關于鬼筆環肽的配制內容介紹
0.1mg鬼筆環肽溶于1ml無水甲醇(也可用DMSO或無水乙醇溶解)配成貯存液,可在-20度避光的條件下長期保存,工作液的濃度為5ug/ml,由貯存液加生理鹽水PBS稀釋20倍即可。 一、染色程序 1、生理鹽水PBS清洗細胞2次,每次10分鐘; 2、3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分鐘,生理鹽水PBS清洗細胞2次; 3、加入5ug/ml的FITC-鬼筆環肽室溫染色30-60分鐘,夏季時間可以短一些,生理鹽水PBS清洗細胞2次; 4、DAPI或hoechst33258染細胞核10分鐘,生理鹽水PBS清洗細胞2次; 5、吸去多余水分,加熒光封片液(中性或偏堿性緩沖液加等量甘油),蓋上蓋玻片,熒光或共聚焦顯微鏡下觀察。 二、注意事項 1、鬼筆環肽的分子量小,很容易通過細胞,不需要對細胞進行冷丙酮和TRITON X-100處理。 2、藥品價格昂貴,0.1mg的售價接近兩千元,要節約使用。 3、毒性較大,戴上......閱讀全文
關于鬼筆環肽的配制內容介紹
0.1mg鬼筆環肽溶于1ml無水甲醇(也可用DMSO或無水乙醇溶解)配成貯存液,可在-20度避光的條件下長期保存,工作液的濃度為5ug/ml,由貯存液加生理鹽水PBS稀釋20倍即可。 一、染色程序 1、生理鹽水PBS清洗細胞2次,每次10分鐘; 2、3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分
關于鬼筆環肽的基本介紹
鬼筆環肽(phalloidin),是從一種劇毒蘑菇(Amanita phalloides(Vaill ex Fr.)Secr.) (傘菌目,毒傘屬的毒傘)中分離出來的一種多肽物質,屬于毒傘肽類毒素,是一種強烈毒素。無色,細針狀結晶。鬼筆環肽中毒的主要癥狀是由于肝細胞的破壞引起的急性饑餓。它通過結
關于鬼筆環肽的物質介紹
鬼筆環肽是最早發現的環狀肽之一。它是從Amanita phalloides中分離出來的,并于1937年由Feodor Lynen和Ulrich Wieland結晶。它的結構不同尋常,因為它包含一個半胱氨酸-色氨酸鍵,形成一個雙環七肽。這種連接以前沒有被表征過,這使得鬼筆環肽的結構闡明變得更加困難
關于鬼筆環肽的毒性介紹
發現后不久,科學家將鬼筆環肽注射入小鼠體內,并通過IP注射發現其LD50為2 mg / kg。 當暴露于最小致死劑量時,這些小鼠死亡需要幾天時間。 鬼筆環肽中毒的唯一明顯副作用是極度饑餓。 這是因為鬼筆環肽僅通過膽汁鹽膜轉運蛋白被肝臟吸收。 一旦進入肝臟,鬼筆環肽會結合F-肌動蛋白,從而阻止其解
關于鬼筆環肽的生物合成介紹
鬼筆環肽是一種雙環七肽,含有不尋常的半胱氨酸-色氨酸鍵。 編碼鬼筆環肽合成的基因是死亡帽蘑菇中MSDIN家族的一部分,編碼34個氨基酸的前肽。 脯氨酸殘基位于七個殘基區域的兩側,稍后將變成鬼筆環肽。 翻譯后,必須對肽進行蛋白水解切除,環化,羥基化,使Trp-Cys交聯形成色氨酸,并差向異構化以形
關于鬼筆環肽的化學合成介紹
由于鬼筆環肽因其結合和穩定肌動蛋白聚合物的能力而被開發利用,但細胞無法輕易吸收,因此科學家發現鬼筆環肽衍生物在研究中更有用。 本質上,它遵循典型的使用羥脯氨酸的小肽合成。 合成的主要困難是色氨酸的形成(半胱氨酸-色氨酸交聯)。 以下是Anderson等人進行的一般合成機理。在2005年進行了a
關于鬼筆環肽用作顯影劑的介紹
熒光鬼筆環肽(紅色)標記內皮細胞中的肌動蛋白絲鬼筆環肽的特性使其成為研究F-肌動蛋白在細胞中分布的有用工具,方法是用熒光類似物標記鬼筆環肽并用它們對肌動蛋白絲染色以進行光學顯微鏡檢查。鬼筆環肽的熒光衍生物在定位活細胞或固定細胞中的肌動蛋白絲以及體外觀察單個肌動蛋白絲方面非常有用。開發了一種高分辨
簡述鬼筆環肽的作用機理
鬼筆環肽結合F-肌動蛋白,防止其解聚并中毒細胞。 鬼筆環肽特異性結合在F-肌動蛋白亞基之間的界面,將相鄰的亞基鎖定在一起。 鬼筆環肽(一種雙環七肽)與肌動蛋白絲的結合比與肌動蛋白單體的結合更緊密,從而導致肌動蛋白亞基從絲端解離的速率常數減小,這通過防止絲解聚而基本穩定了肌動蛋白絲。此外,發現鬼筆
關于環肽的命名介紹
環肽(cyclic peptides)的名稱由肽的名稱(放在括號內)加前綴“環(cyclo)”構成。由符號構成的肽的名稱放在括號“( )”內,前面也加上前綴“環(cyclo)”。完全由氨基酸殘基以正常肽鍵[真肽鍵(eupeptide linkage)]組成的肽對其中 D -型的氨基酸殘基需要使用
細胞骨架觀察實驗——鬼筆環肽顯示微絲蛋白染色法
實驗材料細胞試劑、試劑盒PBS三硝基甲苯甘油儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?蓋片培養細胞(70 %~80 %匯合),PBS洗3 次;2. ?2 %的甲醛/PBS 液(甲醛按37 %)固定3 分鐘;3. ?0.5 %的三硝基甲苯/PBS處理3 次,每次10 分鐘;4. ?PBS漂洗3 次;5. ?用羅
關于環肽的基本信息介紹
通常生物學中所指的環肽是指以氨基酸肽鍵形成的化合物,在植物化學中這一概念被擴大成以酰胺鍵形成的一類化合物,因此范圍被擴大至包括有機胺類和大環生物堿類,根據成環與否分為環肽和直鏈肽。 已報道的環肽類化合物具有多方面的生物活性,包括抗腫瘤、抗HIV、抗菌、抗瘧、安眠、抑制血小板聚集、降壓、抑制酪氨酸
技術和方案13-已固定細胞的肌動蛋白染色
試劑、試劑盒PBS固定液實驗步驟鬼筆環肽專一性地結合 F 肌動蛋白,熒光標記的鬼筆環肽染細胞與肌動蛋白抗體的染色模式類似。1.在 500 ml 三角瓶中振蕩培養 25 ml 酵母菌至密度為 2X107 個/ml。2.添加 17 ml 10% 甲醛(EM 電子顯微級)到培養基中至終濃度 4%,在酵母菌
關于抗凝劑的配制介紹
EDTA 常用EDTA的鈉鹽或鉀鹽作為抗凝劑,能與血液中的鈣離子結合成螯合物,而使鈣離子失去凝血作用,從而阻止血液凝固。 肝素 1%肝素溶液0.1ml于試管內,旋轉試管,使溶液均勻浸濕試管內壁,放入80~100℃烘箱烤干,每管能使5~10ml血液不凝。急性血壓實驗時可在充滿生理鹽水的動脈套
自動細胞成像系統進行細胞表型的多參數評估
簡介自動細胞成像是一種分析化合物對包括細胞形態,活力和標志物表達在內的細胞表型的影響的有效方法。這里,我們將展示ImageXpress? Pico自動細胞成像系統和CellReporterXpress 自動成像分析軟件如何應用于化合物影響的表型分析。成像和分析方法可提供工具來鑒定細胞活力,細
細胞骨架觀察實驗
鬼筆環肽顯示微絲蛋白染色法 抗管蛋白免疫染色法 考馬斯亮藍染色法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
肌動蛋白的影響簡介
有許多毒素可以通過阻止肌動蛋白聚合(latrunculin和細胞松弛素D)或通過穩定它(鬼筆環肽)來干擾肌動蛋白的動力學: Latrunculin是一種由海綿產生的毒素,它與G-肌動蛋白結合,阻止它與微絲結合。 細胞色素D是由真菌產生的生物堿,其與F-肌動蛋白的(+)末端結合,阻止添加新單體
細胞肌動蛋白的影響
有許多毒素可以通過阻止肌動蛋白聚合(latrunculin和細胞松弛素D)或通過穩定它(鬼筆環肽)來干擾肌動蛋白的動力學:Latrunculin是一種由海綿產生的毒素,它與G-肌動蛋白結合,阻止它與微絲結合。細胞色素D是由真菌產生的生物堿,其與F-肌動蛋白的(+)末端結合,阻止添加新單體。已發現Cy
肌動蛋白的生理影響
有許多毒素可以通過阻止肌動蛋白聚合(latrunculin和細胞松弛素D)或通過穩定它(鬼筆環肽)來干擾肌動蛋白的動力學:Latrunculin是一種由海綿產生的毒素,它與G-肌動蛋白結合,阻止它與微絲結合。細胞色素D是由真菌產生的生物堿,其與F-肌動蛋白的(+)末端結合,阻止添加新單體。已發現Cy
試劑盒內容及其配制
完整的ELISA試劑盒包含以下各組分: ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ???? (1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑); ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ???? (
關于谷胱甘肽的內容介紹
谷胱甘肽是一種作用廣泛的生理因子,它是由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸組成的一種三肽,廣泛分布于機體各器官內,在維持細胞生理功能方面起著重要的作用。本品活性成分為還原型谷胱甘肽,可參與體內三羧酸循環,激活各種酶,對不穩定的眼晶狀體蛋白質巰基有抑制作用,從而抑制白內障的發展,抑制角膜及視網膜病變,在角膜
關于緩激肽的內容介紹
緩激肽(bradykinin,BK)是一種具有心臟保護作用的9肽物質,它可以縮小急性缺血再灌注心肌的梗死面積,醫學證實BK還對缺血再灌注心肌具有延遲性保護作用。 1、直鏈9肽。為激肽的一種。其結構順序為Arg、Pro、Pro、Gly、Phe、Ser、Pro、Phe、Arg。具有舒血管和降血壓等
關于基因調控的內容介紹
表達的主要過程是基因的轉錄和信使核糖核酸(mRNA)的翻譯。基因調控主要發生在三個水平上,即 ①DNA水平上的調控、轉錄控制和翻譯控制; ②微生物通過基因調控可以改變代謝方式以適應環境的變化,這類基因調控一般是短暫的和可逆的; ③多細胞生物的基因調控是細胞分化、形態發生和個體發育的基礎,這
關于椎間盤突出的內容介紹
椎間盤突出可以發生在任何一個椎間盤,但無論在頸椎、胸椎和腰椎都是以其下部脊椎的椎間盤突出為多見。各部脊椎椎間盤突出的發生率以腰椎間盤突出為最多,約占椎間盤突出的85%,其次為頸椎間盤突出,約占15%,胸椎間盤雖有12個,但發生椎間盤突出的卻很少,Patterson等(1978)統計僅占0.15~
關于干細胞的內容介紹
干細胞是具有自我復制和多向分化潛能的原始細胞,是生命的起源細胞,是形成人體各種組織器官的原始細胞。干細胞技術是生物治療的前沿技術,稱之為再生醫學。干細胞是具有自我復制和多向分化的原始細胞,是機體的起源細胞,是形成人體各種組織器官的原始細胞。 干細胞是一類具有自我更新能力的多潛能細胞,在一定條件
關于食管疾病的內容介紹
(1)反流性食管炎:由于食管下端括約肌松弛,酸性胃液反流,引起食管炎癥、痙攣,表現為胸骨后或中上腹部燒灼性痛,有時可向背部放射而疑似心絞痛。但本病常于餐后平臥時發生,服抗酸藥可使之緩解。 (2)食管裂孔疝:常伴胃酸反流,其癥狀類似食管炎,常于飽餐后彎腰或平臥時發作,胃腸造影可明確診斷。 (3
關于胸膜腔的內容介紹
胸膜腔,是胸膜的臟壁兩層在肺根處相互轉折移行所形成的一個密閉的潛在的腔隙,由緊貼于肺表面的胸膜臟層和緊貼于胸廓內壁的胸膜壁層所構成,左右各一,互不相通,腔內沒有氣體,僅有少量漿液,可減少呼吸時的摩擦,腔內為負壓,有利于肺的擴張,有利于靜脈血與淋巴液回流。
關于膽紅素膽綠素的內容介紹
一般認為膽綠素是血紅素主要的終末代謝產物,也是家禽主要的膽汁色素。雞和火雞是以膽綠素鈉鹽的形式排入到膽汁中去的。禽類缺乏將膽綠素還原成膽紅素所必需的膽綠素還原酶,因此在禽類總膽汁色素中,膽紅素所占的百分數很低。 在正常禽類血清或血漿中,幾乎沒有或只有很少的膽紅素或膽綠素。有人研究發現,雞的膽紅
關于蔗糖的測定內容介紹
一、原理 樣品經除去蛋白質后,其中蔗糖經鹽酸水解轉化為還原糖,再按還原糖測定。水解前后還原糖的差值為蔗糖含量。 二、試劑 鹽酸:量取50mL鹽酸加水稀釋至100mL。 甲基紅指示液:0.1%乙醇溶液。 20%氫氧化鈉溶液。 其余試劑同GB 5009.8-2003《食品中還原糖的測定方
關于刻度吸管的內容介紹
品名:環標刻度吸管、分度吸量管、刻度移液管 貨號:1630、1630A 規格容量:0.1ml 、0.2ml 、0.5ml 、1ml 、2ml、 5ml 、10ml 、15ml、 20ml、 25ml、 50ml 用途分類:量出式--用于測量自量器內排出液體的體積,符號為"Ex" 量入式-
關于異煙肼的測定內容介紹
方法名稱:異煙肼原料藥—異煙肼的測定—氧化還原滴定法 應用范圍:該方法采用滴定法測定異煙肼原料藥中異煙肼的含量。 該方法適用于異煙肼原料藥。 方法原理:供試品加水溶解后,加甲基橙指示液,用溴酸鉀滴定液緩緩滴定至粉紅色消失,根據滴定液使用量,計算異煙肼的含量。 試劑: 碘化鉀、溴酸鉀滴定