怎樣正確配置高效液相色譜儀流動相?
高效液相色譜儀的分離原理主要取決于流動相和固定相的吸附和解吸。流動相的正確配置對實驗數據和分離效果至關重要。首先,流動相構型中應注意的問題-一般情況下,溶劑的混合是根據體積比(V≤V)或重量比(W≤W)進行的。高效液相色譜儀的色譜法所需的甲醇、乙腈等試劑必須為色譜純級。其他試劑也應盡可能為色譜純級。試劑標簽上應標明色譜等級或高效液相色譜字樣,水必須是超純水或直接購買質量保證純凈水.當高效液相色譜儀反相色譜法將流動相的pH值調整為分離弱酸(3<pka<7)或弱堿(7<pka<8)時,通過調整流動相的pH值來抑制樣品組分的分離,增加了組分在固定相上的保留,提高了樣品的穩定性。d采用反相離子抑制技術改善了峰形。......閱讀全文
怎樣正確配置高效液相色譜儀流動相?
高效液相色譜儀的分離原理主要取決于流動相和固定相的吸附和解吸。流動相的正確配置對實驗數據和分離效果至關重要。首先,流動相構型中應注意的問題-一般情況下,溶劑的混合是根據體積比(V≤V)或重量比(W≤W)進行的。高效液相色譜儀的色譜法所需的甲醇、乙腈等試劑必須為色譜純級。其他試劑也應盡可能為色譜純級。
高效液相色譜儀正確配置流動相的要點
1.高效液相色譜儀的分離原理主要取決于流動相和固定相的吸附和解吸。流動相的正確配置對實驗數據和分離效果至關重要。首先,流動相構型中應注意的問題-一般情況下,溶劑的混合是根據體積比(V≤V)或重量比(W≤W)進行的。溶液的體積隨溫度的變化而變化,因此根據重量比混合流動相。樣品測定的重復性好,但操作繁瑣
簡介高效液相色譜儀正確配置流動相的要點
(1)對于弱酸,流動相的pH值越小,組分的k值越大。當pH值遠低于弱酸的PKA值時,弱酸主要以分子形式存在。在分析弱酸樣品時,通常在流動相中加入少量的弱酸,通常使用50 mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%醋酸溶液。 (2)對于軟弱地基,則相反。在弱堿樣品的分析中,通常會在流動相中加入少量的弱堿。常
高效液相色譜儀流動相如何配置
水是純水,這只是一個比例,也就是3比1,沒有什么大的要求。配好以后,抽濾一下(用0.22微米,也有用0.25微米的膜),但我也見過不過濾的。如果有條件還是過濾一下,有的檢測器對氣泡還是比較敏感的,也有利于儀器的保護。
正確配置高效液相色譜儀流動相的四個要點
高效液相色譜儀的分離原理主要取決于流動相和固定相對樣品的吸附和解吸,因此流動相的正確配置對實驗數據和分離效果具有重要意義。一、流動相配置注意事項通常,溶劑按體積比(v/v)或重量比(w/w)混合。溶液的體積由于溫度而變化,使得流動相按重量比混合,樣品測量的重復性好,但操作復雜,通常在體積混合中。體積
高效液相色譜儀流動相概述
根據流動相所起的作用,高效液相色譜儀流動相可分為底劑和洗脫劑。底劑決定基本的色譜分離情況,洗脫劑是為了調節樣品組分的滯留并對某幾個組分具有選擇性的分離作用。流動相又稱洗脫劑、淋洗液、展層劑或溶劑。一、流動相選擇的一般要求:1、流動相的純度。2、流動相與固定相不互溶,不發生化學反應。3、對樣品要有適宜
高效液相色譜儀流動相要求
高效液相色譜儀流動相要求1.流動相的性質要求? 一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。? 選擇流動相時應考慮以下幾個方面:? ①流動相應不改變填料的任何性質。低交聯度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機相會溶脹或收縮,從而改變色譜柱
高效液相色譜儀流動相的要求
高效液相色譜流動相是液體,對組分有親合力,并參與固定相對組分的競爭,正確選擇流動相溶劑直接影響樣品組分的分離。一、溶劑對于待測樣品必須具有合適的極性和良好的選擇性。二、溶劑與檢測器匹配:對于紫外吸收檢測器,不能用對紫外光有吸收的溶劑。對于示差折光檢測器,要求選擇與組分折光率有較大差別的溶劑作流動相,
高效液相色譜儀流動相脫氣方法
脫氣方法 1.吹氦脫氣法 利用氦氣在液體中溶解度比空氣低的特性,在0.1MPa壓力下,以約60mL/min流速通入流動相儲液容器中10~15min,可以很有效地從流動相中排除溶解的空氣,能排除接近80%的氧氣。采用一個高效分布式噴射流裝置,一體積的氦氣可從流動相中將等體積
高效液相色譜儀流動相的處理
高效液相色譜儀流動相的處理包括水的處理、溶劑的提純、溶劑的過濾與脫氣等。一、水的處理:水的等級分純化水、蒸餾水和去離子水等。將一般的蒸餾水加入少許高錳酸鉀,消耗水中的氧氣,在 PH=9~10 的條件蒸餾,可用于梯度洗脫。二、溶劑的提純:通常用蒸餾法可除去大部分有紫外吸收的雜質。三、溶劑的過濾與脫氣:
高效液相色譜儀流動相選擇方法
流動相選擇方法 1:由強到弱:?一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗,這樣可以很快地得到分離結果,然后根據出峰情況調整有機溶劑(乙腈或甲醇)的比例。? 2:?三倍規則?:每減少10%的有機溶劑(甲醇或乙腈)的量,保留因子約增加3倍,此為三倍規則。這是一個聰明而又省力的辦法。調
高效液相色譜儀流動相脫氣方法
在食品分析中,無論是殘留分析還是成分分析,高效液相色譜儀(HPLC)也已成為不可或缺的分析儀器。流動相脫氣是HPLC系統能得到可靠數據的一個很有效的措施。下面分析一下,高效液相色譜脫氣的必要性,并總結歸納了脫氣常用的方法。一、脫氣的必要性流動相脫氣是HPLC系統能得到可靠數據的一個很有效的措施。HP
高效液相色譜儀流動相的選擇原則
1、選擇色譜醇的溶劑作為流動相不要隨意加滿溶劑瓶。作為分析流動相,應避免不必要的浪費,防止污染環境,危害身體健康。應該根據樣哦數量,計算需要使用的溶劑體積,添加適量流動相到試劑瓶中作為流動相。因為有些有機溶劑長期放置易變質,比如在光照下就容易變質,甲醇或乙醇長期放置會生成酯類,乙腈水溶液會分解為醋酸
高效液相色譜儀的流動相相關介紹
如果流動相均由高效液相色譜級溶劑組成,流動相沒有必要過濾。這是因為高效液相色譜級的有機溶劑,例如乙腈、甲醇等,在制造的工藝過程中都已經過了0.2 μm微孔濾膜過濾。同樣的,無論你是買的HPLC級的水還是在實驗室使用超純水凈化系統制備的水,zui后一步也是通過0.2 μm微孔濾膜。然而,如果有任何
高效液相色譜儀溶劑流動相的純化
分析純和優等純溶劑在許多情況下都能滿足高效液相色譜儀的要求,但不同的色譜柱和檢測方法對溶劑的要求不同。目前,用于高效液相色譜儀分析的純色譜溶劑,除甲醇外,大多為分析純,有時需要通過去除紫外雜質、脫水、蒸餾等方法進行提純。1.乙腈是常用的溶劑。對純乙腈的分析中含有少量的丙酮、丙烯腈、丙烯酸酯、惡唑化合
高效液相色譜儀流動相選擇要求?
高效液相色譜儀流動相選擇要求?1.流動相的性質要求液相色譜理想的流動相溶劑應具有粘度低、與檢測器相容性好、易于獲得純產品、毒性低等特點。選擇流動相時應考慮以下方面:流速不會改變填料的任何性質 離子交換樹脂的低交聯度和排斥色譜填料有時會使有機相發生一定的膨脹或收縮,從而改變填料床的性能。 堿性流動相不
高效液相色譜儀流動相的選用要求
?????? 高效液相色譜儀流動相的選用要求包括流動相性質要求、流動相選擇、流動相pH值、流動相脫氣、流動相過濾、流動相貯存、鹵代溶劑應特別注意的問題和HPLC用水等方面。一、流動相性質要求:??????? HPLC中,強溶劑使溶質在填料表面的吸附減少,相應的容量因子k值減小;較弱的溶劑使溶質在填料
高效液相色譜儀的流動相特點和存放
高效液相色譜儀的流動相特點: a、流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。? b、流動相具有一定惰性,與樣品不產生化學反應。? c、流動相的黏度要盡量小,以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果;同時降低柱壓降,延長液體泵的使用壽命(可運用提高溫度
高效液相色譜儀流動相脫氣必要性
高效液相色譜儀流動相脫氣必要性 流動相脫氣是HPLC系統能得到可靠數據的一個很有效的措施。HPLC泵在輸送液體時要產生很大的力量,由于氣體的壓縮比與液體相比大的多,因而當氣泡存在時,我們發現瞬間的流速降低和系統壓力下降,如果這個氣泡足夠大,液相泵將不能輸送任何溶劑,而且如果壓力低于預先設定
高效液相色譜儀中把流動相跑光了
如果是通用品牌的液相,先把排液閥打開,然后大流速沖一下,將氣泡排除。如果是島津液相,先把流動相瓶放在高處,將出口單向閥拆開,然后讓其自然勢能流出溶液,最后再裝上單向閥。
怎樣選擇流動相
要根據樣品的性質、PH值、樣品的溶解度,由樣品在有機溶劑中溶解度的大小,初步判斷樣品是非極性化合物還是極性化合物,進而推斷用非極性溶劑戊烷、己烷、庚烷等,還是極性溶劑二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙腈等來溶解樣品,并通過實驗判斷.若樣品溶于非極性溶劑,表明樣品為非極性化合物,通常可以選吸附色譜法或
高效液相色譜儀的流動相和固體相哪個極性大
根據流動相和固定相相對極性不同,液相色譜分為正相色譜和反相色譜。流動相極性大于固定相極性的,稱為反相色譜。固定相極性大于流動相極性的,稱之為正相色譜。高效液相色譜儀的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載
液相色譜儀流動相前的過濾頭怎樣清洗
過濾頭 分好集中 一般有無機相和有機相無機相過濾頭 是藍色的有機相過濾頭 是白色的這種過濾頭一般都是一次性的 用完一次就扔像這種高精密色譜儀器 不建議重復使用過濾頭
液相色譜儀流動相前的過濾頭怎樣清洗
過濾頭 分好集中 一般有無機相和有機相無機相過濾頭 是藍色的有機相過濾頭 是白色的這種過濾頭一般都是一次性的 用完一次就扔像這種高精密色譜儀器 不建議重復使用過濾頭
液相色譜儀流動相前的過濾頭怎樣清洗
就是那個白濾頭嗎,那個一般都是一次性的,很難洗凈,不過沒有的話超聲洗洗還是可以再用一段時間如果是放在水相中的, 最好是更換新的.一般不會太臟的,如果真的太臟了。還是換新的吧是purge閥里的白頭還是流動相瓶子里的過濾頭?
高效液相色譜儀流動相脫氣的目的和方法
流動相脫氣是高效液相色譜儀提高檢測性能和保護色譜柱的有效措施。一、高效液相色譜儀流動相脫氣的目的:1、使色譜泵輸液均勻準確,減小脈動。2、提高保留時間和色譜峰面積的重現性。3、防止氣泡引起尖峰。4、使基線穩定,提高信噪比。5、降低溶劑的紫外吸收本底。6、減少死體積。7、防止填料氧化。二、高效液相色譜
高效液相色譜儀流動相為什么要預先脫氣
高效液相色譜儀流動相中的溶解氣體進入檢測器時,會引起光吸收或電信號的變化,基線突然跳動,干擾檢測;溶解氣體進入色譜柱時,可能與流動相或固定相發生化學反應;溶解氣體還會引起某些樣品的氧化降解,給分離和分析結果帶來誤差。因此,流動相使用前必須進行脫氣處理。??????? 流動相脫氣方法有:吹氦脫氣法、加
實驗室高效液相色譜儀流動相的濾過
所有溶劑使用前都必須經0.45μm(或0.22μm)濾過,以除去雜質微粒,色譜純試劑也不例外(除非在標簽上標明“已濾過”)。用濾膜過濾時,特別要注意分清有機相(脂溶性)濾膜和水相(水溶性)濾膜。有機相濾膜一般用于過濾有機溶劑,過濾水溶液時流速低或濾不動。水相濾膜只能用于過濾水溶液,嚴禁用于有機溶劑,
高效液相色譜儀流動相脫氣的目的和方法
? ?流動相脫氣是高效液相色譜儀提高檢測性能和保護色譜柱的有效措施。一、高效液相色譜儀流動相脫氣的目的:? 1、使色譜泵輸液均勻準確,減小脈動。? 2、提高保留時間和色譜峰面積的重現性。? 3、防止氣泡引起尖峰。? 4、使基線穩定,提高信噪比。? 5、降低溶劑的紫外吸收本底。? 6、減少死體積。?
實驗室高效液相色譜儀流動相的脫氣
HPLC所用流動相必須預先脫氣,否則容易在系統內逸出氣泡,影響泵的工作。氣泡還會影響柱的分離效率,影響檢測器的靈敏度、基線穩定性,甚至使無法檢測。(噪聲增大,基線不穩,突然跳動)。此外,溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相(如烷基胺)反應。溶解氣體還會引起溶劑PH的變化,對分離或分析結果