鑒定分析植物蛋白復合物的藍綠非變性凝膠電泳實驗
試劑、試劑盒 十二烷基 β-D-麥芽糖苷增溶液TritonX-100 增溶液洋地黃阜苷增溶液考馬斯亮藍染色液丙烯酰胺溶液BN 凝膠緩沖液實驗步驟 3.1 BN-PAGE 樣品的制備所有樣品制備步驟必須在 4°C 下操作，在開始制備樣品前（見 26.3.1 節 1 和 26. 3.1 節 2) ，要制備好 BN 凝膠（見 26. 3. 2) 。1. 膜組分( 1 ) 按照標準的方法步驟制備要研究的膜組分，如細胞質膜、類囊體膜或線粒體膜。或者使用完整細胞器，如質體、線粒體或過氧化物酶體，作為 BN-PAGE 的初始實驗材料。( 2 ) 確定蛋白質濃度，如用 Lowry 方法等。( 3 ) 將蛋白質濃度調為 10 μg/μl。( 4 ) 15000 g 離心 100 μl 樣品 10 min，沉淀膜或細胞器組分。( 5 ) 用十二烷基 β-D-麥芽糖苷，Triton X-100 或洋地黃皂苷增溶液懸浮沉淀物（見注釋 1)。(......閱讀全文
鑒定分析植物蛋白復合物的藍綠非變性凝膠電泳實驗
試劑、試劑盒：十二烷基 β-D-麥芽糖苷增溶液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?TritonX-100 增溶液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
鑒定分析植物蛋白復合物的藍綠非變性凝膠電泳實驗
試劑、試劑盒十二烷基 β-D-麥芽糖苷增溶液TritonX-100 增溶液洋地黃阜苷增溶液考馬斯亮藍染色液丙烯酰胺溶液BN 凝膠緩沖液實驗步驟3.1 BN-PAGE 樣品的制備所有樣品制備步驟必須在 4°C 下操作，在開始制備樣品前（見 26.3.1 節 1 和 26. 3.1 節 2) ，要制備好
鑒定分析植物蛋白復合物的藍綠非變性凝膠電泳實驗
試劑、試劑盒?十二烷基 β-D-麥芽糖苷增溶液TritonX-100 增溶液洋地黃阜苷增溶液考馬斯亮藍染色液丙烯酰胺溶液BN 凝膠緩沖液實驗步驟 3.1 BN-PAGE 樣品的制備所有樣品制備步驟必須在 4°C 下操作，在開始制備樣品前（見 26.3.1 節 1 和 26. 3.1 節 2) ，要制
非變性凝膠電泳的概念
中文名稱非變性凝膠電泳英文名稱nondenaturing gel electrophoresis;native gel electrophoresis定 義不含變性劑，以聚丙烯酰胺、瓊脂糖等凝膠為分離介質的電泳。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
由非變性凝膠電泳遷移率法評估均一性實驗
當蛋白質在保持其天然構型不變的條件下進行電泳時，其遷移率可以作為它的均一性的一種量度。由于遷移率是電荷和形狀兩者的函數，因此可以預期，能將單體、二聚體等形式彼此分開。也有可能因異構體形狀的差異而用非變性凝膠電泳把蛋白質的構象異構體（conformational isomer) 分開。本實驗來源于蛋白
非變性凝膠電泳的的定義和特點
中文名稱非變性凝膠電泳英文名稱nondenaturing gel electrophoresis;native gel electrophoresis定 義不含變性劑，以聚丙烯酰胺、瓊脂糖等凝膠為分離介質的電泳。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗
試劑、試劑盒尿素裂解溶液IPG 干膠條水化液IPG 膠條平衡液SDS 凝膠緩沖液電極緩沖液儲液丙烯酰胺 甲叉雙丙烯酰胺溶液過硫酸銨溶液瓊脂糖溶液儀器、耗材等電聚焦儀IPGphor多重垂直 SDS 電泳儀實驗步驟3.1 第一向：在 IPG 膠條中進行等電聚焦（ IPG-IEF)采用 IPG ( IPG
植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗
試劑、試劑盒尿素裂解溶液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?? IPG 干膠條水化液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗（三）
使用 IPGphor 進行 IEF 的典型工作條件見表13-2和 表 13-3 。正如前文指出的那樣 ，為了使高分子質量的蛋白質更好地進入聚丙烯酰胺膠內，水化時應在膠條兩端加低電壓（30~50 V ) ，否則將給水化上樣造成困難[ 15，28] 。然后電壓逐步升高至 8000 V。如果 IP
植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗（四）
3.3 第二向：多重垂直 SDS-PAGESDS-PAGE 可以在水平或垂直系統上進行 [29] 。水平設備適用于預制膠（ExcelGel SDS；Amersham Biosciences/ GE Healthcare) 。而垂直系統則應用于多塊膠平行進行的電泳中，尤其是大規模的蛋白質組分析
植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗（一）
試劑、試劑盒?尿素裂解溶液IPG 干膠條水化液IPG 膠條平衡液SDS 凝膠緩沖液電極緩沖液儲液丙烯酰胺 甲叉雙丙烯酰胺溶液過硫酸銨溶液瓊脂糖溶液儀器、耗材?等電聚焦儀 IPGphor多重垂直 SDS 電泳儀實驗步驟 3.1 第一向：在 IPG 膠條中進行等電聚焦（ IPG-IEF)采用 IPG (
植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗（二）
2. 在平板儀器上進行 IPG-IEF ( Multiphor ll Unit)滿足下列條件時，水化后的 IPG 膠條可以直接放在 IEF 儀器的冷卻板上：① 如果運行時間不超過 12 h ( 經常發生在寬的或中等 pH 范 圍 IPG，如 IPG 3~10 或 4~7 ) 。② 如果 pH 梯
植物蛋白提取實驗說明
植物蛋白提取試劑適用于多種植物根，莖，葉及果實等的新鮮或凍存組織。植物組織成分復雜，含有較多酚類物質、多糖、色素、次生代謝物質等，致使植物蛋白質的分離提取變得困難和復雜。本試劑采用優化的試劑和程序，能有效提取多種植物中的可溶性和疏水性蛋白成分，有效去除植物組織所含的多酚、多糖、醌、色素、脂質、次生代
PCR產物的電泳鑒定
一、準備工作1、實驗器具與材料：（1）移液槍：10ul（2）吸頭：20ul（3）吸頭臺：放置200ul和20ul的吸頭一個（4）三角燒瓶：50ml一個（5）瓊脂糖2、實驗器具的處理與準備（1） 塑料制品：（包括吸頭等）送至高壓3次，試驗前將槍頭放入吸頭臺。（2）電泳板及電泳槽：用自來水沖洗干凈備用3
PCR產物的電泳鑒定
一、準備工作1、實驗器具與材料：（1）移液槍：10ul（2）吸頭：20ul（3）吸頭臺：放置200ul和20ul的吸頭一個（4）三角燒瓶：50ml一個（5）瓊脂糖2、實驗器具的處理與準備（1） 塑料制品：（包括吸頭等）送至高壓3次，試驗前將槍頭放入吸頭臺。（2）電泳板及電泳槽：用自來水沖洗干凈備用3
由非變性凝膠電泳遷移率法評估均一性實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 核心 RNA 聚合酶 核心 RNA 聚合酶-σ32 復合物 σ32 非變性膠樣品緩沖液 儲存緩沖液 考馬斯亮藍（CBB) 染色
由非變性凝膠電泳遷移率法評估均一性實驗
試劑、試劑盒 核心 RNA 聚合酶核心 RNA 聚合酶-σ32 復合物σ32 非變性膠樣品緩沖液儲存緩沖液考馬斯亮藍（CBB) 染色液脫色液儀器、耗材 非變性凝膠電泳裝置實驗步驟 材料與設備核心 RNA 聚合酶核心 RNA 聚合酶-σ32 復合物，由免疫親和柱洗脫所得σ32，由 POROS 50S
方案3－多蛋白質復合體的非變性瓊脂糖凝膠電泳實驗
實驗材料含有目標蛋白的細胞提取物試劑、試劑盒瓊脂糖凝膠脫色液凝膠染色液甘油2 X 上樣緩沖液SDS-聚丙烯酰胺凝膠儀器、耗材玻璃紙錐形瓶凝膠電泳裝置微量離心過濾裝置小型離心機微波爐Ultrafree-DA 裝置實驗步驟一、非變性凝膠的制備在非變性凝膠緩沖液中，制備水平的 0.8% 瓊脂糖凝膠，規格約
質粒DNA電泳鑒定
1．目的學會常用的DNA瓊脂糖凝膠電泳。2．原理DNA雙螺旋分子骨架兩側帶有含負電荷的磷酸根，在電場中會向正極方向移動。不同長度的DNA由于受到凝膠介質的阻力不同，表現為不同的遷移率而被分開。3．器材電泳儀，水平凝膠電泳槽和梳子及其制膠模塊，250ml三角瓶，微波爐，臺式離心機，旋渦混合器，凝膠成像
RNA電泳鑒定步驟
? ? 一，準備工作? ? 1，實驗器具與材料:? ? (1)移液槍:10ul? ? (2)吸頭:20ul? ? (3)吸頭臺:放置 200ul 和 20ul 的吸頭一個 (4)三角燒瓶:50ml 一個? ? (5)瓊脂糖 2，實驗器具的處理與準備? ? (1) 塑料制品:(包括吸頭等)? ? 送至
甲醛變性凝膠電泳鑒定RNA實驗_凝膠電泳法
本實驗旨在學會甲醛變性凝膠電泳鑒定RNA 的方法。瓊脂糖凝膠電泳作為鑒定大分子物質經常被使用, 但含有RNase 酶活性, 因此要使RNase 變性而不使RNA 變性的, 故采用甲醛變性凝膠電泳鑒定RNA。實驗方法原理瓊脂糖凝膠電泳作為鑒定大分子物質經常被使用, 但含有RNase 酶活性, 因此要使
質粒DNA瓊脂糖凝膠電泳鑒定實驗
實驗材料 瓊脂糖試劑、試劑盒 溴化乙錠儀器、耗材 瓊脂糖凝膠電泳裝置紫外燈實驗步驟 1. ?瓊脂糖凝膠電泳裝置?由于瓊脂糖凝膠電泳既要求不高，而適應性又強，在過去15年里已成功地設計了形形色色及大大小小的電泳槽。對這些裝置的選擇主要是依據個人的喜惡。使用最普遍的裝置是Walter Schaffner
甲醛變性凝膠電泳鑒定RNA實驗
凝膠電泳法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 瓊脂糖凝膠電泳作為鑒定大分子物質經常被使用, 但含有RNase 酶活性, 因此要使RNase 變性而不使RNA 變性的, 故采用甲
質粒DNA瓊脂糖凝膠電泳鑒定實驗
實驗材料瓊脂糖試劑、試劑盒溴化乙錠儀器、耗材瓊脂糖凝膠電泳裝置紫外燈實驗步驟1. ?瓊脂糖凝膠電泳裝置?由于瓊脂糖凝膠電泳既要求不高，而適應性又強，在過去15年里已成功地設計了形形色色及大大小小的電泳槽。對這些裝置的選擇主要是依據個人的喜惡。使用最普遍的裝置是Walter Schaffner發明的水
甲醛變性凝膠電泳鑒定RNA實驗
實驗方法原理 瓊脂糖凝膠電泳作為鑒定大分子物質經常被使用, 但含有RNase 酶活性, 因此要使RNase 變性而不使RNA 變性的, 故采用甲醛變性凝膠電泳鑒定RNA。實驗材料 RNA試劑、試劑盒 MOPS乙酸鈉EDTA蔗糖EDTA溴酚藍二甲苯青甲醛儀器、耗材 電泳槽電泳儀實驗步驟 1. ?制備凝
非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳的實驗原理介紹
非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(Native-PAGE)或稱為活性電泳是在不加入SDS 和巰基乙醇等變性劑的條件下,對保持活性的蛋白質進行聚丙烯酰胺凝膠電泳,常用于酶的鑒定、同工酶分析和提純。未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝膠電泳可以使生物大分子在電泳過程中保持其天然的形狀和電荷,它們的分離是依據其電泳遷
磷酸化位點分析實驗——高分辨凝膠電泳分離磷酸肽
實驗材料蛋白樣品儀器、耗材質譜儀實驗步驟在聚丙烯酰胺凝膠上用?2-DE?純化磷酸肽是最近發表的制備技術，其結果與?2D-PP?結果相似。非變性凝膠等電聚焦結合堿性?40%PAGE?膠用于磷酸肽分離及比較分析。?32p?標記樣品用放射自顯影或磷儲屏檢測。用?Edman?測序方法鑒定蛋白質并確定磷酸化位
非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
Native-PAGE原理: 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳 (Native-PAGE)是在不加入SDS 疏基乙醇等變性劑的條件下, 對保持活性的蛋白質進行聚丙烯酰胺凝膠電泳,常用于同工酶的鑒定和提純.未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝膠電泳可以使生物大分子在電泳過程中保持其天然的形狀和電
非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
Native-PAGE原理:非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳 (Native-PAGE)是在不加入SDS?疏基乙醇等變性劑的條件下, 對保持活性的蛋白質進行聚丙烯酰胺凝膠電泳,常用于同工酶的鑒定和提純.未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝膠電泳可以使生物大分子在電泳過程中保持其天然的形狀和電荷,它們的分離是依據其電
影響凝膠聚合的因素
1) Acr及Bis的純度：應選用分析純的Acr及Bis，如試劑不純，含有雜質或丙烯酸時，則凝膠聚合不均一，或聚合時間延長甚至不聚合， 因而需進一步純化。 Acr和Bis貯液的pH值為4.9-5.2，當pH值的改變大于0.4pH單位則不能使用，因在偏酸或偏堿的環境中，它們可不斷水解放出丙烯酸和N