轉運反應成分的制備實驗——制備藻膽色素蛋白標志物
試劑、試劑盒APC 懸浮液HEPESNaClSMCC儀器、耗材微量離心管Sephadex G50 脫鹽柱實驗步驟1. 在一微量離心管中,4℃,10000 g 離心 APC 懸浮液 5~10 分鐘,吸走上清。2. 用 0.1 mol/L HEPES(pH 7.4),0.1 mol/L NaCl 重懸浮沉淀至濃度為 5 mg/ml。用這種緩沖液透析幾次去除殘留的硫酸銨。3. 臨用前用透析液溶解硫代 SMCC,濃度為 10 mg/ml。4. 按 0.1 mg 硫代-SMCC/1 mg APC 的比例將硫代-SMCC 加到蛋白質中,冰上孵育 45 分鐘。5. 將修飾后的 APC 過一 5 ml 的 Sephadex G50 脫鹽柱,柱子預先用 0.1 mol/L HEPES,(pH 7.4),0.1 mol/L NaCl 和 1 mmol/L EDTA 平衡。6. 通過真空透析或用一離心濃縮裝置將 APC 濃縮為 5 mg/ml。7. ......閱讀全文
轉運反應成分的制備實驗——制備藻膽色素蛋白標志物
試劑、試劑盒APC 懸浮液HEPESNaClSMCC儀器、耗材微量離心管Sephadex G50 脫鹽柱實驗步驟1. 在一微量離心管中,4℃,10000 g 離心 APC 懸浮液 5~10 分鐘,吸走上清。2. 用 0.1 mol/L HEPES(pH 7.4),0.1 mol/L NaCl 重懸浮
轉運反應成分的制備實驗——轉運反應
試劑、試劑盒磷酸肌酸肌酸磷酸激酶ATPGTP儀器、耗材微量離心管實驗步驟1. 將反應混合物加入一在冰上放置的微量離心管中。能量重建系統成分如下:5 mmol/L 磷酸肌酸20 單位/ml 肌酸磷酸激酶0.5 mmol/L ATP0.5 mmol/L GTP2. 滴一滴孵育混合物到一片位于帶蓋子的濕盒
轉運反應成分的制備實驗
制備藻膽色素蛋白標志物 胞質液的制備 細胞通透化 轉運反應 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 APC 懸浮液
轉運反應成分的制備實驗
制備藻膽色素蛋白標志物胞質液的制備細胞通透化轉運反應試劑、試劑盒APC 懸浮液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?HEPES ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
轉運反應成分的制備實驗
試劑、試劑盒 APC 懸浮液HEPESNaClSMCC儀器、耗材 微量離心管Sephadex G50 脫鹽柱實驗步驟 1. 在一微量離心管中,4℃,10000 g 離心 APC 懸浮液 5~10 分鐘,吸走上清。2. 用 0.1 mol/L HEPES(pH 7.4),0.1 mol/L NaCl
轉運反應成分的制備實驗——胞質液的制備
實驗材料血試劑、試劑盒酸-檸檬酸鹽-葡萄糖溶液裂解緩沖液儀器、耗材離心機實驗步驟一、網狀細胞和紅細胞胞質液的制備1. 自動物身上采血,每 7 ml 血加 1 ml 酸-檸檬酸鹽-葡萄糖溶液(ACD;75 mmol/L 檸檬酸三鈉,38 mmol/L 檸檬酸,136 mmol/L 葡萄糖,pH 5.0
轉運反應成分的制備實驗——細胞通透化
實驗材料細胞試劑、試劑盒毛地黃皂苷轉運緩沖液實驗步驟1. 制備用于同透化的細胞(1) 對于在蓋玻片上生長的細胞① 將在標準條件下培養的細胞或從組織采集的原代細胞鋪在置于 6 孔培養板中的 18x18 mmol/L 的蓋玻片上,生長過夜。② 實驗前 2~4 小時,換新培養液,重新放回培養箱中。③ 吸出
酪蛋白的制備實驗
等電點沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 牛乳中主要的蛋白質是酪蛋白,含量約為35 g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物,等電點為4.7。利用等電點時溶解度最低的原理,將牛
概述巖藻多糖的制備
巖藻多糖是一種水溶性的多糖,多采用水提法、酸提法或CaCl2法從褐藻或海帶中提取出來;新近報道的提取方法還有超聲波提取法和超濾膜提取法等。水提法主要是利用巖藻多糖易溶于熱水、不溶于乙醇等有機溶劑的特點,得到巖藻多糖粗品,Wang等將100g的葉剪切后,放到3500mL、120℃的沸水中蒸煮3h,
巖藻多糖的制備方法
巖藻多糖是一種水溶性的多糖,多采用水提法、酸提法或CaCl2法從褐藻或海帶中提取出來;新近報道的提取方法還有超聲波提取法和超濾膜提取法等。水提法主要是利用巖藻多糖易溶于熱水、不溶于乙醇等有機溶劑的特點,得到巖藻多糖粗品,Wang等將100g的葉剪切后,放到3500mL、120℃的沸水中蒸煮3h,提取
制備肌動蛋白實驗
從肌肉制備丙酮粉用于純化肌動蛋白 由骨骼肌丙酮粉制備肌動蛋白 將肌動蛋白純化成純品 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 肌球蛋白
制備肌動蛋白實驗
實驗材料 肌球蛋白試劑、試劑盒 肌球蛋白抽提溶液儀器、耗材 離心機實驗步驟 1. 抽提肌球蛋白時得到的沉淀物用 3 倍于沉淀物體積的肌球蛋白抽提溶液抽提 10 分鐘。肌球蛋白抽提溶液:0.5 mol/L KCl0.1 mol/L K2HPO42. 抽提物離心(GSA 轉頭,13000 r/min,1
無蛋白血濾液制備實驗
無蛋白血濾液制備實驗可以用于:(1)蛋白質沉淀劑沉淀蛋白;(2)用過濾法或離心法除去沉淀的蛋白。實驗方法原理鎢酸法實驗原理:鎢酸鈉與硫酸混合,生成鎢酸,鎢酸可以與血液中蛋白質結合生成蛋白質鹽沉淀,經離心將蛋白質除掉。三氯醋酸法實驗原理:血液中蛋白質能與三氧醋酸作用于生成不溶性的蛋白質鹽沉淀,經離心將
無蛋白血濾液制備實驗
實驗方法原理 鎢酸法實驗原理:鎢酸鈉與硫酸混合,生成鎢酸,鎢酸可以與血液中蛋白質結合生成蛋白質鹽沉淀,經離心將蛋白質除掉。三氯醋酸法實驗原理:血液中蛋白質能與三氧醋酸作用于生成不溶性的蛋白質鹽沉淀,經離心將蛋白質除去,上清液為無蛋白血濾液.實驗步驟 一、鎢酸法實驗試劑:1. 100g/L鎢酸鈉溶液:
制備肌動蛋白實驗——從肌肉制備丙酮粉用于純化肌動蛋白
實驗材料肌球蛋白試劑、試劑盒肌球蛋白抽提溶液儀器、耗材離心機實驗步驟1. 抽提肌球蛋白時得到的沉淀物用 3 倍于沉淀物體積的肌球蛋白抽提溶液抽提 10 分鐘。肌球蛋白抽提溶液:0.5 mol/L KCl0.1 mol/L K2HPO42. 抽提物離心(GSA 轉頭,13000 r/min,17310
制備肌動蛋白實驗——由骨骼肌丙酮粉制備肌動蛋白
實驗材料骨骼肌丙酮粉試劑、試劑盒肌動蛋白解聚緩沖液儀器、耗材超速離心機實驗步驟1. 準備貯存液和材料0.1 mol/L K+ATP,pH 7.00.1 mol/L DTT(凍存在 -20℃,避免反復凍融)0.1 mol/L CaCl20.1 mol/L Tris-HCl,pH 8.0肌動蛋白解聚緩沖
制備和純化-mRNA-顯示蛋白實驗
實驗方法原理 實驗材料 DNA 庫不含甲硫氨酸的翻譯混合物試劑、試劑盒 MgCl2核苷三磷酸溶液轉錄緩沖液去離子超濾水T7 RNA 聚合酶固體 EDTA尿素緩沖液NaCl乙醇EDTAATPT4 多核苷酸激酶緩沖液T4 多核苷酸激酶T4 DNA 連接酶緩沖液T4 DNA 連接酶乙酸鉀溶液兔網織
制備和純化-mRNA-顯示蛋白實驗
實驗材料DNA 庫不含甲硫氨酸的翻譯混合物試劑、試劑盒MgCl2核苷三磷酸溶液轉錄緩沖液去離子超濾水T7 RNA 聚合酶固體 EDTA尿素緩沖液NaCl乙醇EDTAATPT4 多核苷酸激酶緩沖液T4 多核苷酸激酶T4 DNA 連接酶緩沖液T4 DNA 連接酶乙酸鉀溶液兔網織紅細胞裂解物翻譯試劑盒氯化
制備和純化-mRNA-顯示蛋白實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 DNA 庫 不含甲硫氨酸的翻譯混合物
關于膽色素的生成與轉運的介紹
體內鐵卟啉化合物包括血紅蛋白、肌紅蛋白、細胞色素、過氧化物酶等。正常人每天可生成250~350mg膽色素,其中80%以上來自衰老紅細胞在肝、脾、骨髓的單核-吞噬細胞系統破壞釋放出血紅蛋白。單核-吞噬細胞系統細胞微粒體含有非常活躍的血紅素加氧酶,在氧分子和NADPH存在下,血紅素加氧酶將血紅素轉化
簡述低分子質量巖藻多糖的制備
巖藻多糖分子質量大、溶解性差,不容易被吸收,嚴重限制了其應用,但經過部分水解轉化成低分子質量巖藻多糖(LMWF)后,溶液的黏度會降低,溶解性增加,生理功能變得多樣。常用于巖藻多糖降解的方法包括化學法和酶法。化學降解法是指將巖藻多糖配制成水溶液,加入硫酸、三氟乙酸、鹽酸等氧化劑后加熱降解得到低分子
低分子質量巖藻多糖的制備方法
巖藻多糖分子質量大、溶解性差,不容易被吸收,嚴重限制了其應用,但經過部分水解轉化成低分子質量巖藻多糖(LMWF)后,溶液的黏度會降低,溶解性增加,生理功能變得多樣。常用于巖藻多糖降解的方法包括化學法和酶法。化學降解法是指將巖藻多糖配制成水溶液,加入硫酸、三氟乙酸、鹽酸等氧化劑后加熱降解得到低分子質量
酪蛋白的制備
實驗方法原理 牛乳中主要的蛋白質是酪蛋白,含量約為35 g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物,等電點為4.7。利用等電點時溶解度最低的原理,將牛乳的pH調到4.7時,酪蛋白就沉淀出來。用乙醇洗滌沉淀物,除去脂類雜質后便可得到純的酪蛋白。實驗材料 牛乳試劑、試劑盒 乙醇 無水乙醚 醋酸 醋酸鈉 乙醇
散劑的制備實驗
示例法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 碳酸氫鈉 氧化鎂 試劑、試劑盒
橋粒的制備實驗
從牛舌或牛口鼻部分離橋粒 分級分離橋粒 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 牛口鼻部或舌頭
橋粒的制備實驗
從牛舌或牛口鼻部分離橋粒分級分離橋粒實驗材料牛口鼻部或舌頭 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒檸檬酸緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
血清制備實驗
實驗材料 血儀器、耗材 低溫離心機4℃冰箱試管–80℃低溫儲藏箱實驗步驟 1. 取血后,37℃下,讓血液凝固1 到2 小時(不加抗凝劑);2. 4℃冰箱過夜(讓血塊固縮);3. 當血清自然析出后, 4℃,3000 轉/分,離心10 分鐘,分離血清,棄去不溶物;4. 將血清移至一干凈試管,并分裝成小份
制備克隆實驗
試劑、試劑盒ATP-巰基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶連接緩沖液T4DNA 連接酶平末端插入物克隆載體培養基儀器、耗材FALCON 2059 多聚丙烯試管37°C 恒溫箱水浴箱實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑ATP(10 mmol/L)β-巰基乙醇(可選擇)IPTG(100 mmol/L
制備電泳實驗
洗脫 連續電泳 等電聚焦制備電泳 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 嚴格來說洗脫不能達到制備的目的,它只能得到微克到毫克級的樣品。通常是用其他方法分離的粗樣品
制備克隆實驗
試劑、試劑盒?ATP-巰基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶連接緩沖液T4DNA 連接酶平末端插入物克隆載體培養基儀器、耗材?FALCON 2059 多聚丙烯試管37°C 恒溫箱 水浴箱實驗步驟?一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑ATP(10 mmol/L)β-巰基乙醇(可選擇)IPTG(100 mm