DNA純化實驗——DNA凝膠回收試劑盒純化法
DNA純化可用于：（1）獲得高純度的DNA；（2）濃縮DNA；（3）測序、遺傳信息分析等分子生物學應用。實驗方法原理本試劑盒適合從各種瓊脂糖凝膠中提取多至 8 μg DNA（70 bp-10 Kb），回收率為 60-85%。瓊脂糖凝膠在溫和的緩沖液(DE-A 溶液)中溶解，其中的保護劑能防止線狀 DNA 在高溫下降解，然后在 DE-B 溶液的作用下使 DNA 選擇性結合到膜上。純化的 DNA 純度高，并保持片斷完整性和高生物活性，可直接用于連接、體外轉錄、PCR 擴增、測序、微注射等分子生物學實驗。 實驗材料PCR產物單鏈DNA質粒DNA試劑、試劑盒DNA凝膠回收試劑盒儀器、耗材DNA 制備管離心管實驗步驟一、試劑盒組成、貯存、穩定性 1. 說明書，耗材：DNA 制備管、2 ml 離心管、1.5 ml 離心管。 2. Buffer DE-A：凝膠熔化劑，含 DNA 保護劑，防......閱讀全文
DNA純化實驗
實驗方法原理 硅膠膜可在高鹽條件下結合DNA，又可在低鹽條件下與DNA分離。用于清潔目的的含DNA溶液中的引物、單核苷酸、酶、礦物油、鹽離子等雜質因為沒有與DNA相似的特性，所以被分離開來。實驗材料?PCR產物試劑、試劑盒?PCR清潔試劑盒儀器、耗材?96孔DNA制備板96孔深孔板96孔V型底板實驗
DNA純化實驗
PCR清潔試劑盒純化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 硅膠膜可在高鹽條件下結合DNA，又可在低鹽條件下與DNA分離。用于清潔目的的含DNA溶液中的引物、單核苷酸、酶、礦物油
純化DNA實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 TBS抽提緩沖液儀器、耗材 離心管實驗步驟 1. 根據樣品類型，從下列方法中選一個作為步驟 1 進行操作。(1) 細胞樣品① 單層培養的細胞以用冰預冷的 TBS 將單層細胞洗滌 2 次，用刮棒把細胞刮入約 0.5 ml 的 TBS 中，將細胞懸液轉移到冰浴的離心管中，
純化DNA實驗
從哺乳動物細胞或組織分離DNA 基因組DNA的快速純化 純化質粒（堿裂解法） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
純化DNA實驗
從哺乳動物細胞或組織分離DNA 基因組DNA的快速純化 純化質粒（堿裂解法） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
純化DNA實驗_基因組DNA的快速純化
試劑、試劑盒尾部緩沖液蛋白酶 K儀器、耗材離心管玻璃棒實驗步驟第 1 天1. 大約 1.5 cm 長的尾部活檢樣品放在一個 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部緩沖液的小離心管中，加 35 ul 10 mg/ml 蛋白酶 K，在 55℃ 振搖溫育過夜。尾部緩沖液（配 25 ml）50 mmol/L
DNA純化實驗——DNA凝膠回收試劑盒純化法
DNA純化可用于：（1）獲得高純度的DNA；（2）濃縮DNA；（3）測序、遺傳信息分析等分子生物學應用。實驗方法原理本試劑盒適合從各種瓊脂糖凝膠中提取多至 8 μg DNA（70 bp-10 Kb），回收率為 60-85%。瓊脂糖凝膠在溫和的緩沖液(DE-A 溶液)中溶解，其中的保護劑能防止線狀 D
DNA純化去雜質實驗
這周我們來討論一項常用的技術，即使常用但仍引起部分人核酸分離焦慮癥。那就是基因組DNA的純化去雜質。場景是這樣的：你有一份采自南太平洋中部一個偏僻小島上首次發現的古老蘭花品種根際土壤樣品。你使用了非PowerSoil Kit法提取其中的微生物DNA。最終DNA含有太多雜質，無法PCR擴增。因此需要去
純化DNA實驗_純化質粒（堿裂解法）
實驗材料大腸桿菌試劑、試劑盒LB葡萄糖緩沖液乙酸鉀儀器、耗材離心管實驗步驟1. 單個大腸桿菌克隆接種到 2 ml 含適當抗生素的 LB 中。37℃ 劇烈振蕩孵育 5~8 小時。或者可以培養過夜使飽和。2. 倒 1.5 ml 培養液到已作標記的微量離心管中。把剩下的培養液存放在 4℃。3. 在微量離心
DNA純化實驗——PCR清潔試劑盒純化法
實驗方法原理硅膠膜可在高鹽條件下結合DNA，又可在低鹽條件下與DNA分離。用于清潔目的的含DNA溶液中的引物、單核苷酸、酶、礦物油、鹽離子等雜質因為沒有與DNA相似的特性，所以被分離開來。?實驗材料PCR產物試劑、試劑盒PCR清潔試劑盒儀器、耗材96孔DNA制備板96孔深孔板96孔V型底板實驗步驟一
高質量－DNA－的純化實驗
實驗材料 乳腺瘤組織試劑、試劑盒 EDTA異丙醇裂解緩沖液細胞核裂解緩沖液Triton 裂解緩沖液儀器、耗材 水浴鍋破璃棒實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑EDTA，100 mmol/L異丙醇裂解緩沖液10 mmol/LTris-HCl1mmol/LEDTA150 mmol/LNaCl0.5
高質量－DNA－的純化實驗
應用經過修改的 Miller 等（1988) 的鹽沉淀方法純化 DNA，不使用酚和氯仿，比較溫和，有效防止了長的染色體 DNA 的斷裂。在第 9 章中講述了另一種 DNA 純化的方法。這種方法可以沉淀細胞核，已被成功地用于對血液樣品、培養的細胞和乳腺瘤組織DNA 的純化。本實驗來源于 PCR 實驗指
高質量－DNA－的純化實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 乳腺瘤組織 試劑、試劑盒 EDTA 異丙醇裂解緩沖液 細胞核裂解緩沖液
柱離心法純化質粒DNA實驗
實驗原理1. 離心柱結構：特殊硅基質吸附材料，特異性吸附DNA，而RNA與蛋白質穿過。在正常情況下，核酸表面覆蓋了一層由水分子組成的親水薄膜，以維持其水溶性。高濃度鹽離子的加入破壞了核酸表面親水薄膜的相對有序排列，形成了疏水環境。在此環境中，核酸與硅膠膜能有效結合，而蛋白質、代謝產物和其他污染物則不
質粒DNA的大量提取和純化實驗
堿法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細菌 試劑、試劑盒 ST
質粒DNA的大量提取和純化實驗
實驗材料 細菌試劑、試劑盒 STE酚 氯仿NaClPEG乙醇儀器、耗材 離心管離心機抽干機實驗步驟 1、取培養至對數生長后期的含pBS質粒的細菌培養液250 ml，4 ℃下5000 g離心15分鐘,棄上清,將離心管倒置使上清液全部流盡。2、將細菌沉淀重新懸浮于50 ml用冰預冷的STE中（此步可省略
動物基因組DNA－的分離純化實驗
鹽溶法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 根據核糖核蛋白與脫氧核糖核蛋白在一定濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同進行分離, 然后用蛋白質變性沉淀劑去除蛋白,使核酸釋放出來, 再利用
動物基因組DNA－的分離純化實驗
實驗方法原理 根據核糖核蛋白與脫氧核糖核蛋白在一定濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同進行分離, 然后用蛋白質變性沉淀劑去除蛋白,使核酸釋放出來, 再利用核酸不溶于乙醇的性質將核酸析出, 達到分離提純的目的。在0 . 14 mol/ L 的氯化鈉溶液中, RNA 核蛋白(RNP) 溶解度大, 而DNA
純化DNA實驗_從哺乳動物細胞或組織分離DNA
基因純化，可以用于（1）對大量提取的質粒DNA進行純化；（2）常用的方法有柱層析法和氯化銫梯度離心法。實驗材料細胞試劑、試劑盒TBS抽提緩沖液儀器、耗材離心管實驗步驟1. 根據樣品類型，從下列方法中選一個作為步驟 1 進行操作。(1) 細胞樣品① 單層培養的細胞以用冰預冷的 TBS 將單層細胞洗滌
MinElute－DNA純化技術
?? 作分子生物學實驗，核酸純化、酶切、克隆算是最基本的步驟了。因為要做定向克隆，通常要作雙酶切。為了省時省事兒，我們常常想方設法把兩個酶放在一起切。可是事情并非總那么稱心如意——兩個酶經常在一起鬧別扭，不是反應溫度不同啦，就是Buffer不同，有時候兩個酶切位點連在一起，必須先切一個再切另一個，否
DNA純化手冊1
Purification of plasmid DNA (miniprep) with high yields using diatomaceous earthKyung-Soo Kim and Charles K. PallaghySchool of Botany, La Trobe Univer
DNA純化的方法
DNA純化首先利用瓊膠電泳將不同分子量的DNA片段分開,將某一特定分子量區域的瓊膠切下,利用DNA extraction kit將DNA從瓊膠中溶出并濃縮.實驗材料( 6X gel-loading dye:15% Ficoll 400, 0.25% bromophenol blue,0.25% xy
DNA純化手冊2
Key points to observe:?a. Use a?endA1-?E. coli?strain for plasmid propagation and isolation whenever possible.?The instability of plasmids isolated fr
質粒DNA的純化
聚乙二醇沉淀法質粒DNA氯化銫-溴化乙錠梯度平衡離心法純化閉環DNA(一)聚乙二醇沉淀法提取質粒DNA1)將核酸溶液所得]轉入15mlCorex 管中，再加3ml 用冰預冷的5mol/L LiCl溶液，充分混勻，用合適轉頭于4℃下以10 000轉/分離心10分鐘。LiCl可沉淀高分子RNA。2)將上
DNA純化的方法
DNA純化首先利用瓊膠電泳將不同分子量的DNA片段分開,將某一特定分子量區域的瓊膠切下,利用DNA extraction kit將DNA從瓊膠中溶出并濃縮.實驗材料( 6X gel-loading dye:15% Ficoll 400, 0.25% bromophenol blue,0.25% xy
質粒DNA的大量提取和純化實驗——堿法
在制作酶譜、測定序列、制備探針等實驗中需要高純度、高濃度的質粒DNA,為此需要大量提取質粒DNA。大量提取的質粒DNA一般需進一步純化,常用柱層析法和氯化絕梯度離心法。實驗材料細菌試劑、試劑盒STE酚 氯仿NaClPEG乙醇儀器、耗材離心管離心機抽干機實驗步驟1、取培養至對數生長后期的含pBS質粒的
從全血中純化基因組－DNA－實驗方法
試劑、試劑盒 乙醇異丙醇RNA 酶 A全血儀器、耗材 瓊脂糖凝膠電泳離心管Wizard 基因組 DNA 純化試劑盒實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑乙醇，70%，室溫異丙醇, 室溫RNA 酶 A將 RNA 酶 A 溶解于 DNA 再水合液中至終濃度為 4 mg/ml, 煮沸 10min 以去
從全血中純化基因組－DNA－實驗方法
用于從全血（10 ml) 中分離基因組 DNA 的 Wizard 基因組 DNA 純化試劑盒建立在一個四步程序基礎上的。純化程序的第一步包括血紅細胞的裂解、可溶部分的棄除，隨后是白細胞及其細胞核的裂解。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。試劑、試劑盒乙醇異丙醇RNA 酶 A
從全血中純化基因組－DNA－實驗方法
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 乙醇 異丙醇 RNA 酶 A 全血 儀器、耗材 瓊脂糖凝膠電泳
聚乙二醇沉淀法純化質粒DNA實驗
這種方法最早由 Richaed Treisman ( 英國，倫敦，ICRF) 參照 Lis 的工作而設計。Lis 是最早用聚乙二醇（PEG ) 分離不同大小 DNA 的人。Treisman 法被廣泛用于堿裂解法制備的質粒 DNA 的純化。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理這