用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗——酪蛋白激酶
試劑、試劑盒酪蛋白激酶分析緩沖液β-酪蛋白β-酪蛋白儲存液實驗步驟1. 在置于冰上的離心管內配制含下列成分的 20 μl 反應混合物：5X 酪蛋白激酶分析緩沖液 4 μl β-酪蛋白 &nbs......閱讀全文
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗——酪蛋白激酶
試劑、試劑盒酪蛋白激酶分析緩沖液β-酪蛋白β-酪蛋白儲存液實驗步驟1. 在置于冰上的離心管內配制含下列成分的 20 μl 反應混合物：5X 酪蛋白激酶分析緩沖液? ????????????????????????? 4 μl ?β-酪蛋白?? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??????
酪蛋白激酶分析實驗_用多肽底物
實驗方法原理酪蛋白激酶 I 可用多肽 AspAspAspGluGluSerIleThrArgArg 進行分析，最近釀蛋白激酶 II 也已被特異性的多肽底物分析，如 ArgArgArgGluGluGluThrGluGluGlu（下劃線殘基是磷酸受體）。兩個多肽均可通過精氨酸殘基結合到 P81 磷酸纖維
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗
試劑、試劑盒 ATP儲存液實驗步驟 一、Mg-ATP 儲存液的配制ATP 買來時通常是鈉鹽。大多數激酶需要 ATP 鎂鹽作為高效底物。有時可以用錳代替鎂。1. 20 mmol/L MgCl2 或 MgSO42. 20 mmol/L Na2-ATP以 1:1 的比例混合這兩種溶液，測 pH 值。慢慢將
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗
ATP儲存液的配制 依賴環核苷酸的蛋白質激酶 蛋白質激酶C 酪蛋白激酶 酪氨酸激酶 凝膠蛋白質激酶分析 ? ? ? ? ? ?
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗
ATP儲存液的配制依賴環核苷酸的蛋白質激酶蛋白質激酶C酪蛋白激酶酪氨酸激酶凝膠蛋白質激酶分析試劑、試劑盒ATP儲存液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?實驗步驟一、Mg-ATP 儲存液的配制ATP 買來時通常是鈉鹽。大多
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗—蛋白質激酶C
試劑、試劑盒PKC 分析緩沖液組蛋白 HI 儲存液磷脂酰絲氨酸甘油二油酸脂實驗步驟1. 在冰浴的離心管內配制如下 20 μl 反應混合物：5X PKC 分析緩沖液??????????????????????????????????????? 4 μl10 mg/ml 組蛋白 HI 儲存液 ?????
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗——酪氨酸激酶
試劑、試劑盒烯醇化酶酪氨酸激酶分析緩沖液實驗步驟1. 制備酸變性的烯醇化酶從兔肌肉中純化的烯醇化酶通常以硫酸銨沉淀或者懸液的形式存在。(1) 含 100 μg 的烯醇化酶，于 4℃ 全速離心 5 分鐘。(2) 去上清，加入含有 1 mmol/L DTT 的 10 μl 50 mmol/L HEPES
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析—凝膠蛋白質激酶分析
試劑、試劑盒Tris-HClDTT鹽酸胍尿素激酶分析緩沖液儀器、耗材SDS-PAGE實驗步驟1. 準備下列材料：SDS-PAGE 要用到的所有試劑50 mmol/L Tris-HCl，室溫（pH 8.0)，1 mmol/L DTT6 mol/L 鹽酸胍，50 mmol/L Tris-HCl，室溫（p
酪蛋白激酶分析實驗_用－β酪蛋白
實驗材料β-酪蛋白（溶于水）有酪蛋白激酶活性的酶樣品試劑、試劑盒[γ-32P] ATP 溶液酪蛋白激酶反應緩沖液TCASDS-PAGE 樣品緩沖液儀器、耗材30℃ 水浴P81 磷酸纖維素膜離心管離心機實驗步驟1. 每個鑒定反應按以下比例將各反應組分加入 1.5 ml 微量離心管中：4 μl 5 ×
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗——ATP儲存液的配制
試劑、試劑盒ATP儲存液實驗步驟一、Mg-ATP 儲存液的配制ATP 買來時通常是鈉鹽。大多數激酶需要 ATP 鎂鹽作為高效底物。有時可以用錳代替鎂。1. 20 mmol/L MgCl2?或 MgSO42. 20 mmol/L Na2-ATP以 1:1 的比例混合這兩種溶液，測 pH 值。慢慢將 p
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析實驗—依賴環核苷酸
試劑、試劑盒激酶分析緩沖液組蛋白 2B 儲存液環核苷酸依賴的蛋白質激酶分析緩沖液環核苷酸儲存液實驗步驟1. 在置于冰上的離心管內配制含下列成分的 20 μl 反應混合物：5X 激酶分析緩沖液 4 μl，10 mg/ml 組蛋白 2B 儲存液 1 μl，[γ-32P] ATP（終濃度為 5 μCi/5
酪蛋白激酶分析實驗
基本方案 用 β-酪蛋白 備擇方案 用多肽底物 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 β-酪蛋
酪蛋白激酶分析實驗
實驗方法原理 實驗材料?β-酪蛋白（溶于水）有酪蛋白激酶活性的酶樣品試劑、試劑盒?[γ-32P] ATP 溶液酪蛋白激酶反應緩沖液TCA SDS-PAGE 樣品緩沖液儀器、耗材?30℃ 水浴P81 磷酸纖維素膜離心管離心機實驗步驟 每個鑒定反應按以下比例將各反應組分加入 1.5 ml 微量離心管中：
用肽底物檢測蛋白質激酶的活性和特異性實驗
利用肽底物分析CaMKⅠ和Ⅱ試劑、試劑盒反應緩沖液儀器、耗材磷酸纖維素濾紙離心管實驗步驟1. 準備 P81 磷酸纖維素濾紙。(1) P81 磷酸纖維素濾紙切成 2cmX2cm 的方塊，折起一個角，用鉛筆在這里做個記號。(2) 將膜塊放在一大張非吸收性材料上，如有機玻璃或者蓋著鋁箔的纖維板。2. 設置
用肽底物檢測蛋白質激酶的活性和特異性實驗
利用肽底物分析酪蛋白激酶Ⅰ和Ⅱ 利用肽底物分析CaMKⅠ和Ⅱ ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 酪氨酸激酶分析緩沖液
用肽底物檢測蛋白質激酶的活性和特異性實驗1
利用肽底物分析酪蛋白激酶Ⅰ和Ⅱ試劑、試劑盒酪氨酸激酶分析緩沖液酪蛋白激酶肽底物溶液實驗步驟1. 在離心管里配制 50 μl 反應混合物：5X 酪氨酸激酶分析緩沖液?????????????????????????? 10 μl10 mmol/L 酪蛋白激酶肽底物溶液??????????????? 5
酪蛋白激酶的基本信息
中文名稱酪蛋白激酶英文名稱casein kinase;CK定 義催化肽鏈中鄰近酸性氨基酸殘基的絲氨酸/蘇氨酸磷酸化的酶。包括酪蛋白激酶1(CK1)和酪蛋白激酶2(CK2)。近來發現也能磷酸化酪氨酸殘基，具有廣譜底物特異性，因而具有多種生物功能。最初因能磷酸化酪蛋白而得此名，事實上CK2在體內并不參
酪蛋白激酶的基本信息
中文名稱酪蛋白激酶英文名稱casein kinase;CK定 義催化肽鏈中鄰近酸性氨基酸殘基的絲氨酸/蘇氨酸磷酸化的酶。包括酪蛋白激酶1(CK1)和酪蛋白激酶2(CK2)。近來發現也能磷酸化酪氨酸殘基，具有廣譜底物特異性，因而具有多種生物功能。最初因能磷酸化酪蛋白而得此名，事實上CK2在體內并不參
蛋白質磷酸化的蛋白磷酸激酶的純化與活性分析
蛋白磷酸激酶是能催化磷酸基團從磷酸供體轉移到受體蛋白的酶，通常ATP的γ位磷酸(或其它三磷酸核苷)為供體。國際生物化學聯合會根據受體氨基酸的特異性，將蛋白激酶分為以下幾類： ①以蛋白乙醇基作為受體的磷酸轉移酶稱為蛋白絲氨酸或蘇氨酸激酶; ②以苯基為磷酸受體的磷酸轉移酶稱為蛋白酪氨酸激酶;
蛋白激酶C異構體分析實驗
實驗方法原理 實驗材料 有 PKC 活性的酶樣品試劑、試劑盒 [γ-32P] ATP 溶液PKC 反應緩沖液TCASDS - PAGE 樣品緩沖液儀器、耗材 30℃ 水浴P81 磷酸纖維素膜離心管實驗步驟 1. 每個分析反應按以下比例將各反應組分加入 1.5 ml 微量離心管中：4 μl 5 × P
蛋白激酶C異構體分析實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 有 PKC 活性的酶樣品
蛋白激酶C異構體分析實驗
實驗材料有 PKC 活性的酶樣品試劑、試劑盒[γ-32P] ATP 溶液PKC 反應緩沖液TCASDS - PAGE 樣品緩沖液儀器、耗材30℃ 水浴P81 磷酸纖維素膜離心管實驗步驟1. 每個分析反應按以下比例將各反應組分加入 1.5 ml 微量離心管中：4 μl 5 × PKC 反應緩沖液1 μ
清華大學最新《PNAS》文章
來自清華大學生物科學與技術系，冷泉港實驗室的研究人員發現一種對于果蠅嗅覺長時程記憶形成必需的突變：AKAP Yu，這有利于進一步了解果蠅神經傳遞記憶形成過程中蛋白激酶A信號通路的作用。這一研究成果公布在《美國國家科學院刊》（PNAS）雜志上。 文章的通訊作者是來自清華大學生物科學與技術系的周海夢
蛋白質濃度分析實驗
BRADFORD分析（BIORAD) BCA分析(PIERCE) 三氯乙醇沉淀 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 標準蛋白質
蛋白質濃度分析實驗
BRADFORD分析（BIORAD)BCA分析(PIERCE)三氯乙醇沉淀實驗材料標準蛋白質 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒BSA ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
用分離的亞細胞組分進行激酶分析
實驗材料細胞器樣品試劑、試劑盒激酶分析緩沖液ATP儀器、耗材SDS-PAGE 凝膠實驗步驟1. 準備反應混合物：反應體積通常是 50~100 ml。5X 激酶分析緩沖液????????????????????????????? 10 μl[γ-32P] ATP（終濃度 5 μCi/5μmol/L)?
CSNK2A1基因的結構特點及主要作用
酪蛋白激酶II是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，可磷酸化酪蛋白等酸性蛋白質它參與多種細胞過程，包括細胞周期控制、凋亡和晝夜節律。激酶作為四聚體存在，由α、α素和兩個β亞基組成。α亞基具有催化活性，而β亞基則經歷自磷酸化。這個基因編碼的蛋白質代表α亞單位已發現該基因編碼不同蛋白質亞型的多個轉錄變體。
蛋白質根據蛋白質結構進行分類
纖維蛋白（fibrous protein）：一類主要的不溶于水的蛋白質，通常都含有呈現相同二級結構的多肽鏈許多纖維蛋白結合緊密，并為單個細胞或整個生物體提供機械強度，起著保護或結構上的作用。球蛋白(globular protein)：緊湊的，近似球形的，含有折疊緊密的多肽鏈的一類蛋白質，許多都溶于水
環核苷酸依賴性蛋白激酶分析實驗
實驗方法原理 實驗材料 具有環核苷酸依賴性蛋白激酶活性的酶樣品10 mg／ml 組蛋白 2B（溶于水）試劑、試劑盒 [γ-32P] ATP 溶液5 × 環核苷酸依賴性蛋白激酶反應緩沖液20 × 環核苷酸儀器、耗材 30℃ 水浴實驗步驟 1. 每個分析反應按以下比例將反應組分加入 1.5 ml 微量離
環核苷酸依賴性蛋白激酶分析實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 具有環核苷酸依賴性蛋白激酶活性的酶樣品