轉運反應成分的制備實驗——胞質液的制備
實驗材料血試劑、試劑盒酸-檸檬酸鹽-葡萄糖溶液裂解緩沖液儀器、耗材離心機實驗步驟一、網狀細胞和紅細胞胞質液的制備1. 自動物身上采血，每 7 ml 血加 1 ml 酸-檸檬酸鹽-葡萄糖溶液（ACD；75 mmol/L 檸檬酸三鈉，38 mmol/L 檸檬酸，136 mmol/L 葡萄糖，pH 5.0)。2. 室溫 500 g 離心 10 分鐘收集網狀細胞和紅細胞。吸出血漿和白細胞層。3. 用 1~2 倍體積的 2% 明膠（Sigma) /PBS溶液（預熱至 37℃）懸浮細胞，37℃ 水浴靜置至少 30 分鐘。4. 吸出上層含血小板和白細胞部分，用 PBS 在 1600 g 離心清洗細胞，盡可能多的吸出上清。5. 加入 2 倍體積的裂解緩沖液裂解細胞，冰浴 20 分鐘。裂解緩沖液：0.75 mmol/L 乙酸鎂0.15 mmol/L EGTA3 mmol/L DTT蛋白酶抑制劑6. 裂解液用超速離心機，4℃，100000 g 離心......閱讀全文
轉運反應成分的制備實驗——胞質液的制備
實驗材料血試劑、試劑盒酸-檸檬酸鹽-葡萄糖溶液裂解緩沖液儀器、耗材離心機實驗步驟一、網狀細胞和紅細胞胞質液的制備1. 自動物身上采血，每 7 ml 血加 1 ml 酸-檸檬酸鹽-葡萄糖溶液（ACD；75 mmol/L 檸檬酸三鈉，38 mmol/L 檸檬酸，136 mmol/L 葡萄糖，pH 5.0
轉運反應成分的制備實驗——轉運反應
試劑、試劑盒磷酸肌酸肌酸磷酸激酶ATPGTP儀器、耗材微量離心管實驗步驟1. 將反應混合物加入一在冰上放置的微量離心管中。能量重建系統成分如下：5 mmol/L 磷酸肌酸20 單位/ml 肌酸磷酸激酶0.5 mmol/L ATP0.5 mmol/L GTP2. 滴一滴孵育混合物到一片位于帶蓋子的濕盒
轉運反應成分的制備實驗
制備藻膽色素蛋白標志物胞質液的制備細胞通透化轉運反應試劑、試劑盒APC 懸浮液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?HEPES ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
轉運反應成分的制備實驗
試劑、試劑盒 APC 懸浮液HEPESNaClSMCC儀器、耗材 微量離心管Sephadex G50 脫鹽柱實驗步驟 1. 在一微量離心管中，4℃，10000 g 離心 APC 懸浮液 5~10 分鐘，吸走上清。2. 用 0.1 mol/L HEPES（pH 7.4），0.1 mol/L NaCl
轉運反應成分的制備實驗
制備藻膽色素蛋白標志物 胞質液的制備 細胞通透化 轉運反應 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 APC 懸浮液
轉運反應成分的制備實驗——細胞通透化
實驗材料細胞試劑、試劑盒毛地黃皂苷轉運緩沖液實驗步驟1. 制備用于同透化的細胞(1) 對于在蓋玻片上生長的細胞① 將在標準條件下培養的細胞或從組織采集的原代細胞鋪在置于 6 孔培養板中的 18x18 mmol/L 的蓋玻片上，生長過夜。② 實驗前 2~4 小時，換新培養液，重新放回培養箱中。③ 吸出
轉運反應成分的制備實驗——制備藻膽色素蛋白標志物
試劑、試劑盒APC 懸浮液HEPESNaClSMCC儀器、耗材微量離心管Sephadex G50 脫鹽柱實驗步驟1. 在一微量離心管中，4℃，10000 g 離心 APC 懸浮液 5~10 分鐘，吸走上清。2. 用 0.1 mol/L HEPES（pH 7.4），0.1 mol/L NaCl 重懸浮
制備體外剪接反應用HeLa細胞核和胞質S100提取物實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 胞核提取物可以用于前體 mRNA 的剪接，S100 提取物中雖然包括許多剪接因子，但它不具有剪接活性，因為它只含有剪接所必需的部分 SR 蛋白，不過該提取物中補充一種或多種 SR 蛋白后就可以進行有效的剪接。
制備體外剪接反應用HeLa細胞核和胞質S100提取物實驗
實驗方法原理 胞核提取物可以用于前體 mRNA 的剪接，S100 提取物中雖然包括許多剪接因子，但它不具有剪接活性，因為它只含有剪接所必需的部分 SR 蛋白，不過該提取物中補充一種或多種 SR 蛋白后就可以進行有效的剪接。實驗材料 HeLa 細胞試劑、試劑盒 DTT苯甲基磺酰氟PBS緩沖液儀器、耗材
制備體外剪接反應用HeLa細胞核和胞質S100提取物實驗
胞核提取物可以用于前體 mRNA 的剪接，S100 提取物中雖然包括許多剪接因子，但它不具有剪接活性，因為它只含有剪接所必需的部分 SR 蛋白，不過該提取物中補充一種或多種 SR 蛋白后就可以進行有效的剪接。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方法原理胞核提取物可以用于前體 mRNA
MVA－病毒儲液制備實驗
基本方案 免疫染色法滴度測定 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 成片 CEF 或 BHK-
MVA－病毒儲液制備實驗
實驗材料成片 CEF 或 BHK-21 細胞改造的痘苗病毒試劑、試劑盒MEM-10 和 MEM-2.5 完全培養基儀器、耗材150 cm2 組織培養瓶CO2培養箱Sorvall 離心機250 ml 無菌離心瓶實驗步驟1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml 的維持培養基消化 7 瓶
MVA－病毒儲液制備實驗
實驗方法原理 實驗材料 成片 CEF 或 BHK-21 細胞改造的痘苗病毒試劑、試劑盒 MEM-10 和 MEM-2.5 完全培養基儀器、耗材 150 cm2 組織培養瓶CO2培養箱Sorvall 離心機250 ml 無菌離心瓶實驗步驟 1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml
桿狀病毒儲液制備實驗——從懸浮培養中制備
實驗材料懸浮培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒（野生型的或重組）試劑、試劑盒含10％胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材150 mm 培養瓶27℃ 培養箱倒置顯微鏡帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐500 ml 旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺實驗步驟1
桿狀病毒儲液制備實驗——從單層培養中制備
實驗材料單層培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒（野生型的或重組）試劑、試劑盒含10％胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材150 mm 培養瓶27℃ 培養箱倒置顯微鏡帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐500 ml 旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺實驗步驟1
桿狀病毒儲液制備實驗
實驗方法原理 實驗材料 懸浮培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒（野生型的或重組）試劑、試劑盒 含10％胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材 150 mm 培養瓶 27℃ 培養箱 倒置顯微鏡 帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機 帶螺口蓋的凍存管 液氮罐 500 ml 旋轉細
桿狀病毒儲液制備實驗
基本方案 從懸浮培養中制備 基本方案 從單層培養中制備 噬斑試驗測定滴度 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料
橋粒的制備實驗
從牛舌或牛口鼻部分離橋粒分級分離橋粒實驗材料牛口鼻部或舌頭 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒檸檬酸緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
橋粒的制備實驗
從牛舌或牛口鼻部分離橋粒 分級分離橋粒 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 牛口鼻部或舌頭
散劑的制備實驗
示例法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 碳酸氫鈉 氧化鎂 試劑、試劑盒
細胞裂解液的制備
一、試劑準備1、新鮮配制冷的 RIPA 裂解緩沖液:? ?? ?150 mM NaCL? ?? ?1% NP-40 (去垢劑)? ??? ?? ?0.1% SDS (去垢劑)? ?? ?2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制劑) (使用前加入)? ?? ?2ug/ml Leupeptin (
細菌細胞的制備實驗實驗——細胞抽提物的制備
實驗材料細胞試劑、試劑盒弗氏破碎緩沖液勻漿緩沖液儀器、耗材弗氏破碎器實驗步驟1. 將 5~10 g 新鮮或凍存的細胞沉淀物垂懸于弗氏破碎緩沖液中或者適當的勻漿緩沖液中。通常 4L 的大腸桿菌培養物可以獲得大約 7.5 g 的細胞沉淀。2. 懸液中加入無 RNase 的 DNase 至終濃度為 2 μ
什么是制備與半制備液相
制備與半制備主要是指待制備樣品的量來區別，1克以上是制備級別，100毫克到1克之間是半制備級別
鹽的制備反應舉例
鹽可以通過化學反應而制備，包括有：鹽基與酸，例如NH3+HCl→NH4Cl金屬與酸，例如Mg+H2SO4→MgSO4+H2金屬與非金屬，例如Ca+Cl2→CaCl2堿與酸性氧化物，例如2NaOH+Cl2O→ 2NaClO+H2O酸與堿性氧化物，例如2HNO3+Na2O→ 2NaNO3+H2O鹽也可以
湯劑、中藥合劑及口服液的制備實驗
煎煮法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 桂枝 杏仁 甘草 試
桿狀病毒毒種貯液的制備實驗
桿狀病毒是一類具有囊膜包裹的雙鏈環狀DNA病毒，其基因組大小為80~180 kb，在自然界中以節肢動物作為專一性宿主進行感染和傳播。實驗材料桿狀病毒試劑、試劑盒胎牛血清重組病毒儀器、耗材培養箱培養瓶轉子實驗步驟從單層培養中制備：?1a. ?以毎瓶1.8×107?Sf9細胞的密度，將細胞接種于兩個15
細菌細胞的制備實驗實驗
細胞抽提物的制備 核糖體及多核糖體的分離 70S核糖體的純化 多核糖體的純化 將核糖體解離為大亞基和小亞基 ? ? ? ? ? ? 實驗材料
細菌細胞的制備實驗實驗
細胞抽提物的制備核糖體及多核糖體的分離70S核糖體的純化多核糖體的純化將核糖體解離為大亞基和小亞基實驗材料細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒弗氏破碎緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
細菌細胞的制備實驗實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 弗氏破碎緩沖液勻漿緩沖液儀器、耗材 弗氏破碎器實驗步驟 1. 將 5~10 g 新鮮或凍存的細胞沉淀物垂懸于弗氏破碎緩沖液中或者適當的勻漿緩沖液中。通常 4L 的大腸桿菌培養物可以獲得大約 7.5 g 的細胞沉淀。2. 懸液中加入無 RNase 的 DNase 至終濃度為
質粒DNA的小量制備實驗——煮沸小量制備法
實驗方法原理當菌體在NaOH和?SDS溶液中裂解時，蛋白質與DNA發生變性，當加入中和液后，質粒DNA分子能夠迅速復性，呈溶解狀態，離心時留在上清中；蛋白質與染色體DNA不變性而呈絮狀，離心時可沉淀下來。推薦采用本方案從1-24個菌落培養液中制備少量的質粒DNA，盡管該方案十分快捷，但制備的DNA的