用甲酰胺從大規模培養物中提取λ噬菌體DNA實驗
實驗方法原理 可用甲酰胺代替 SDS/蛋白酶 K 將純化的噬菌體顆粒去除外殼。這種方法雖然不是很有效，但在某種意義上它比以前的操作方法更快。實驗材料 限制性內切核酸酶λ 噬菌體顆粒試劑、試劑盒 EDTA乙醇甲酰胺NaClTETris-Cl儀器、耗材 瓊脂糖凝膠硼硅酸鹽巴斯德吸管實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液EDTA ( 0.5 mol/L，pH 8.0)乙醇甲酰胺，去離子NaCl ( 5 mol/L)TE ( pH 7.6 和 pH 8.0)Tris-Cl ( 2 mol/L，pH 8.5)2. 酶和緩沖液限制性內切核酸酶3. 凝膠瓊脂糖凝膠（0.7%)，用 0.5X TBE，含 0.5 μg/ml 溴化乙錠4. 專用設備硼硅酸鹽巴斯德吸管（密封）或 Shepherd 鉤5. 載體和菌株λ 噬菌體顆粒二、方法1. 如果必要，按方案 11 步驟 1~4 所述將 CsCl 從噬菌體顆粒樣品中除去。2. 測定噬菌體顆粒樣品的體積......閱讀全文
用甲酰胺從大規模培養物中提取λ噬菌體DNA實驗
實驗方法原理 可用甲酰胺代替 SDS/蛋白酶 K 將純化的噬菌體顆粒去除外殼。這種方法雖然不是很有效，但在某種意義上它比以前的操作方法更快。實驗材料 限制性內切核酸酶λ 噬菌體顆粒試劑、試劑盒 EDTA乙醇甲酰胺NaClTETris-Cl儀器、耗材 瓊脂糖凝膠硼硅酸鹽巴斯德吸管實驗步驟 一、材料1.
用甲酰胺從大規模培養物中提取λ噬菌體DNA實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 可用甲酰胺代替 SDS/蛋白酶 K 將純化的噬菌體顆粒去除外殼。這種方法雖然不是很有效，但在某種意義上它比以前的操作方法更快。 實驗材料 限
用甲酰胺從大規模培養物中提取λ噬菌體DNA實驗
可用甲酰胺代替 SDS/蛋白酶 K 將純化的噬菌體顆粒去除外殼。這種方法雖然不是很有效，但在某種意義上它比以前的操作方法更快。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理可用甲酰胺代替 SDS/蛋白酶 K 將純化的噬菌體顆粒去除外殼。這種方法雖然不是很有效，但在某種意義上它比以前的操
用蛋白酶K和SDS從大規模培養物中提取λ噬菌體DNA實驗
實驗方法原理 通過一種有效的蛋白酶（如蛋白酶 K ) 的消化作用及隨后的酚：氯仿抽提，就能從大規模制備的 λ 噬菌體中很好地分離到 DNA。該方法也適用于小量（50~100 ml ) 制備物。實驗材料 蛋白酶 K限制性內切核酸酶λ 噬菌體顆粒試劑、試劑盒 氯仿透析緩沖液EDTA乙醇酚酚：氯仿SDS乙
用蛋白酶K和SDS從大規模培養物中提取λ噬菌體DNA實驗
通過一種有效的蛋白酶（如蛋白酶 K ) 的消化作用及隨后的酚：氯仿抽提，就能從大規模制備的 λ 噬菌體中很好地分離到 DNA。該方法也適用于小量（50~100 ml ) 制備物。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理通過一種有效的蛋白酶（如蛋白酶 K ) 的消化作用及隨后的酚：
用蛋白酶K和SDS從大規模培養物中提取λ噬菌體
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過一種有效的蛋白酶（如蛋白酶 K ) 的消化作用及隨后的酚：氯仿抽提，就能從大規模制備的 λ 噬菌體中很好地分離到 DNA。該方法也適用于小量（50~100 ml ) 制備物。
λ噬菌體分離物的快速分析(從液體培養物中純化λDNA)實驗
如本方案所述，λ 噬菌體 DNA 可很容易地從液體培養物中純化出來。而前一個方案則闡述了從平板裂解物中純化 λ 噬菌體 DNA 的方法。一般來說，λ 噬菌體在液體培養物中的生長不如平板裂解物中的。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理如本方案所述，λ 噬菌體 DNA 可很容易地
λ噬菌體分離物的快速分析(從液體培養物中純化λDNA)實驗
實驗方法原理 如本方案所述，λ 噬菌體 DNA 可很容易地從液體培養物中純化出來。而前一個方案則闡述了從平板裂解物中純化 λ 噬菌體 DNA 的方法。一般來說，λ 噬菌體在液體培養物中的生長不如平板裂解物中的。實驗材料 噬菌體重組子大腸桿菌試劑、試劑盒 氯仿乙醇高鹽緩沖液Tris-ClNaClEDT
λ噬菌體分離物的快速分析(從液體培養物中純化λDNA)實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 如本方案所述，λ 噬菌體 DNA 可很容易地從液體培養物中純化出來。而前一個方案則闡述了從平板裂解物中純化 λ 噬菌體 DNA 的方法。一般來說，λ 噬菌體在液體培養物中的生長不如平板裂解物中的。
從大規模裂解物中制備λ噬菌體顆粒實驗
從大規模培養物中制備的 λ 噬菌體，可在高鹽存在下用聚乙二酵 ( PEG ) 沉淀的辦法從裂解物中回收得到。殘余的細胞碎片和 PEG 可用氯仿抽提。在進一步純化之前，建議測定噬菌體制備物的得率。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理從大規模培養物中制備的 λ 噬菌體，可在高鹽存
從大規模裂解物中制備λ噬菌體顆粒實驗
實驗方法原理 從大規模培養物中制備的 λ 噬菌體，可在高鹽存在下用聚乙二酵 ( PEG ) 沉淀的辦法從裂解物中回收得到。殘余的細胞碎片和 PEG 可用氯仿抽提。在進一步純化之前，建議測定噬菌體制備物的得率。實驗材料 大腸桿菌培養物試劑、試劑盒 氯仿NaCl聚乙二醇SM胰 DNaseⅠ儀器、耗材 S
從大規模裂解物中制備λ噬菌體顆粒實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 從大規模培養物中制備的 λ 噬菌體，可在高鹽存在下用聚乙二酵 ( PEG ) 沉淀的辦法從裂解物中回收得到。殘余的細胞碎片和 PEG 可用氯仿抽提。在進一步純化之前，建議測定噬菌體制備物的得率。
從大規模裂解物中制備λ噬菌體顆粒
材料：緩沖液和溶液：氯仿NaCl（固體）聚乙二醇（PEG 8000）SM酶和緩沖液：胰Dnase I (1mg/ml)胰Dnase I (1mg/ml)于TE中（ph7.6）離心機和轉子：Sorvall? GSA 轉子或相當型號專用設備：量筒（2L）載體和菌株：大腸桿菌培養物，經λ噬菌體感染和裂解方
λ噬菌體分離物的快速分析(從平板裂解物中純化λDNA)實驗
實驗方法原理 對有希望的基因組或 cDNA 克隆的分析，通常開始于用限制酶消化 λ 噬菌體 DNA 的小量制備物，并對消化產物進行瓊脂糖凝膠電泳分析。所獲得的 DNA 可用作限制酶的底物、RNA 合成（由噬菌體 SP6、T3 和 T7 編碼的依賴于 DNA 的 RNA 聚合酶來完成）的模板以
λ噬菌體分離物的快速分析(從平板裂解物中純化λDNA)實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 對有希望的基因組或 cDNA 克隆的分析，通常開始于用限制酶消化 λ 噬菌體 DNA 的小量制備物，并對消化產物進行瓊脂糖凝膠電泳分析。所獲得的 DNA 可用作限制酶的底物、RNA 合成（由噬菌體 SP6、T3 和 T7
λ噬菌體分離物的快速分析(從平板裂解物中純化λDNA)實驗
對有希望的基因組或 cDNA 克隆的分析，通常開始于用限制酶消化 λ 噬菌體 DNA 的小量制備物，并對消化產物進行瓊脂糖凝膠電泳分析。所獲得的 DNA 可用作限制酶的底物、RNA 合成（由噬菌體 SP6、T3 和 T7 編碼的依賴于 DNA 的 RNA 聚合酶來完成）的模板以及 PCR 的模板。本
病毒－DNA－的提取實驗——培養細胞中病毒－DNA－的提取
實驗材料細胞試劑、試劑盒裂解液TE 緩沖液儀器、耗材培養瓶EP管真空泵實驗步驟1. 貼壁培養細胞傾去培養液，加 PBS 洗 2次,加胰蛋白酶消化 (37℃, 5~10 min)后移入Ep管中，2000 r/min 離心 10 min, 棄上清液，用 PBS 懸浮細胞，離心洗滌 2~3次，用 PBS
用小量液體培養物制備λ噬菌體原種實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 可通過小量液體培養物制備高滴度 λ 噬菌體原種。這一方法最早由 Leder 等（1977）采用。一般來說，它所得到的 λ 噬菌體的產量比平板裂解低且不穩定，另外噬菌體最初的接種量也大。但是，在液體培養物中制備的 λ 噬菌
用小量液體培養物制備λ噬菌體原種實驗
實驗方法原理 可通過小量液體培養物制備高滴度 λ 噬菌體原種。這一方法最早由 Leder 等（1977）采用。一般來說，它所得到的 λ 噬菌體的產量比平板裂解低且不穩定，另外噬菌體最初的接種量也大。但是，在液體培養物中制備的 λ 噬菌體原種將更清亮，并且也不含污染平板裂解物的硫酸鹽多糖。
用小量液體培養物制備λ噬菌體原種實驗
可通過小量液體培養物制備高滴度 λ 噬菌體原種。這一方法最早由 Leder 等（1977）采用。一般來說，它所得到的 λ 噬菌體的產量比平板裂解低且不穩定，另外噬菌體最初的接種量也大。但是，在液體培養物中制備的 λ 噬菌體原種將更清亮，并且也不含污染平板裂解物的硫酸鹽多糖。本實驗來源「分子克隆實驗指
λ噬菌體DNA提取
???λ噬菌體是最早使用的克隆載體，λ噬菌體的基因組是一長度約為50kb的雙鏈DNA分子，它在宿主細胞有兩種生活途徑，其一是裂解生長，環狀DNA分子在細胞內多次復制，合成大量噬菌體基因產物，裝配成噬菌體顆粒，裂解宿主菌再進行下一次感染；其二是溶源性生長，即感染細胞內λ噬菌體DNA整合到宿主菌染色體D
λ噬菌體DNA提取方法
成功走出第一步：DNA提取 λ噬菌體是最早使用的克隆載體 ? ，λ噬菌體的基因組是一長度約為50kb的雙鏈DNA分子，它在宿主細胞有兩種生活途徑，其一是裂解生長，環狀DNA分子在細胞內多次復制，合成大量噬菌體基因產物，裝配成噬菌體顆粒，裂解宿主菌再進行下一次感染;其二是溶源性生長，即感染細胞
λ噬菌體的大規模培養(低倍數感染)實驗
實驗方法原理 λ 噬菌體的大量制備可通過低倍數感染細菌培養物或高倍數感染這兩種方法獲得。低倍數感染后，培養物立即被轉接至大體積培養物中。因為在最初細菌培養物中只有小量的細胞被感染，所以轉接后的細菌培養物中的未感染細胞在隨后的數小時內將進一步分裂生長。實驗材料 λ 噬菌體原種試劑、試劑盒 氯仿SM儀器
λ噬菌體的大規模培養(低倍數感染)實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 λ 噬菌體的大量制備可通過低倍數感染細菌培養物或高倍數感染這兩種方法獲得。低倍數感染后，培養物立即被轉接至大體積培養物中。因為在最初細菌培養物中只有小量的細胞被感染，所以轉接后的細菌培養物中的未感染細胞在隨后的數小時內將進一步分
λ噬菌體的大規模培養(低倍數感染)實驗
λ 噬菌體的大量制備可通過低倍數感染細菌培養物或高倍數感染這兩種方法獲得。低倍數感染后，培養物立即被轉接至大體積培養物中。因為在最初細菌培養物中只有小量的細胞被感染，所以轉接后的細菌培養物中的未感染細胞在隨后的數小時內將進一步分裂生長。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理λ
制備DNA測序模板實驗——小量裂解物中制備λ噬菌體DNA
實驗材料重組λ噬菌體試劑、試劑盒DNA酶ⅠRNA酶ⅠPEGSMSDSEDTA異丙醇乙酸鈉TE儀器、耗材巴斯德吸管試管離心機實驗步驟1. ?在新鮮配制的λ頂層瓊脂糖和λ瓊脂糖平板上，通過在平板上裂解適于λ噬菌體生長的大腸桿菌菌株，制備重組λ噬菌體毒種原液。2. ?取700 μl 毒種液加入無菌的1.5
碘化物緩沖液提取噬菌體單鏈DNA
碘化物緩沖液： 10 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM EDTA, 4 M NaCl。室溫避光貯存。不知道這里面哪個是需要避光的？我怎么沒有提出DNA來，不知道是為什么？用的是NEB手冊上寫的方法。1. 按上述方法進行噬菌斑擴增，在第一步離心后，將500 μl含噬菌體上清轉入一新
用有機溶劑抽提法從DNA中除去溴化乙錠實驗
欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠，常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠，常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsC
用有機溶劑抽提法從DNA中除去溴化乙錠實驗
實驗方法原理 欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠，常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。實驗材料 DNA 樣品試劑、試劑盒 乙醇水飽和的異戊醇或 n-丁醇酚TE儀器、耗材 透析管和夾離心機和轉頭實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液乙醇，水飽和的異戊醇或
用有機溶劑抽提法從DNA中除去溴化乙錠實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠，常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。 實驗材料 DNA