內皮細胞培養以人臍帶靜脈灌流消化法的簡介
1、產后新鮮臍帶,無菌剪取 10—15 厘米長一段,如不能立即培養,可于 12 小 時內保存于 4℃。 2、用三通注射器吸取溫 PBS 液注入臍靜脈中洗去殘血,在入口處用線繩扎緊, 以防液體返流。 3、用血管鉗夾緊臍帶一端,從另一端向臍靜脈中徐徐注入濃度為 0.1%的粗制膠原酶,充滿血管,消化 3—10 分鐘;注入口用線繩扎,以防液體返流。 4、吸出含有內皮細胞的消化液,于離心管中,注入溫 PBS 輕輕反復沖洗后,一 并注入離心管中(此步驟可重復) 。 5、離心去上清,加入RPMI1640培養液制成細胞懸液,接種入培養器皿中,置溫 箱培養。兩至三天可見細胞長成單層。 神經細胞(神經元)不易培養,只有在適宜情況下,如接種在膠原底層上,或加入神經生長因子和膠質細胞因子時,可出現一定程度的分化,長出突起等現象, 但很難使之增殖。而神經膠質細胞是神經組織中比較容易培養的成分。人、鼠等腦組織即可用于神經膠質細胞培養,不僅能獲......閱讀全文
內皮細胞培養以人臍帶靜脈灌流消化法的簡介
1、產后新鮮臍帶,無菌剪取 10—15 厘米長一段,如不能立即培養,可于 12 小 時內保存于 4℃。 2、用三通注射器吸取溫 PBS 液注入臍靜脈中洗去殘血,在入口處用線繩扎緊, 以防液體返流。 3、用血管鉗夾緊臍帶一端,從另一端向臍靜脈中徐徐注入濃度為 0.1%的粗制膠原酶,充滿血管,消
血管內皮細胞原代培養(人臍帶靜脈灌流消化法)
內皮細胞易于從大血管分離培養成單層細胞,對于研究內皮細胞再生、腫瘤促血管生長因子(tumor angiogenesis factor,TAF)等有很大價值。研究人內皮細胞培養以人臍帶靜脈灌流消化法最為簡便,其法如下:1、產后新鮮臍帶,無菌剪取10—15厘米長一段,如不能立即培養,可于12小時內保存于
血管內皮細胞培養
研究人內皮細胞培養以人臍帶靜脈灌流消化法最為簡便,其法如下:1、產后新鮮臍帶,無菌剪取10—15厘米長一段,如不能立即培養,可于12小時內保存于4℃。2、用三通注射器吸取溫PBS液注入臍靜脈中洗去殘血,在入口處用線繩扎緊,以防液體返流。3、用血管鉗夾緊臍帶一端,從另一端向臍靜脈中徐徐注入終濃度為0.
上皮細胞類培養實驗_內皮細胞培養實驗
實驗方法原理內皮細胞易于從血管分離進行培養成單層細胞,對研究內皮細胞再生生、腫瘤促血管生長因子(TAF)等有很大應用價值。人內皮細胞培養可應用人臍帶臍靜脈、動物大動脈等,用灌流消化法獲取細胞最為簡便。實驗材料臍帶試劑、試劑盒膠原酶消化液PBS儀器、耗材注射器離心管培養基實驗步驟1. ?取產后的新鮮臍
人臍帶靜脈內皮細胞的分離培養與增殖實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在體外,內皮細胞在內皮細胞生長因子存在的條件下可迅速增殖,并可傳代,可作為內皮細胞增殖,細胞因子分泌、表型等研究的模型。 實驗材料 膠原酶
人臍帶靜脈內皮細胞的分離培養與增殖試驗
血管內皮細胞不僅參與調節血管通透性和凝血過程,在免疫調節,移植排斥,腫瘤轉移,炎癥等許多過程中也具有重要作用。內皮細胞培養是體外研究內皮細胞功能的重要手段。70年代Eric等建立了內皮細胞分離及體外培養的方法。人臍帶靜脈是人血管內皮細胞最易獲取的來源,在人內皮細胞的研究中被普遍采用。 ㈠ 原理在體
人臍帶靜脈內皮細胞的分離培養與增殖實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在體外,內皮細胞在內皮細胞生長因子存在的條件下可迅速增殖,并可傳代,可作為內皮細胞增殖,細胞因子分泌、表型等研究的模型。 實驗材料 膠原酶
人臍帶靜脈內皮細胞的分離培養與增殖實驗
實驗方法原理在體外,內皮細胞在內皮細胞生長因子存在的條件下可迅速增殖,并可傳代,可作為內皮細胞增殖,細胞因子分泌、表型等研究的模型。實驗材料膠原酶血清試劑、試劑盒Cord Buffor硫酸鏈霉素生埋鹽水EDTA-Na明膠儀器、耗材插管止血鉗注射器手套絲線飯盒勻漿機離心機振蕩器培養瓶CO孵箱顯微鏡超凈
HUVEC人臍靜脈內皮細胞培養要點
1984年,HUVEC細胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan從一段長約10-20cm的人正常臍帶靜脈中獲取、建立。SetsukoShioda等人研究發現,HUVEC細胞株18-30代的倍增時間為23.5個小時,24-27代的倍增時間為67個小時,27-30代的倍
HUVEC人臍靜脈內皮細胞培養要點
1984年,HUVEC細胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan從一段長約10-20cm的人正常臍帶靜脈中獲取、建立。SetsukoShioda等人研究發現,HUVEC細胞株18-30代的倍增時間為23.5個小時,24-27代的倍增時間為67個小時,27-30代的倍
HUVEC人臍靜脈內皮細胞培養要點
1984年,HUVEC細胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan從一段長約10-20cm的人正常臍帶靜脈中獲取、建立。SetsukoShioda等人研究發現,HUVEC細胞株18-30代的倍增時間為23.5個小時,24-27代的倍增時間為67個小時,27-30代的倍
體內組織細胞的體外培養1
體內組織細胞在體外培養時,所需培養環境基本相似,但由于物種、個體遺傳背景及所處發育階段等的不同,各自要求條件有一定差別,所采取的培養技術措施亦不盡相同,現介紹個別組織細胞培養的要點如下:一、上皮細胞培養上皮細胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養特別
細胞實驗技術及細胞培養基本知識2
(二)人類淋巴母細胞建株方法1、4ml肝素抗凝血于離心管中,加入2ml RPMI 1640。 2、混勻后沿管壁緩慢加到預置有4ml淋巴細胞分離液的液面上靜置30min。 3、1500rpm,15min,吸取白細胞層(第二層)于另一離心管中。 4、加RPMI 1640 5ml洗滌白細胞兩次。
臍靜脈內皮細胞培養方法2
(2)術前準備取一根臍帶(離體3個小時內,平均1小時,剪去夾傷部位)2個50ML注射器,1個30ML注射器和1個10ML注射器1個止血鉗,2根插管,14號線2CM長,消毒巾,消毒手術刀和無菌手套手術區域準備:一塊床單和無菌手套封套3 臍帶手術操作和培養(1)用手術刀整齊切斷臍帶兩端(2)靜脈(口徑最
臍靜脈內皮細胞培養方法1
一、試劑和緩沖液配制1、胎牛血清(氯化十六烷基吡啶)(1)解凍胎牛血清(2)在56℃加熱30分鐘(脫補體作用,蓋上瓶)(3)取25ml上述液體放在無菌的50ml的falcon里分餾(4)在-20℃冰凍餾份2、磷酸鹽緩沖液(PBS)(1)無鈣鎂離子的100ML的PBS(10×)(生命技術)(2)900
各類上皮細胞培養1
上皮細胞培養?1)表皮細胞培養?1.取材:取外科植皮或手術殘余皮膚小塊,以角化層薄者為佳,早產流產兒皮膚更好,切成0.5~1?平方厘米小塊。?2.EDTA?處理:先置入0.02%EDTA?中室溫置5?分鐘。?3.冷消化:換入0.25%胰蛋白酶中,置4℃過夜。?4.分離:取出皮膚,用血管鉗或鑷子把表皮
人臍靜脈內皮細胞的介紹
人臍靜脈內皮細胞(英Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)在進行血管內皮細胞實驗時,通常選用的細胞模型為人臍靜脈內皮細胞(Human umbilical vein endothelial cells,簡稱HUVECs)。而不是直接采用靜脈血管內皮細
細胞生物基本方法:上皮細胞培養
上皮細胞培養1)表皮細胞培養1.取材:取外科植皮或手術殘余皮膚小塊,以角化層薄者為佳,早產流產兒皮膚更好,切成0.5~1平方厘米小塊。2.EDTA處理:先置入0.02%EDTA中室溫置5分鐘。3.冷消化:換入0.25%胰蛋白酶中,置4℃過夜。4.分離:取出皮膚,用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層分開。5.
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗——消化法
人臍動脈平滑肌細胞培養可以:(1)獲得人臍動脈平滑肌細胞;(2)作為重大動脈疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)對血管疾病的藥理學和治療繼續提供信息。實驗方法原理運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料臍帶試劑、試劑盒膠原
人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)培養
實驗材料 新生兒臍帶試劑、試劑盒 PBS膠原酶M199培養基胰酶EDTADMEM培養基儀器、耗材 針頭手術鉗離心管低溫離心機彎管明膠恒溫培養箱顯微鏡實驗步驟1. 將15-20cm 長的新生兒臍帶放入無菌的PBS 溶液中儲存。(注:4℃下最多貯存24 小時,室溫下不超過6 小時,否則廢棄)2. 用一個
人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)培養
人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)培養1 ).?將15-20cm長的新生兒臍帶放入無菌的PBS溶液中儲存。(注:4℃下最多貯存24小時,室溫下不超過6小時,否則廢棄)2 ).?用一個鈍頭的針頭扎入臍帶靜脈管中,用無菌的PBS溶液沖洗3-5次,將污血沖洗干凈為止。3 ).?用手術鉗夾緊臍帶下端,加入15m
人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)培養
1. 將 15-20cm 長的新生兒臍帶放入無菌的 PBS 溶液中儲存。(注:4℃下最多貯存 24 小時,室溫下不超過 6 小時,否則廢棄)2. 用一個鈍頭的針頭扎入臍帶靜脈管中,用無菌的 PBS 溶液沖洗 3-5 次,將污血沖洗干凈為止。3. 用手術鉗夾緊臍帶下端,加入 15ml 的膠原酶(1mg
人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)培養
人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)培養?1. 將 15-20cm 長的新生兒臍帶放入無菌的 PBS 溶液中儲存。(注:4℃下多貯存 24 小時,室溫下不超過 6 小時,否則廢棄)?2. 用一個鈍頭的針頭扎入臍帶靜脈管中,用無菌的 PBS 溶液沖洗 3-5 次,將污血沖洗干凈為止。?3. 用手術鉗夾緊臍帶
人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)培養
人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)可用于:(1)作為體外實驗模型細胞;(2)研究血管內皮細胞的生物學特性及其與各種疾病的關系。實驗方法原理本實驗采用新鮮的健康產婦新生兒臍帶,采用膠原酶Ⅰ型用消化分離得到臍靜脈內皮原代細胞。膠原酶是最理想的血管內皮細胞分離酶,對細胞間質有較強的消化作用,能使上皮細胞與膠原
正常人臍靜脈原代內皮細胞培養
PriCells -? 正常人臍靜脈原代內皮細胞培養一、實驗試劑1、培養基:?PriCells?Medium?+?10%?FBS?+?1%?P/S?+?PriCells?Supplement2、凍存液:?PriCells?Medium?+?20%?FBS?+?10%?DMSO3、洗滌液:?1?×?P
常見組織細胞的培養方法-(一)
體內組織細胞在體外培養時,所需培養環境基本相似,但由于物種、個體遺傳背景及所處發育階段等的不同,各自要求條件有一定差別,所采取的培養技術措施亦不盡相同,現介紹個別組織細胞培養的要點如下:*節 上皮細胞培養上皮細胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養特
個別組織細胞的培養
體內組織細胞在體外培養時,所需培養環境基本相似,但由于物種、個體遺傳背景及所處發育階段等的不同,各自要求條件有一定差別,所采取的培養技術措施亦不盡相同,現介紹個別組織細胞培養的要點如下:一、上皮細胞培養上皮細胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養特別
血管內皮細胞的分離和培養_分離人臍靜脈內皮細胞
實驗方法原理本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改寫的。實驗材料D-PBSA胰蛋白酶EDTA人臍帶膠原蛋內酶H冷的新生小牛血試劑、試劑盒Hank平衡鹽溶液HBSS PSG70%乙醇HUVRC生長培養液儀器、耗材培養瓶手術刀和22號刀片手術針20ml注射器鱷魚夾動脈夾尖頭剪棉紙鋁箔塑料
臍帶和臍血來源干細胞的培養實驗_酶消化法
實驗材料臍帶試劑、試劑盒Wharton膠PBSA膠原酶儀器、耗材培養瓶實驗步驟(a)臍帶取材后,可在PBSA中保存1?24h。(b)除去血管,將Wharton膠剪成大約0.5cm的小組織塊。(c)將剪碎的組織塊轉移到50mL離心管,用無血清DMEM洗,室溫250g離心5min。(d)倒掉上清液,將離
膠原酶消化法—培養臍帶間充質干細胞
人臍帶間充質干細胞具有高度分化潛能,基因穩定、不易突變,不會引起腫瘤;無需配型、無排異,廣泛應用于疾病治療及抗衰老研究。目前,在美容行業及針對亞健康群體的應用,也越來越引人注目。臍帶間充質干細胞臍帶是由包膜、華通氏膠、臍靜脈、臍動脈臍構成。臍帶間充質干細胞存在于華通氏膠中。由于存在數量少,用膠原酶消