血細胞分離技術(二)
(二)操作方法1.取抗凝血,自然沉降,如是馬屬動物的血液,可直接直立試管架上,讓其自然沉降1h,取上層血漿。如是牛、羊血液,由于其血沉速度非常慢,可加等量3%明膠液,混勻后讓其自然沉降,1h后取上層血漿。2.2 000r/min離心10min,棄上清。3.沉淀用Hank’s液混懸后,再2 000r/min離心10min。4.重復步驟3一次,再用細胞營養液將白細胞制成懸液。此液含有整個白細胞群,包括粒細胞、淋巴細胞、單核細胞和部分紅細胞。可供白細胞計數用。5.取2ml細胞分層液于離心管內,同時用毛細吸管吸取約2ml的血漿(自然沉降1h的上層血漿)輕輕加入分層液上,直接加抗凝血也可。6.以水平轉子離心機2 000r/min離心20min。離心后,可見分成多層,最下層是紅細胞,中間層是分層液,最上層是血漿。在血漿層與分層液之間是一薄層較致密的白色層,即為單個核細胞層。7.用毛細吸管插入到單個核細胞層并吸取該層,放入另一試管中。8.以H......閱讀全文
血細胞分離技術
實驗概要血細胞是免疫學研究或臨床檢驗常用的檢測對象或試驗材料,分離和純化血細胞是實驗室中的基本技術。目前分離血細胞的技術大多是根據各種細胞群特有的大小、沉降率、粘附性和吞噬能力等設計而成。實驗原理外周血液中的紅細胞與白細胞的比例在幾百甚至上千比一,兩類細胞的大小和密度不同,其沉降速度也就不同,紅細胞
血細胞分離技術
采血 (一)材料與試劑 1.抗凝劑 (1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其鈉鹽或鉀鹽,它能阻止凝血酶原轉化為凝血酶,進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白,從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1 000U/ml,市售肝素多為100U~126U/mg。 (2)乙二胺四乙酸(EDTA):是
血細胞分離技術(一)
采血 ? (一)材料與試劑1.抗凝劑(1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其鈉鹽或鉀鹽,它能阻止凝血酶原轉化為凝血酶,進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白,從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1 000U/ml,市售肝素多為100U~126U/mg。(2)乙二胺四乙酸(EDTA):是一種螯合劑。用生理
血細胞分離技術(二)
(二)操作方法1.取抗凝血,自然沉降,如是馬屬動物的血液,可直接直立試管架上,讓其自然沉降1h,取上層血漿。如是牛、羊血液,由于其血沉速度非常慢,可加等量3%明膠液,混勻后讓其自然沉降,1h后取上層血漿。2.2 000r/min離心10min,棄上清。3.沉淀用Hank’s液混懸后,再2 000r/
血細胞的分離實驗技術
采血??(一)材料與試劑?1.抗凝劑(1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其鈉鹽或鉀鹽,它能阻止凝血酶原轉化為凝血酶,進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白,從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1 000U/ml,市售肝素多為100U~126U/mg。(2)乙二胺四乙酸(EDTA):是一種螯合劑。用生理
血細胞的分離方法2
4、從3中所獲得的中性粒細胞進行純化 ? 1)因為方法3只能獲得80-85%純度的中性粒細胞,可以把方法2與方法3聯合對中性粒細胞進行純化。 2)收集從方法3 dextran沉降所得到的富含白細胞的血漿,275g*6min,離心。 3)管底
血細胞的分離方法1
血細胞由紅細胞,白細胞,血小板等組成.實驗中常用白細胞來做研究,如炎癥滲出,細胞遷移,識別等都涉及到白細胞.白細胞又分為:粒細胞,淋巴細胞,單核細胞等.它們具有不同的功能.實驗中常需要分離血細胞方能進行。這里主要論述人外周白細胞的分離,主要是中性粒細胞(Neutrophil),淋巴細胞(Lympho
血細胞的離心分離
在現代臨床醫學研究中,常常需要將全血中單核白細胞(淋巴細胞、大單核細胞)與紅細胞和多形核白細胞分離。在臨床治療應用中常常需要將全血作成分分離(全血分離成血漿,血小板,白細胞,紅細胞等等)(一)血細胞的實驗室純化:血液中存在著各種不同類型的血細胞,每種類型細胞有不同的特點和功能。醫學研究常常需要較純的
什么是血細胞分離機?
血細胞分離機是通過對全血進行處理,根據不同血液成分的密度、粘度等指標不同的特性將全血進行不同血液成分的分離,以便于根據需要采集其中部分血液成分的一種醫療器械。
血細胞分離機臨床應用
血細胞分離機可以進行的血液成份單采及相關治療項目1. ELP-延長血小板壽命的單采程序該程序可以從正常供者體內分離出兩份滿足臨床需要的濃縮血小板制品, 同時可以附 帶收集 200ml-400ml 血漿。有效采集時間約 60-100 分鐘/次。COBE 公司所提供的每一套 管道均帶有兩個可保存 150
血細胞分離機有哪些種類
按血細胞分離機的分離技術原理不同可以分為三大類:離心式、濾膜式和吸附式。
血細胞分離機應用范圍介紹
1. 血小板/血漿采集:原發性血小板增多癥患者單采血小板后配合化療可使病情緩解快,持續時間長。2. 干細胞采集:外周血干細胞移植治療惡性腫瘤如慢性粒細胞白血病、急性白血病,多發性骨髓瘤。3. 淋巴細胞單采:淋巴細胞單采主要用于急慢性淋巴細胞性白血病的治療和惡性腫瘤患者。4. 粒細胞單采:急慢性白血病
血細胞分離培養方法和步驟2
收集渾濁帶分離獲得的淋巴細胞,用無鈣、鎂離子的PBS洗3次后,再用培養基洗1次后計數,分瓶培養。此法分離獲得淋巴細胞純度高。分離液的制備:9% Ficoll(20℃下相對密度約1.020)24份與33.4%泛影葡胺(用泛影鈉或Conray400也可,在20℃下相對密度約1.200)10份混合后,
取走血漿的血細胞怎么分離pbmc
我用一種叫buffycoat的東西分離PBMC,應該就是你說的取走血漿的血細胞了。看上去就非常的稠,靜置一會就會分層,上層是淡黃色的,感覺像是血細胞,下層還是深紅色。我的方法是用這種液體稀釋四倍后鋪在ficoll上梯度離心,和全血一樣。鋪的時候沒有全血好鋪,感覺很容易和ficoll混起來,不像全血是
血細胞分離技術的操作程序
(一)材料與試劑 1.抗凝劑 (1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其鈉鹽或鉀鹽,它能阻止凝血酶原轉化為凝血酶,進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白,從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1 000U/ml,市售肝素多為100U~126U/mg。 (2)乙二胺四乙酸(EDTA):是
血細胞分離培養方法和步驟1
以前認為紅細胞、粒細胞、淋巴細胞、巨噬細胞等血細胞都屬終末分化細胞,很難在體外培養生長或僅能短期培養而不能傳代,近年來由于細胞培養技術的發展,已有血細胞培養成功的報道,正常血細胞在體外培養生長時間短,只有白血病細胞,血友病細胞、淋巴瘤細胞可培養成功并建立細胞系,但多半為EB病毒等致瘤病毒引起的轉化細
血細胞分離機的發展歷程
1877年瑞典卡爾博士最早發明離心分離技術,隨后廣泛地應用于手動奶油分離技術中。現代血液離心分離采集技術源于1914年美國Johns Hopkins醫學院的研究小組。兩次世界大戰期間血液離心、分離、儲存技術得到了很大的發展。20世紀50年代初,Dr Cohn開發出第一臺封閉式的血液分離機,首次把重力
血細胞分離機的應用領域
1. 血小板/血漿采集:原發性血小板增多癥患者單采血小板后配合化療可使病情緩解快,持續時間長。2. 干細胞采集:外周血干細胞移植治療惡性腫瘤如慢性粒細胞白血病、急性白血病,多發性骨髓瘤。3. 淋巴細胞單采:淋巴細胞單采主要用于急慢性淋巴細胞性白血病的治療和惡性腫瘤患者。4. 粒細胞單采:急慢性白血病
血細胞分離技術之大容量離心機
???????血細胞分離技術大容量離心機采血??(一)材料與試劑1.抗凝劑(1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其鈉鹽或鉀鹽,它能阻止凝血酶原轉化為凝血酶,進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白,從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1 000U/ml,市售肝素多為100U~126U/mg。(2)乙二胺四
血細胞分離機按原理如何劃分?
按血細胞分離機的分離技術原理不同可以分為三大類:離心式、濾膜式和吸附式。
關于濾膜式血細胞分離機的簡介
濾膜式血細胞分離機在臨床上的適用范圍小。其功能單一,主要用于患者血漿置換或者供者血漿/血小板的采集,不具有離心式血細胞分離機的多種功能和用途。其工作原理是利用濾膜的分子篩特性,將血漿或者顆粒大小不等的血小板與其他血細胞成分(紅細胞、白細胞、粒細胞等)分離。
關于血細胞分離機的應用范圍介紹
1. 血細胞分離機的應用范圍— 血小板/血漿采集:原發性血小板增多癥患者單采血小板后配合化療可使病情緩解快,持續時間長。 2. 血細胞分離機的應用范圍—?干細胞采集:外周血干細胞移植治療惡性腫瘤如慢性粒細胞白血病、急性白血病,多發性骨髓瘤。 3. 血細胞分離機的應用范圍—?淋巴細胞單采:淋巴
離心式血細胞分離機工作原理
離心式血細胞分離機的基本原理是通過特制的封閉管路,使供血者的部分全血通過血細胞分離機進行體外循環,分離機根據全血中各種血液成份的比重不同,經離心力的作用將各血液成份分層、分離,然后通過電腦控制的管路系統,使不同的血液成份進入不同的通道,將需要采集的血細胞收集于產品袋,而將不需要的成份回輸給獻血者。
大容量離心機分離血細胞的技術
(一)材料與試劑 1.抗凝劑 (1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其鈉鹽或鉀鹽,它能阻止凝血酶原轉化為凝血酶,進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白,從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1 000U/ml,市售肝素多為100U~126U/mg。 (2)乙二胺四乙酸(EDTA):是
操作血細胞分離機的注意事項
1. 采血前應將采血過程中可能出現的一些不良反應告知患者和獻血者。2. 由于采血時間比較長,需保證電源穩定,及采血者舒適體位。3. 血液采集必須保證無菌,預防感染及血液成分被污染。4. 隨時監測采血者的生命體征,發生緊急情況隨時處理。5. 當獻血者有輕微口唇麻木,應及時讓獻血者口服葡萄糖酸鈣解除。6
關于血細胞分離機的基本信息介紹
血細胞分離機是通過對全血進行處理,根據不同血液成分的密度、粘度等指標不同的特性將全血進行不同血液成分的分離,以便于根據需要采集其中部分血液成分的一種醫療器械。 1877年瑞典卡爾博士最早發明離心分離技術,隨后廣泛地應用于手動奶油分離技術中。 現代血液離心分離采集技術源于1914年美國John
關于離心式血細胞分離機的簡介
離心式血細胞分離機的應用最為廣泛,按照血流方式的不同可以分為間斷流動式離心機(Intermittent flow centrifuge, IFC)和連續流動式離心機(Continuous flow centrifuge, CFC)。 間斷流動式血細胞分離機工作時,在泵的抽取和驅動下血液從靜脈血
簡述離心式血細胞分離機工作原理
離心式血細胞分離機的基本原理是通過特制的封閉管路,使供血者的部分全血通過血細胞分離機進行體外循環,分離機根據全血中各種血液成份的比重不同,經離心力的作用將各血液成份分層、分離,然后通過電腦控制的管路系統,使不同的血液成份進入不同的通道,將需要采集的血細胞收集于產品袋,而將不需要的成份回輸給獻血者
大容量離心機分離血細胞的技術(一)
(一)材料與試劑1.抗凝劑(1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其鈉鹽或鉀鹽,它能阻止凝血酶原轉化為凝血酶,進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白,從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1 000U/ml,市售肝素多為100U~126U/mg。(2)乙二胺四乙酸(EDTA):是一種螯合劑。用生理鹽水配制成
大容量離心機分離血細胞的技術(二)
(2)泛影葡胺—右旋糖酐(dextran)液? 34%泛影葡胺液10份??? 60%右旋糖酐液12.5份混合,即為比重1.07~1.09的分層液。分裝于棕色瓶中,4℃冰箱保存備用。2.3%的明膠液稱取明膠3g,溶于0.9%的滅菌生理鹽水,終體積100ml,114.3℃高壓滅菌10min,冷卻后4