關于明膠酶譜法的基本原理介紹
明膠酶譜法的復性原理:在電泳過程中,SDS與樣品中的MMPs結合(當然是可逆性結合),破壞其氫鍵、疏水鍵而使MMPs不能發揮其分解明膠的作用,而只有當將膠置Triton中洗脫(最好是放在搖床上搖,30min/次,做2次或15min/次,4次。靜置于Trition中是不妥的。)時,由于SDS被Triton結合而去除,從而使MMPs恢復了活性。......閱讀全文
什么是酶譜法
每一種酶都有自己的特征譜線值,利用酶的這一特性,可以對生物的各種酶進行檢測。
明膠酶譜法操作
原理: ?? ? ? ? ?酶譜法的基本過程是先將樣品進行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明膠)電泳分離,然后在有二價金屬離子存在的緩沖 系統中使樣品中的MMP-2和MMP-9恢復活性,在各自的遷移位置水解凝膠里的明膠,最后用考馬斯亮藍將凝膠染色,再脫色,在 藍色背景下可
明膠酶譜法操作
明膠酶譜法 原理:? ? ? ? ? ? 酶譜法的基本過程是先將樣品進行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明膠)電泳分離,然后在有二價金屬離子存在的緩沖 系統中使樣品中的MMP-2和MMP-9恢復活性,在各自的遷移位置水解凝膠里的明膠,最后用考馬斯亮藍
明膠酶譜法操作
實驗概要酶譜法的基本過程是先將樣品進行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明膠)電泳分離,然后在有二價金屬離子存在的緩沖系統中使樣品中的MMP-2和MMP-9恢復活性,在各自的遷移位置水解凝膠里的明膠,最后用考馬斯亮藍將凝膠染色,再脫色,在藍色背景下可出現白色條帶,條帶的強弱與MMP-2
明膠酶譜法操作
明膠酶譜法原理:??????酶譜法的基本過程是先將樣品進行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明膠)電泳分離,然后在有二價金屬離子存在的緩沖系統中使樣品中的MMP-2和MMP-9恢復活性,在各自的遷移位置水解凝膠里的明膠,最后用考馬斯亮藍將凝膠染色,再脫色,在藍色背景下可出現白色條帶,條
關于明膠酶譜法的凝膠制備介紹
1、明膠酶譜法凝膠的制備—玻璃板對齊后放入夾中,垂直卡緊,加滿水檢漏。 2、明膠酶譜法凝膠的制備—配10%分離膠,APS和TEMED作用為促凝,最后灌膠前加。若板不漏水,則將水倒出,并用吸水紙洗凈后灌膠,灌至大約3/4處,上面加滿水壓平。 3、明膠酶譜法凝膠的制備—配濃縮膠,同樣地,APS和
關于明膠酶譜法的實驗步驟介紹
1、明膠酶譜法實驗步驟:取對數期的癌細胞在的無血清培養基DMEM中培養24h。 2、明膠酶譜法實驗步驟:次日收集上清液,將上清液移入離心管中 2000rpm 離心10min,-70℃儲存備用。 3、明膠酶譜法實驗步驟:根據細胞計數調整各組細胞培養上清液中的蛋白濃度(或者測定蛋白濃度調整使所上
關于明膠酶譜法的基本信息介紹
酶譜法的基本過程是先將樣品進行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明膠)電泳分離,然后在有二價金屬離子存在的緩沖系統中使樣品中的MMP-2和MMP-9恢復活性,在各自的遷移位置水解凝膠里的明膠,最后用考馬斯亮藍將凝膠染色,再脫色,在藍色背景下可出現白色條帶,條帶的強弱與MMP-2和M
關于明膠酶譜法的注意事項介紹
1、明膠酶譜法注意事項—制備聚丙烯酰胺凝膠時應注意排除氣泡 。 2、明膠酶譜法注意事項—明膠酶譜的活性受鈣離子,鋅離子,和pH值等因素的影響,因此緩沖液配制應嚴格準確,盡量用超純水,孵育溫度也掌握好。 3、明膠酶譜法注意事項—用大梳子。 4、明膠酶譜法注意事項—孵育液的pH最好在7.5-7
關于明膠酶譜法的基本原理介紹
明膠酶譜法的復性原理:在電泳過程中,SDS與樣品中的MMPs結合(當然是可逆性結合),破壞其氫鍵、疏水鍵而使MMPs不能發揮其分解明膠的作用,而只有當將膠置Triton中洗脫(最好是放在搖床上搖,30min/次,做2次或15min/次,4次。靜置于Trition中是不妥的。)時,由于SDS被Tr
明膠酶譜實驗
實驗方法原理細胞外基質(ECM)是細胞生存的重要內環境,不僅含有膠原、糖蛋白、蛋白多糖等成分,而且含有大量的蛋白酶、細胞因子、黏附分子。ECM,尤其是其中的基底膜,是腫瘤轉移過程中必須克服的生理屏障。基質金屬蛋白酶家族(MMPs)可以降解細胞外基質,幫助腫瘤細胞克服這一屏障并為細胞增殖提供空間。MM
明膠酶譜實驗
實驗材料 細胞勻漿組織提取物試劑、試劑盒 聚丙烯酰胺凝膠明膠濃縮膠Tris-甘氨酸緩沖液Triton X-100過硫酸銨甲醇醋酸考馬斯亮藍蛋白質上樣緩沖液儀器、耗材 電泳糟凝膠成像儀實驗步驟 在整個測定過程中,要避免可抑制酶活性的成分污染;Triton X-100洗滌過程要充分,這對恢復酶的活性十分
明膠酶譜實驗
明膠酶譜法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 細胞外基質(ECM)是細胞生存的重要內環境,不僅含有膠原、糖蛋白、蛋白多糖等成分,而且含有大量的蛋白酶、細胞因子、黏附分子。ECM,
明膠酶譜實驗
明膠酶譜法可用于:(1)明膠酶A(MMP-2)和明膠酶B(MMP-9)的測定;(2)測定明膠酶的抑制劑;(3)細胞與組織中明膠酶的定位。實驗方法原理細胞外基質(ECM)是細胞生存的重要內環境,不僅含有膠原、糖蛋白、蛋白多糖等成分,而且含有大量的蛋白酶、細胞因子、黏附分子。ECM,尤其是其中的基底膜,
明膠酶譜實驗
明膠酶譜法可用于:(1)明膠酶A(MMP-2)和明膠酶B(MMP-9)的測定;(2)測定明膠酶的抑制劑;(3)細胞與組織中明膠酶的定位。實驗方法原理細胞外基質(ECM)是細胞生存的重要內環境,不僅含有膠原、糖蛋白、蛋白多糖等成分,而且含有大量的蛋白酶、細胞因子、黏附分子。ECM,尤其是其中的基底膜,
什么是酶譜?
中文名稱酶譜英文名稱zymogram定 義酶分離實驗中區帶電泳的記錄。樣品中各種酶按照所帶電荷和分子大小被分離,這些酶的活性可以通過特殊的染色反應顯示,可以從酶譜上區分酶的類型和相對量。細菌樣品的酶譜可輔助細菌分類。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),酶(二級學科)
YIJI基質金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法電泳分析試劑盒...
YIJI基質金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法電泳分析試劑盒使用說明主要用途YIJI基質金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法(gelatin-zymography)電泳分析試劑是一種旨在通過明膠聚丙烯酰胺凝膠電泳的方法,在分離、蛋白復性、底物水解、染色等一系列步驟下,觀察并半定量深藍色背景中的無色清晰的基質金
YIJI基質金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法電泳分析試劑盒
YIJI基質金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法電泳分析試劑盒產品說明書(中文版) 主要用途 YIJI基質金屬蛋白酶(MMP)明膠酶譜法(gelatin-zymography)電泳分析試劑是一種旨在通過明膠聚丙烯酰胺凝膠電泳的方法,在分離、蛋白復性、底物水解、染色等一系列步驟下,觀察并半定
極譜法及伏安法的介紹
防腐鋼管內結疤缺點是存在于鋼管內表面,雷同于黃豆粒大小的凹坑,結疤內大部分有呈灰褐色或灰黑色的異物。內結疤的影響因素有:除氧化物劑、噴吹工藝、芯棒光滑等因素。底下就隨防腐鋼管廠家小編來看一下怎么管制防腐鋼管的內表面缺點: 1、除氧化物劑 氧化物要求在芯棒預穿時處于熔融形態。其力度等嚴
什么是極譜法?
極譜法(polarography)通過測定電解過程中所得到的極化電極的電流-電位(或電位-時間)曲線來確定溶液中被測物質濃度的一類電化學分析方法。于1922年由捷克化學家J.海洛夫斯基建立。極譜法和伏安法的區別在于極化電極的不同。極譜法是使用滴汞電極或其他表面能夠周期性更新的液體電極為極化電極;
能譜法的簡介
中文名稱能譜法英文名稱spectroscopy定 義用具有一定能量的粒子束轟擊試樣物質,根據被激發的粒子能量(或被試樣物質反射的粒子能量和強度)與入射粒子束強度的關系圖(稱為能譜)實現試樣的非破壞性元素分析、結構分析和表面物化特性分析的方法。應用學科機械工程(一級學科),分析儀器(二級學科),能譜
超氧化物歧化酶活性測定——極譜氧電極法
超氧化物歧化酶別名肝蛋白、奧谷蛋白,簡稱SOD。它是一種源于生命體的活性物質,能消除生物體在新陳代謝過程中產生的有害物質。對人體不斷地補充SOD具有抗衰老的特殊效果。1969年McCord發現這種蛋白,并且發現了它們的生物活性,弄清了它催化過氧陰離子發生歧化反應的性質,所以正式將其命名為超氧化物歧化
直流極譜法和交流極譜法的基本信息介紹
一、直流極譜法 又稱恒電位極譜法。通過測定電解過程中得到電流-電位曲線來確定溶液中被測成分的濃度。其特點是電極電位改變的速率很慢。它是一種廣泛應用的快速分析方法,適用于測定能在電極上還原或氧化的物質。 二、交流極譜法 將一個小振幅(幾到幾十毫伏)的低頻正弦電壓疊加在直流極譜的直流電壓上面,
關于極譜法和伏安法對比介紹
極譜法和伏安法都是電化學分析法,通過測定電解過程中所得的電流-電壓(或電位-時間)曲線來確定溶液中被測定物質的濃度。它們和同類中其它電化學分析法的區別在于電解池中使用一個極化電極和一個去極化電極。極譜法與伏安法的區別在于極化電極的不同。凡使用滴汞電極或其它表面能夠周期性更新的液體電極者稱極譜法;
出現電勢譜法的簡介
中文名稱出現電勢譜法英文名稱appearance potential spectroscopy定 義通過逐漸增強入射電子束的能量,測量試樣被激發的X射線或俄歇電子能量的變化以分析試樣表面成分,元素電子束縛能表面電子結構的電子能譜法。應用學科機械工程(一級學科),分析儀器(二級學科),能譜和射線分析
離子散射譜法的簡介
中文名稱離子散射譜法英文名稱ion-scattering spectroscopy定 義使離子束傾斜入射,在一定角度上測量散射離子能譜,除氫、氦外可分析全部元素和同位素。應用學科機械工程(一級學科),分析儀器(二級學科),能譜和射線分析儀器-能譜和射線分析儀器分析原理(三級學科)
電子能譜法的簡介
中文名稱電子能譜法英文名稱electron spectroscopy定 義記錄試樣物質被激發的電子能譜的分析方法。應用學科機械工程(一級學科),分析儀器(二級學科),能譜和射線分析儀器-能譜和射線分析儀器分析原理(三級學科)
脈沖極譜法的簡介
脈沖極譜法是一種極譜法。在滴汞電極每一汞滴成長后期的某一時刻,于線性變化的直流電壓上疊加一個方波電壓,并在方波電壓單周期的后期記錄電解電流的方法。它是所有極譜方法中靈敏度高的方法之一。所用支持電解質濃度可以很稀,若用三電極裝置,還能在沒有支持電解質的溶液中進行測定。
概述極譜法的分類
極譜法分為控制電位極譜法和控制電流極譜法兩大類。在控制電位極譜法中,電極電位是被控制的激發信號,電流是被測定的響應信號。在控制電流極譜法中,電流是被控制的激發信號,電極電位是被測定的響應信號。控制電位極譜法包括直流極譜法、交流極譜法、單掃描極譜法、方波極譜法、脈沖極譜法等。控制電流極譜法有示波極
離子中和譜法的簡介
中文名稱離子中和譜法英文名稱ion neutralizing spectrum定 義用單能惰性氣體離子束轟擊試樣表面,當入射的離子從試樣的表面的原子中獲取一個電子而被中和時,能激發出俄歇電子,通過測量該俄歇電子的能譜,分析試樣表面電子狀態、吸附狀態、成分和能帶的電子能譜法。應用學科機械工程(一級學