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  • 核酸探針在遺傳性疾病及點突變的直接分析方面的應用

    DNA 分子中某個堿基的替換或核苷酸的插入、缺失及重排都可能引起遺傳性疾病。一般可以根據遺傳性基因產物的改變來分析遺傳疾病的發生,但對那些不能用蛋白產物進行分析的遺傳疾病可用 DNA 雜交技術進行分析。對于那些基因點突變引起的限制性內切酶作用部位增加或消失,或因 DNA 順序的增加、缺失或重排,使各位點之間的 DNA 長度發生改變而引起的遺傳疾病可用 DNA 探針直接分析。用 DNA 雜交技術已直接分析了動脈粥樣硬化、糖尿病和生長激素缺陷等遺傳病。目前化學合成的核苷酸探針也能進行點突變的直接分析,其原理是根據寡核苷酸鏈和給定的等位基因之間的一個堿基對的錯配來鑒別基因型(這個等位基因在此條件下完全不能雜交)。這種方法已用于分析α1-抗胰蛋白酶缺陷、鐮狀細胞貧血。此外,人的性別鑒定和法醫學上人的DNA 指紋分析,也廣泛應用核酸探針診斷技術。......閱讀全文

    核酸探針在遺傳性疾病及點突變的直接分析方面的應用

    DNA 分子中某個堿基的替換或核苷酸的插入、缺失及重排都可能引起遺傳性疾病。一般可以根據遺傳性基因產物的改變來分析遺傳疾病的發生,但對那些不能用蛋白產物進行分析的遺傳疾病可用 DNA 雜交技術進行分析。對于那些基因點突變引起的限制性內切酶作用部位增加或消失,或因 DNA 順序的增加、缺失或重排,使各

    核酸探針在其他方面的應用

    1、檢測抗生素耐藥性核酸探針可直接從標本中測出細菌的耐藥基因。Perine 等用 DNA 探針查出尿路滲出液中的大多數淋球菌含有TEM 型β-內酰胺酶而對青霉素 G 耐藥。2、流行病學調查核酸探針可用于研究醫源性感染中爆發流行時大量的流行菌株間的同源性,結果易于分析和解釋。3、惡性腫瘤最引起人們注意

    核酸探針在病原微生物的檢測方面的應用

    在許多病原微生物的檢測上,常用的分離培養方法需要的時間較長,手續也較繁雜,而且病灶和糞便等病料含雜菌較多,阻礙病原微生物的檢出,不能快速做出診斷。免疫學方法也有許多不足之處,尤其是在持續性感染和感染潛伏期抗體尚未產生或不易檢測出抗體的情況下,即使有抗體存在也難以判斷。而應用核酸探針技術,就可以直接確

    詳述離子探針分析儀在各方面的應用

      (1)在半導體材料方面的應用  由于半導體材料純度要求很高,要求分析的區域最小,迫切要求做表面分析和深度分析,因此也是最適合離子探針發揮作用的領域,其中有代表性的工作有:  ? 表面、界面和體材料的雜質分析  ? 離子注入濃度及摻雜的測定  ? 在實效分析方面的應用  (2)在金屬材料方面的應用

    熒光染料在核酸檢測方面的應用

    核酸熒光染料對細胞核染色后定量測量細胞所發出的熒光強度,就可以確定細胞核中DNA、RNA的含量,并可以對細胞周期和細胞的增殖狀況進行分析。有多種熒光染料可以對細胞中的DNA或RNA染色,常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst 33342等,RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。

    熒光染料在免疫分析方面的應用

    熒光標記的單克隆抗體技術為流式細胞儀在研究細胞膜和細胞內各種功能性抗原、腫瘤基因蛋白等領域擴展了無限的應用空間。熒光探針可以通過蛋白質交聯劑共價結合在單克隆抗體上。免疫熒光標記最常用的染料有異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)、藻紅蛋白(PE)以及Ale

    簡述核酸探針技術及其在微生物檢測中的應用

    隨著分子生物學和分子化學的飛速發展,對病原微生物的鑒定已不再局限于對它的外部形態結構及生理特性等一般檢驗上,而是從分子生物學水平上研究生物大分子,特別是核酸結構及其組成部分。在此基礎上建立的眾多檢測技術中,核酸探針(Nuclear acid probe)以其敏感、特異、簡便、快速的特點成為世人矚目的

    顯微CT在骨成像及定量分析方面的應用

    骨質疏松研究顯微CT成像對骨質疏松癥的研究尤為重要,特別是疾病進展和治療效果,因為它是少數能夠提供骨礦物質含量和密度信息的成像技術之一。通過高分辨率的顯微CT測量這些變化,有助于開發治療劑并理解控制這些過程的分子機制。在骨質疏松的動物研究中,雌性鼠雙側卵巢摘除是一個較成熟的模型,可以成功建立模擬雌激

    波譜分析在醫藥方面的應用

      1. 藥物分析中的應用波譜分析的發展趨勢 藥物波譜分析是當今發展最為迅速的前沿科學之一。波譜分析在藥物分析中的重要應用可見一斑。中藥的化學成分復雜,有效成分難以確定。僅單方制劑亦為一多種成分的混合物,因此要求更嚴格和更先進的分離、分析手段進行鑒別和含量測定。而波譜分析便是中藥研究中最為廣泛應用的

    波譜分析在環境方面的應用介紹

      環境方面  1. 有機物污染的分析  紫外光譜經常用來做物質的純度檢查、定量分析和結構鑒定。在有機物的定量、定性分析中也有其獨到之處。在環境中有機污染物的分析中應用廣泛,如土壤中敵敵畏、敵百蟲等農藥殘留含量的分析。  2. 食品安全中的應用  高效液相色譜一質譜/質譜法(HPLC-MS/MS)具

    生物質譜儀在藥物分析方面的應用

    藥物分析的應用:質譜在藥物分析中的應用包括:合成藥物組分分析,天然藥物成分分析,肽和蛋白質藥物(包括糖蛋白)氨基酸序列分析,藥物代謝研究和中藥成分分析。在檢驗醫學中應用較多的是治療藥物監測(TDM),以前藥物檢測主要使用免疫化學技術和高效液相色譜技術。雖然,免疫化學技術簡單易行,但是所測定藥物種類比

    波譜分析在工業方面的應用簡介

      工業方面  1. 化工工業中的應用  波譜分析在精細化學品中的應用相當廣。波譜在混合物中的分離提純,樣品中各個組分的定性和定量分析都是很好的工具。如對染料、顏料、涂料、食品添加劑、化學助劑的結構分析。  波譜分析是紡織工業中檢測紗線質量的關鍵技術。通過波譜分析可以了解紗條不勻率的性質,及時找出紡

    十九大!看看分子病理領域,未來發展方向!

      今天黨的十九大召開,習近平大大指出:中國特色社會主義進入新時代,我國社會主要矛盾已經轉化為人民日益增長的美好生活需要和不平衡不充分的發展之間的矛盾。想想都覺得高中政治課本過時了,而考研又多了一道大題。然而這些年,醫療領域進展可不止一點!就讓我們一起看看這些年,分子病理領域的發展!  其實相對于其

    分子病理診斷的現狀與思考

    分子病理診斷,是指應用分子生物學技術,從基因水平上檢測細胞和組織的分子遺傳學變化,以協助病理診斷和分型、指導靶向治療、預測治療反應及判斷預后的一種病理診斷技術,是分子生物學、分子遺傳學和表觀遺傳學的理論在臨床病理中的應用,屬轉化醫學的范疇。分子病理診斷又稱分子病理檢查、分子病理檢測、分子病理技術,稱

    核酸探針標記及原位雜交

    一、核酸探針標記核酸探針分子雜交是指具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下(適宜的溫度及離子強度等)可按堿基互補原則形成雙鏈,此雜交過程是高度特異的。雜交的雙方是待測核酸及探針。核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據標記物不同,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針兩大類;根據是否

    核酸探針標記及原位雜交

    一、核酸探針標記 核酸探針分子雜交是指具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下(適宜的溫度及離子強度等)可按堿基互補原則形成雙鏈,此雜交過程是高度特異的。雜交的雙方是待測核酸及探針。 核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據標記物不同,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針兩大

    核酸探針的分類

    核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據是否使用放射性標記物的與否,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針;根據是否存在互補鏈,可分為單鏈和雙鏈探針;根據放射性標記物摻入情況,可分為均勻標記和末端標記探針。

    核酸探針標記

    實驗概要核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據是否使用放射性標記物與否,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針;根據是否存在互補鏈,可分為單鏈和雙鏈探針;根據放射性標記物摻入情況,可分為均勻標記和末端標記探針。實驗原理分子生物研究中,最常用的探針即為雙鏈DNA探針,它廣泛應用于轉基因

    苯甲酸在食品及醫藥方面的應用

      (1)防腐劑  苯甲酸和苯甲酸鈉有殺菌和抑制細菌生長的作用,且低毒無味,因而它們廣泛地用作防腐劑。在微酸性介質中,僅0.1%濃度的苯甲酸可抑制細菌生長。改變pH值對苯甲酸鹽的殺菌作用和抑菌作用影響很大,在堿性介質中其效果明顯降低,pH值在2.5~4.5時效果最佳。  在食品工業中,苯甲酸,苯甲酸

    核酸探針標記及原位雜交1

    一、核酸探針標記核酸探針分子雜交是指具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下(適宜的溫度及離子強度等)可按堿基互補原則形成雙鏈,此雜交過程是高度特異的。雜交的雙方是待測核酸及探針。核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據標記物不同,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針兩大類;根據是否

    核酸探針標記及原位雜交3

    3.注意事項(1)避光下準備反應體系:由于光敏生物素醋酸鹽對光敏感,應避免光照。在分裝試劑及核酸與光敏生物素混合時應在暗室安全燈下操作。(2)核酸純度:由于光敏生物素能與任何有機物反應,因此用做標記探針的核酸要高度純化。用作標記探針的核酸最好不用Tris溶液溶解,Tris中所含氨基會干擾標記。(3)

    核酸探針標記及原位雜交2

    (二)隨機引物合成法 隨機引物合成雙鏈探針是使寡核苷酸引物與DNA模板結合,在Klenow酶的作用下,合成DNA探針。合成產物的大小、產量、比活性依賴于反應中模板、引物、dNTP和酶的量。通常,產物平均長度為400~600個,可以獲得大量的有效探針。反應時對模板的要求不嚴格,用微量制備的質

    核酸探針標記及原位雜交4

    (三)試劑配制配制溶液過程中均需戴手套,液體配制均用超凈水,所用瓶子均經160℃烘烤4h,主要目的是去除RNA酶。1.DEPC水 將DEPC按1‰濃度加入超凈水中,充分混合后靜置過夜,15~20min高壓消毒,之后室溫避塵存放。2.0.1mol PBS pH 7.4A液:0.1mol NaH2PO4

    蜂蠟在農業方面的應用

    在農業方面,主要是將蜂蠟用于保存果蔬和用于飼料添加方面。果蔬保存陳秀芳等認為,涂于新鮮果蔬表面的可食用膜通過控制新鮮果蔬的呼吸強度,阻止果蔬組織的水分損失,從而延長果蔬的貨架壽命。可食用膜,顧名思義,是一種由可食用的成分組成的膜。因為采后的果蔬仍進行著旺盛的生命活動,最典型的是它的呼吸作用。呼吸過程

    核酸探針標記的簡介

      核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據是否使用放射性標記物的與否,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針;根據是否存在互補鏈,可分為單鏈和雙鏈探針;根據放射性標記物摻入情況,可分為均勻標記和末端標記探針。下面將介紹各種類型的探針及標記方法。

    搖核酸的熒光探針

    DNA和RNA?搖核酸的熒光探針 用于共聚焦激光掃描顯微鏡的主要有Acridine Orange(吖啶橙,AO)、Propidium Iodide(碘化丙啶,PI)。兩種染料既可標記DNA又可標記RNA,如為獲得單獨的DNA或RNA分布,染色前可用RNA酶或DNA酶處理細胞。PI不能進入完整的細胞膜

    核糖核酸探針

    核糖核酸探針1.室溫下,于1.5ml無菌微量離心管內依次加入:5μl???????????????5×轉錄緩沖液1μg???????????????模板DNA1.2μl?????????????10 mmol/L rATP(終濃度為480μmol/L)1.2μl?????????????10 mmo

    核酸基因分子探針

    從化學和生物學的意義上理解,探針是一種已知特異性的分子,它帶有合適的標記物供反應后檢測。探針和靶的相互反應如抗原-抗體、血凝素-碳水化合物、親合素-生物素、受體和配體,以及核酸與其互補核酸間的雜交等反應均屬此類。用核酸探針與待檢標本中核酸雜交,形成雜交體,再用呈色反應顯示。此方法用于疾病的診斷,稱為

    點突變大小鼠在體內體外臨床研究的應用(二)

    研究點突變疾病的利器——點突變模式動物依靠同源重組,可以將含有突變堿基的DNA片段整合到基因組中,但過低的重組效率以及種屬局限限制了點突變的研究。隨著各種核酸酶技術在2009-2013年之間井噴式的發展及以后的不斷完善,尤其是Crispr/Cas9技術的發明,使得基因編輯的效率大幅提高,難度和成本也

    點突變大小鼠在體內體外臨床研究的應用(一)

    點突變與人類疾病基因是很多生命的藍圖,基因突變雖有對物種的多樣性和演化有重要的作用,但同時也是很多疾病的根源。點突變就是突變類型中最常見的一種,是色盲癥、鐮刀狀細胞貧血癥、囊性纖維化以及很多腫瘤病變中的罪魁禍首。除了引發癌癥以外,一些點突變還能提高癌細胞的藥物抗性,因此針對同一靶點有時需要設計不同的

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