流式細胞術應用|囊泡檢測步驟詳解
實驗簡介囊泡天然存在于體液中,并穩定攜帶了一些重要的信號分子。囊泡相關功能的研究已經成為研究熱點,并有望在多種疾病的早期診斷中發揮作用。通常因流式細胞儀無法檢測低于 250nm 的顆粒,因而并不是檢測囊泡微顆粒的最佳選擇。而貝克曼庫爾特公司 CytoFLEX 流式細胞儀的問世,為流式檢測囊泡微顆粒開辟了蹊徑。 CytoFLEX 是第一臺可檢測 100 nm 微顆粒的流式細胞儀,并具有可同時檢測 13 色熒光、單個樣本存儲量大等 優秀性能,為微顆粒的檢測提供了理想的檢測平臺。材料與方法? 試劑? 樣品制備Sample Type全血Species小鼠Age of specimen新鮮Prep Method1. 取新鮮的小鼠全血,加入檸檬酸鈉抗凝劑。用離心機 2500 xg 離心 15 min,將上清液倒掉;2. 畫 FSC/VSSC 散點圖,用 Megamix-Plus FSC beads(100, 160, 2......閱讀全文
流式細胞術應用-|-囊泡檢測步驟詳解
實驗簡介囊泡天然存在于體液中,并穩定攜帶了一些重要的信號分子。囊泡相關功能的研究已經成為研究熱點,并有望在多種疾病的早期診斷中發揮作用。通常因流式細胞儀無法檢測低于 250nm 的顆粒,因而并不是檢測囊泡微顆粒的最佳選擇。而貝克曼庫爾特公司 CytoFLEX 流式細胞儀的問世,為流式檢測囊泡微顆粒開
流式細胞術原理與應用詳解
研究實驗中,我們常常用到一個高大上的儀器――流式細胞儀,而與之相對應的就是流式細胞術,可是大家對它們都了解多少呢?今天小編就帶著大家好好地認識一下~流式細胞術流式細胞術(flow cytometry,FCM)是利用流式細胞儀對于處在快速直線流動狀態中的細胞或生物顆粒同時進行多參數、快速定量分析和分選
【干貨】流式細胞術原理與應用詳解
研究實驗中,我們常常用到一個高大上的儀器――流式細胞儀,而與之相對應的就是流式細胞術,可是大家對它們都了解多少呢?今天小編就帶著大家好好地認識一下~ 流式細胞術 流式細胞術(flow cytometry,FCM)是利用流式細胞儀對于處在快速直線流動狀態中的細胞或生物顆粒同時進行多參數
使用CytoFLEX流式細胞儀檢測囊泡/外泌體
囊泡/外泌體天然存在于體液中,并穩定攜帶了一些重要的信號分子。囊泡/外泌體相關功能的研究已經成為研究熱點,并有望在多種疾病的早期診斷中發揮作用。通常,因流式細胞儀無法檢測低于 250nm 的顆粒,因而并不是檢測囊泡/外泌體微顆粒的最佳選擇。而貝克曼庫爾特公司的 CytoFLEX 流式細胞儀的問世,為
流式細胞術的步驟
流式細胞儀的操作和使用 ①打開電源,對系統進行預熱; ②打開氣體閾,調節 壓力,獲得適宜的液流速度;開啟光源冷卻系統; ③在樣品管中加入去離子水,沖洗液流的噴嘴系統; ④利用校準標準樣品,調整儀器,使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調定的基礎上,0和90散射的熒光強度最
流式細胞術實驗步驟
流式細胞術實驗:1、制備細胞懸液,計數2、分裝,按照每個EP(1.5ml)管1-2*10 6個細胞分裝,3500rpm,4度離心。3、用100ulPBS重懸,加入10ul大鼠血清封閉,4度避光30min。4、加入相應的熒光標記的抗體,混勻,避光,4度孵育30min。5、加入1mlPBS洗兩遍。6、用
細胞外囊泡的檢測方法
外泌體具有磷脂雙分子膜結構,導致其沉降系數和蛋白質聚集體有著很大的不同。而且外泌體膜表面存在特異性膜蛋白如CD9和CD81,前者被證實和腫瘤遷移有關,后者與丙型肝炎病毒的侵染有關。而因為外泌體具有這些顯著的易分離的特點,我們可以通過密度梯度離心,親和層析等方法對外泌體進行分離和純化。細胞外囊泡的檢測
流式細胞術檢測細胞的應用介紹
流式細胞術檢測細胞的結果在以下眾多研究領域都有廣泛應用:免疫學:分析免疫細胞的表型,如 T 細胞、B 細胞、NK 細胞等表面標志物的表達,評估免疫細胞的活化狀態和分化階段。檢測細胞因子的分泌,研究免疫細胞的功能。進行免疫細胞的分選,用于后續的功能研究或細胞治療。腫瘤學:腫瘤細胞的鑒定和分型,檢測腫瘤
流式細胞術應用-|-輕松檢測植物倍體
實驗簡介植物的基因組大小及?DNA?倍性和植物的品系、性狀及營養和藥用價值有密切聯系。檢測植物的基因組大小和 DNA 倍性在植物的鑒定、雜交育種等領域有重要意義。流式細胞儀可在半小時內完成從樣本制備染色、植物基因組大小和 DNA 倍性測定全過程,以其方便快捷得到廣泛應用。CytoFLEX 流式細胞儀
流式細胞術應用-|-輕松檢測植物倍體
實驗簡介植物的基因組大小及 DNA 倍性和植物的品系、性狀及營養和藥用價值有密切聯系。檢測植物的基因組大小和 DNA 倍性在植物的鑒定、雜交育種等領域有重要意義。流式細胞儀可在半小時內完成從樣本制備染色、植物基因組大小和 DNA 倍性測定全過程,以其方便快捷得到廣泛應用。CytoFLEX 流式細
流式細胞術在環境檢測中的應用
隨著流式細胞術的發展,流式細胞儀越來越多的使用在環境相關的研究及檢測中。相對于傳統的平板法與顯微計數法,流式細胞術具有快速、靈敏、精確并能進行多參數分析的特點,且在后期使用成本上具有一定的優勢。自 1993 年流式細胞儀首次運用于活性污泥中微生物群落結構分析以來,該技術逐漸成為空氣、土壤、水等環境中
流式細胞術實驗步驟是什么
流式細胞術實驗:1、制備細胞懸液,計數2、分裝,按照每個EP(1.5ml)管1-2*10 6個細胞分裝,3500rpm,4度離心。3、用100ulPBS重懸,加入10ul大鼠血清封閉,4度避光30min。4、加入相應的熒光標記的抗體,混勻,避光,4度孵育30min。5、加入1mlPBS洗兩遍。6、用
流式細胞術的應用
(一)流式細胞術在細胞生物學中的應用流式細胞術最早被應用于生物學研究領域,就是生物細胞周期和動力學的分析。近年來,DNA倍體分析已經越來越廣泛應用于臨床和基礎研究,發揮越來越重要的作用。1. 有利于腫瘤的早期診斷和鑒別診斷 良性腫瘤或良性增生時不會出現非整倍體細胞(DI>1),而惡性腫瘤則伴有相當數
流式細胞術的應用范圍
隨著對FCM研究的日益深入,其價值已經從科學研究走入了臨床應用階段,在我國臨床醫學領域里已有著廣泛的應用。可用于白血病的分型、腫瘤細胞染色體的異倍性測定,以及免疫學研究,并已開始用于細菌鑒定,病毒感染細胞的識別和艾滋病感染者T4、T8細胞的記數。 自70年代以來,隨著流式細胞技術水平的不斷提高
流式細胞術的臨床應用
流式細胞術(flow cytometry,FCM)是一種能夠對單個細胞或生物微顆粒的生物學性質進行定量分析和分選的檢測手段,具有快速、高精度、高準確性、多參數和高通量等優點,是目前先進的細胞定量分析技術之一。FCM能夠快速分析單個細胞或粒子的多種特性,既可以定性,也可以定量,尤其適用于大量樣品檢
流式細胞術的應用特點
應用特點是通過快速測定庫爾特電阻、熒光、光散射和光吸收來定量測定細胞 DNA含量、細胞體積、蛋白質含量、酶活性、細胞膜受體和表面抗原等許多重要參數。根據這些參數將不同性質的細胞分開,以獲得供生物學和醫學研究用的純細胞群體。
流式細胞術的應用介紹
流式細胞術在很多領域中都有應用,包括分子生物學、病理學、免疫學、植物學、和海洋生物學等[11]。在分子生物學中,它主要用于熒光標記的抗體。特異性的抗體與靶細胞上的抗原結合,能夠通過流式細胞儀研究這些細胞的特別信息。這在醫學中具有很廣泛的應用,尤其是在器官移植、血液學、腫瘤免疫學和化療、遺傳學、精子分
納米級流式細胞儀在細胞外泌體、微囊泡研究中的應用
外泌體是一種納米級囊泡,幾乎所有類型的細胞,包括癌細胞都可以釋放外泌體。作為細胞間通訊的重要介質,外泌體介導了蛋白質和遺傳物質的交換,越來越多的證據表明,宿主細胞或癌細胞分泌的外泌體參與了腫瘤發生,生長,侵襲和轉移。并且免疫細胞和癌細胞自身通過外泌體進行通訊在調節腫瘤免疫中發揮了雙重作用。近年來的研
什么是流式細胞術檢測
又稱熒光激活細胞分選法,一種細胞分選或分析技術。即以熒光素標記抗體結合相應細胞,用激光束激發單行流動的細胞,根據細胞所攜帶熒光(強度或類別)進行分選或分析。
流式細胞術檢測細胞凋亡
實驗概要Provides a rapid and convenient assay for apoptosis.?實驗原理Apoptosis ?is a carefully regulated process of cell death that occurs as a normal ?part o
什么是流式細胞術檢測
又稱熒光激活細胞分選法,一種細胞分選或分析技術。即以熒光素標記抗體結合相應細胞,用激光束激發單行流動的細胞,根據細胞所攜帶熒光(強度或類別)進行分選或分析。
流式細胞術的檢測原理
流式細胞術的檢測原理主要基于以下幾個方面:液流系統:細胞樣本被制成單細胞懸液,通過一定壓力被注入流動室,在鞘液的包裹下,細胞排成單列,逐個快速通過激光檢測區。光學系統:通常使用氬離子激光器或其他類型的激光器作為光源。激光照射到細胞后,會產生散射光和熒光。前向散射光(FSC):與細胞的大小有關,反映細
使用流式細胞儀檢測病毒
流式細胞術是一種通常用于從混合樣品中識別和分離特定細胞的技術。這種技術可以應用于大量的樣品篩選,這對于進一步的統計分析是非常理想的。流式細胞儀已用于檢測病毒,該技術被人們稱為“流式病毒儀”。 此外,流式細胞術已被用于根據感染性的不同對病毒顆粒進行分類,以及檢測被病毒感染的細胞。 “流式病毒分
使用流式細胞儀檢測病毒
流式細胞術是一種通常用于從混合樣品中識別和分離特定細胞的技術。這種技術可以應用于大量的樣品篩選,這對于進一步的統計分析是非常理想的。流式細胞儀已用于檢測病毒,該技術被人們稱為“流式病毒儀”。 此外,流式細胞術已被用于根據感染性的不同對病毒顆粒進行分類,以及檢測被病毒感染的細胞。 “流式病毒
球囊擴張術的操作步驟和注意事項
1)麻醉:主氣管病變、狹窄嚴重擴張時間長的患者選擇全麻;病變位于主支氣管但對側肺功能差,局麻下恐不能完成擴張操作,建議進行全麻。 2)選擇恰當的球囊導管:了解正常氣管和支氣管的直徑和長度:氣管直徑16-20mm,長度10-325px;右主支氣管直徑12-15mm,長度1-50px;右中間段支氣
簡述晶狀體囊切開術的手術步驟
1. 晶狀體前囊切開術 聚焦于瞳孔緣內1mm的前囊膜上,依次按同心圓排列,以小能量單脈沖擊射,總計約100~200個小切口。如果皮質透明,可先聚焦于前囊膜下擊射,以產生的小氣泡以作標志,如皮質混濁,則可直接聚焦于前囊膜。 激光前囊膜切開術一般在白內障摘除手術前2~24h施行。時間過短,皮質尚
簡介流式細胞術的應用范圍
隨著對FCM研究的日益深入,其價值已經從科學研究走入了臨床應用階段,在我國臨床醫學領域里已有著廣泛的應用。可用于白血病的分型、腫瘤細胞染色體的異倍性測定,以及免疫學研究,并已開始用于細菌鑒定,病毒感染細胞的識別和艾滋病感染者T4、T8細胞的記數。 自70年代以來,隨著流式細胞技術水平的不斷提高
簡介流式細胞術的臨床應用
FCM通過熒光抗原抗體檢測技術對細胞表面抗原分析,進行細胞分類和亞群分析。這一技術對于人體細胞免疫功能的評估以及各種血液病及腫瘤的診斷和治療有重要作用。有大量文章介紹了淋巴細胞亞群等在各種疾病中的變化。正常人群淋巴細胞T4/T8比值大約為2∶1,但在人體細胞免疫力低下時可出現比例倒置。用FCM還
細胞外囊泡(細胞微粒、外泌體)檢測(二)
(2)ZL的折射率校正功能利用流式細胞儀進行細胞外囊泡檢測往往需要使用標準微球(microspheres)來校正和設門(Set Gate),常用的微球材料有聚苯乙烯(Polystyrene)和二氧化硅(silica),國際血栓與止血協會和標準化委員會(ISTH SSC)推薦用于循環微粒(微囊
細胞外囊泡(細胞微粒、外泌體)檢測(一)
細胞外囊泡細胞外囊泡(Extracellular Vesicles, EVs)是指從細胞膜上脫落或者由細胞分泌的雙層膜結構的囊泡狀小體,直徑從40nm到1000nm不等。胞外囊泡主要由微囊泡(Microvesicles,? MVs)和外泌體(Exosomes, Exs)組成,微囊泡是細胞激活