適宜的萃取溶劑將黃曲霉素從試樣中萃取出來,經柱層析凈化后,再在薄板上展開后分離。利用黃曲霉素的熒光特性,根據熒光斑點的強弱與標準比較確定其含量,對于一些組分很復雜的試樣
原位TLCFTIR法
該方法是采用紅外漫反射光譜(DRIFTS)測定法對TLC板上的色譜斑點進行直接檢測,最初是在1975年由Percival和Griffiths報道的。傅里葉紅外光譜儀的漫反射裝置見圖11-6-25。一般在未點樣前先測得薄層板背景光譜圖,點樣層析后再測得同樣位置的分離譜帶的紅外光譜圖,前后譜圖經差譜可得
TLC基本參數
基本參數1.比移值(Rf)=原點至組分點中心的距離/原點至流動前沿的距離。如圖:組分A的Rf=a/l;組分B的Rf=b/l。2.相對比移值,即相對某一物質X的Rf值,用Rx表示。其定義為:Rx=組分的Rf值/物質x的Rf值,組分A相對于物質B的“相對比移值” RB?=a/b
TLC的原理是什么
薄層色譜(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又稱薄層層析,屬于固-液吸附色譜。是近年來發展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法,它兼備了柱色譜和紙色譜的優點。一方面適用于小量樣品(幾到幾十微克,甚至0.01μg)的分離;另一方面若在制作薄層板時,把吸附層加厚,將樣品點
TLC中干法裝柱
干法裝柱則是直接往柱子里填入硅膠,然后再輕輕敲打柱子兩側(濕法也要敲的,效果好點),至硅膠界面不再下降為止,然后再填入硅膠至合適高度,最后再用油泵直接抽,這樣就會使得柱子裝的很結實(一般柱子不敢用油泵抽,怕把柱子抽裂了)。接著是用淋洗劑"走柱子",一般淋洗劑是采用TLC分析得到的展開劑的比例再稀釋一
TLC照相操作規程
TLC照相操作規程1 安裝近攝鏡、外快門線。2 固定相機,使鏡頭與薄層板距離約30cm。3 打開開關“ON”。4 光圈調在 f3.5。5 調節快門檔,熒光照相置“ B”檔,日光照相觀察自動顯示的速度,一般在1/30或 l/15秒檔。6 打開攝影架的電源開關及日光燈。7 放置需拍攝的 TLC板,調節變
TLC點樣方式和方法
點樣(1)點樣方式:分為手動點樣和自動點樣。手動點樣主要器具為微量毛細管、微量注射器等。自動點樣采用半自動點樣儀或全自動點樣儀,按預設程序自動點樣。手動點樣靈活方便,器具以微量毛細管最常用。儀器的自動點樣準確性好,常用于薄層掃描法的含量測定。(2)點樣方法:分為接觸式點樣和噴霧點樣。噴霧點樣為儀器控
TLC中手工自制板
手工自制板1)、玻璃板的要求:用于制備薄層板的玻璃板要求表面光潔、平整,最好使用厚薄1~2mm的優質平板玻璃,普通窗玻璃一般不宜用于制作薄層板,玻璃板需洗凈至不掛水,晾干,貯存于干燥潔凈處備用。玻璃板反復使用時,應注意經常用洗液及堿液清洗,保持玻璃板面的光潔是保證薄層板質量的最基本要求。2)、制作方
TLC洗脫劑(流動相)
洗脫劑(流動相)以硅膠TLC片來說,洗脫劑的強度比較為:全氟烷(最弱)<己烷<戊烷<四氟化碳<苯/甲苯<二氯甲烷<乙醚<乙酸乙酯<乙腈<丙酮<2-丙酮/正丁醇<水<甲醇<三乙胺<乙酸<甲酸(最強)而對于C18覆蓋的TLC板,其順序完全相反。在應用中,若使用乙酸乙酯/庚烷的混合溶劑作為流動相,乙酸乙酯
TLC薄層色譜法
薄層色譜法,又簡寫為TLC,常用于中藥成方制劑中有效成分的定性鑒別。由于該方法鑒別專屬性強,使用設備簡單,易于操作,故應用廣泛,在目前的藥品質量標準定性鑒別中(如中國藥典和食品藥品監督管理局標準),已大大地超過了顯微鑒別、理化鑒別和光譜鑒別。
TLC操作過程
操作過程點樣:將試樣溶液用毛細管在層析板上距離板底部約1.5厘米的位置點若干下(次數根據樣品濃度而定),并靜置頃刻(或加熱)以使溶劑完全蒸發。若溶劑難以揮發,則點樣之后需要將板放于真空容器中干燥后再使用。溶劑的蒸發是必須的,否則殘留的溶劑會與流動相作用,降低流動相的均一性,導致分離效果變差。將少量合
TLC薄層板的選用
薄層板的選用目前實驗室已普遍采用市售高效薄層板,以硅膠G型板最為常見,相對于自制薄層板來說分離效果更好。由于硅膠表面的pH值約為5,比較適合于酸性和中性物質的分離,如有機酸、酚類、醛類等。堿性物質能與硅膠作用,展開時易被吸附于原點不動或出現斑點拖尾現象。在自制薄層板時可用稀堿溶液制備薄層使其變為堿性
TLC中濕法裝柱
濕法裝柱是先把硅膠用適當的溶劑拌勻后,再填入柱子中,然后再加壓(土方法可以用養魚的氧氣泵加壓或是用氮氣,當然不加壓也可以)用淋洗劑"走柱子",本法最大的優點是一般柱子裝的比較結實,沒有氣泡。 (我一般都用濕法裝柱)
TLC的通用顯色方法
TLC的通用顯色方法理想的顯色希望靈敏度高,斑點顏色穩定、斑點與背景間的對比度好,斑點的大小及顏色的深度與物質的量成正比,在樣品組成并不完全已知的情況下,通用顯色方法顯得尤為重要,通用顯色方法主要有:1)、紫外照射法:方便、不破壞樣品;2)、碘蒸氣法:通用性強,與紫外法結合靈敏度高于該兩法單獨使用;
肺功能化學檢測項目介紹殘氣量/肺總量比值(RV/TLC)
殘氣量/肺總量比值(RV/TLC)介紹: 殘氣量為深聽氣后殘留在肺內的氣量。殘氣量/肺總量比值(RV/TLC)正常值: 男0.307;女0.29。殘氣量/肺總量比值(RV/TLC)臨床意義: 增加:肺氣腫,小氣道在過閉合等。殘氣量及肺總量明顯增加,提示慢性阻塞性通氣障礙,如肺氣腫、肺心病等。
薄層色譜法(TLC)簡介
簡介? ?1.定義:薄層色譜法(Thin Layer Chromatography,TLC)通常指以吸附劑為固定相的一種液相色譜法。即將固定相在玻璃、金屬或塑料等光潔的表面上均勻地鋪成薄層,試樣點在薄層的一端,流動相借毛細作用流經固定相,使被分離的物質展開。? ??2.原理:薄層色譜是吸附色譜,展開
TLC展開劑的選擇
TLC與HPLC相比,一個突出的優點就是流動相的選擇具有更大的靈活性,流動相的選擇的目的是使絕大部分樣品的Rf值位于0.1-0.7之間并達到較好的分離,與此對應的是流動相要有適當的強度和組成。流動相強度越大,溶質Rf值越大,但很可能降低分離能力;另外單一溶劑很難分離較復雜的混合物、根據相似相溶原理,
薄層層析(TLC)方法(一)
? 薄層層析是將吸附劑或者支持劑(有時加入固化劑)均勻地鋪在一塊玻璃上,形成薄層。把欲分離的樣品點在薄層上,然后用適宜的溶劑展開,使混合物得以分離的方法。由于層析在薄層上進行故而得名。 薄層層析是一種微量、快速的層析方法。它不僅可以用于純物質的鑒定,也可用于混合物的分離、提純及含量的測定。還可以通
TLC中提高點樣效率
怎樣提高點樣效率?點樣是造成TLC定量誤差的主要來源。實驗證明:定量毛細管更適合較小體積的點樣;微量注射器更適合較大體積的點樣。這主要是因為微量注射器受小氣泡、溶液回爬現象的影響較大。為避免不同定量毛細管理體制的占樣誤差,建議一塊薄層板上最好用同一只定量毛細管。但應注意更換樣品時,應將毛細管用超聲波
薄層層析(TLC)方法(二)
薄層層析是將吸附劑或者支持劑(有時加入固化劑)均勻地鋪在一塊玻璃上,形成薄層。把欲分離的樣品點在薄層上,然后用適宜的溶劑展開,使混合物得以分離的方法。由于層析在薄層上進行故而得名。 薄層層析是一種微量、快速的層析方法。它不僅可以用于純物質的鑒定,也可用于混合物的分離、提純及含量的測定。還可以通過薄
TLC顯色試劑及配方大全
顯色劑可以分成兩大類:一類是檢查一般有機化合物的通用顯色劑;另一類是根據化合物分類或特殊官能團設計的專屬性顯色劑。顯色劑種類繁多,本章只能列舉一些常用的顯色劑。l.通用顯色劑?①硫酸常用的有四種溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L硫酸溶液與0.5-1.5mo
TLC顯色試劑及配方大全
顯色劑可以分成兩大類:一類是檢查一般有機化合物的通用顯色劑;另一類是根據化合物分類或特殊官能團設計的專屬性顯色劑。顯色劑種類繁多,本章只能列舉一些常用的顯色劑。 l.通用顯色劑 ①硫酸常用的有四種溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L硫酸溶液與0.5-1
TLCFTIR聯用技術的應用
Yamamoto等人于1991年報道了成功應用自動洗脫物轉移接口裝置分析了咖啡因,非那西汀和那可汀混合物的實例,所用譜儀為配備漫反射附件的Shimadzu 4200 FTIR光譜儀。圖11-6-28中(a)為TLC分離的各組分(對應不同比移值Rf)的UV色譜圖(220nm),(b)為轉移后的
如何減少TLC的邊緣效應?
增加層板缸中溶劑蒸氣濃度,在層板缸內壁貼上浸濕展開劑的濾紙或選擇內徑和長度適宜的層析缸進行層析;選擇適宜的單一溶劑代替混合溶劑;采用共沸溶劑代替一般混合溶劑。
TLC柱層析中硅膠的使用
?硅膠的使用初做柱層析很容易把柱子裝得長了或短了,有時還會有大量的硅膠剩余,浪費硅膠,這主要是對硅膠等固定相的使用的量沒有掌握。柱層析用的硅膠一般是 100-200 目,100 毫升硅膠的質量在47 克左右,如果裝一個直徑是 2.8 厘米的柱子,可以裝 18 厘高。為了避免浪費硅膠和溶劑,最初學習裝