常用血細胞化學染色原理和臨床意義
(1)過氧化物酶染色的原理和臨床意義[原理] 粒細胞和單核細胞胞漿中含有的過氧化物酶(peroxidase,POX)能將底物過氧化氫分解,產生新生態氧,它將四甲基聯苯胺氧化為聯苯胺藍。聯苯胺藍自我脫氫氧化,顯棕色四甲基苯醌二胺,再加入亞硝基鐵氰化鈉與聯苯胺藍結合,可形成穩定的藍色顆粒,定位于細胞漿內酶所在的部位。[臨床意義] 臨床上主要用于急性白血病類型的鑒別:急性淋巴細胞白血病原、幼淋巴細胞POX染色均呈陰性反應;急性粒細胞白血病 原粒細胞POX染色呈局灶分布的陽性反應;急性早幼粒細胞白血病 顆粒增多的早幼粒細胞POX染色呈強陽性反應;急性單核細胞白血病原、幼單核細胞POX染色多呈細小顆粒弱陽性反應。(2)過碘酸-雪夫染色的原理和臨床意義[原理] 過碘酸-雪夫(Pexiodic acid-schiff,PAS)染色又稱糖原染色。胞漿內存在的糖原或多糖類物質(如黏多糖、黏蛋白、糖蛋白、糖酯等)中的乙二醇基(CHOH-......閱讀全文
細胞化學染色
細胞化學染色,是一種以形態為基礎,結合運用化學或生物化學技術對血細胞內各種化學成分作定位、定性及半定量分析的方法。用于研究血細胞生理、病理和化學結構;臨床上為某些血液病的診斷、鑒別診斷、療效觀察、預后監測和發病機制的探討,提供重要依據。血細胞化學染色的基本要求是在原位顯示細胞成分和結構,反應產物應是
細胞化學染色方法
實驗原理1. 細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的 DNA 和 RNA 出現不同的呈色反應,一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,甲基綠染高聚分子的 DNA 呈藍綠色,呱咯寧染低聚分子的 RNA 呈紅色。由此對細胞中的 DNA
細胞化學染色方法
實驗原理1. 細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的 DNA 和 RNA 出現不同的呈色反應,一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,甲基綠染高聚分子的 DNA 呈藍綠色,呱咯寧染低聚分子的 RNA 呈紅色。由此對細胞中的 DNA 和 RNA
血細胞化學染色的染色方法—-糖原染色(PAS)的介紹
(1)血細胞化學染色的染色方法— 糖原染色(PAS)的原理:過碘酸將血細胞內的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結合,形成紫色化合物,定位于細胞質中。 (2)血細胞化學染色的染色方法— 糖原染色(PAS)的操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液
血細胞化學染色的染色法—鐵染色的介紹
(1)血細胞化學染色的染色法—鐵染色的原理:人體內有一定量的以鐵蛋白和含鐵血黃素形式貯存的鐵元素,這些鐵在酸化的低鐵氰化鉀溶液中反應,生成藍色的亞鐵氰化鐵沉淀(普魯士藍),定位于含鐵的部位。 (2)血細胞化學染色的染色法—鐵染色的操作方法:將染色液滴加在骨髓小粒豐富的骨髓涂片上,室溫20~30
血細胞化學染色的常見染色方法介紹
1.過氧化物酶染色(POX) (1)原理:過氧化物酶能分解過氧化氫而釋放出新生態氧,使無色聯苯胺氧化成藍紫色,后者與硝普鈉結合形成藍黑色的顆粒,沉淀于細胞質中。 (2)操作方法:將固定液滴加在新鮮骨髓或血涂片上,固定30秒,流水沖洗,晾干。將應用也滴加在血膜上,作用10~15分鐘,流水沖洗。
細胞化學染色分類技術
染色技術是分類白細胞的經典依據,但瑞氏染色這類形態學復合染色不能被自動分析所模擬。一般光學技術只能測到光強等量的參數,而不能測得波長等屬性的參數。因此,自動分類就要求用單染來甄別。過氧化氫是生物氧化還原反應的最重要氧化劑,在吞噬過程中廣泛應用。因此,可以根據細胞過氧化氫酶染色來推斷白細胞的吞噬功能強
細胞化學染色檢查(一)
細胞化學是細胞學和化學相結合的一門學科。細胞化學染色是根據化學反應的原理,應用涂片染色的方法,觀察細胞的化學成分及其變化的重要方法。各種類型血細胞的化學成分、分布及其量不盡相同,且在病理情況下,血細胞的化學成分可發生改變。因此,細胞化學染色不僅對研究血細胞的代謝活動、生理功能,而且對生理和病理情況下
細胞化學染色檢驗(三)
【染色結果及正常血細胞反應】陽性反應為細胞質中出現藍色沉淀。1. 原粒細胞陰性或陽性,早幼粒細胞至成熟中性粒細胞呈陽性反應,不被氟化鈉抑制。2. 原始單核細胞陰性或陽性,幼單核細胞和成熟單核細胞均呈陽性,能被氟化鈉抑制。3. 淋巴細胞陰性或陽性,不被氟化鈉抑制。4. 巨核細胞、血小板均呈陽性。5.
細胞化學染色檢驗(二)
二、 蘇丹黑B染色(sudan black B,SBB)【原理】蘇丹黑B(sudan black B,SBB)是一種脂溶性重氮染料,能溶解于細胞內含脂質的結構中,使脂類物質呈現棕黑或深黑色。【染色結果及正常血細胞反應】陽性結果為細胞中出現棕黑或深黑色顆粒。1. 各種血細胞SBB染色結果與POX染色大
細胞化學染色檢查(二)
? (2)臨床意義? ? 1)幫助鑒別戈謝細胞和尼曼-匹克細胞,前者ACP 染色為陽性反應,后者為陰性反應。? ? 2)幫助診斷多毛細胞白血病。多毛細胞白血病時多毛細胞的酸性磷酸酶染色為陽性反應,此酶耐L-酒石酸的抑制作用。淋巴肉瘤細胞和慢性淋巴細胞白血病的淋巴細胞,酸性磷酸酶染色也呈陽性反應,但此
什么是細胞化學染色
細胞化學染色是細胞學和化學相結合而形成的一門學科,它以細胞形念學為基礎,結合運用化學反應的原理對血細胞內的各種化學物質做定性定位和半定量分析的方法.一)固定固定有物理法與化學法,物理法為干燥和火焰固定,化學法最常用的是甲醛、乙醇、丙酮和醋酸等。(二)顯示1、偶氮偶聯法:利用人工合成的酶底物,在酶作用
細胞化學染色檢驗(一)
細胞化學是組織學的一個分支,是在細胞形態學的基礎上研究細胞的生物化學成分,及其定位、定量及代謝功能狀態的學科。在細胞形態學的基礎上,運用化學反應的原理對血細胞內的各種生化組成及其代謝產物(酶類、脂類、糖類、鐵、蛋白質、核酸等)作定性、定位、半定量分析的方法。細胞化學染色臨床上主要用于:①輔助判斷白血
免疫組織/細胞化學染色1
一 基本原理免疫組織/細胞化學是利用抗原抗體具有高度特異性結合反應的原理,采用已知抗體檢測組織或細胞的抗原物質,然后以適當的方式顯示其結合信號以證明組織或細胞是否存在未知抗原,并進行定性、定位或定量的研究。二 基本步驟 1 三步法:以SP(鏈霉卵白素-過氧化物酶)試劑盒為例: 石蠟切片脫蠟至
免疫組織/細胞化學染色2
四 結果分析 編號 陽性片 待檢片 陰性對照 結論 1 - -
血細胞化學染色的染色法—α醋酸萘酚酯酶染色(αNAE)的介紹
(1)血細胞化學染色的染色法—α-醋酸萘酚酯酶染色(α-NAE)的原理:α-醋酸萘酚酯酶能將基質液中的α-醋酸萘酚水解,產生α-萘酚,再與重氮染料偶聯,可形成不溶性的有色沉淀,沉淀于細胞質中。 (2)血細胞化學染色的染色法—α-醋酸萘酚酯酶染色(α-NAE)的操作方法:將甲醛生理鹽水滴加在2張
血細胞化學染色:過氧化酶染色的原理
實驗原理:血細胞內的過氧化酶分解H2O2 ,釋出初生態氧,使無色聯苯胺氧化成藍色聯苯胺,后者進一步變成棕黑色化合物,沉著于胞質內。
特殊染色及酶組織化學染色液怎么用
特殊染色及酶組織化學染色液是利用凍結或固定的切片,在一定的條件下(具有酶的底物等)全酶進行催化作用,產生一種可見產物,沉淀在酶所在的部位,最終通過顯微鏡對酶的活性進行定位或定量研究。特殊染色是為了顯示與確定組織或細胞中的正常結構或病理過程中出現的異常物質、病變及病原體等,需要分別選用相應的顯示這些成
什么是特殊染色及酶組織化學染色診斷
特殊染色是為了顯示與確定組織或細胞中的正常結構或病理過程中出現的異常物質、病變及病原體等,需要分別選用相應的顯示這些成分的染色方法進行染色。包括:膠原纖維染色(Masson等)、網狀纖維染色、彈力纖維染色、肌肉組織染色(磷鎢酸蘇木素)、脂肪染色(蘇丹III)、糖原染色(PAS)、粘液染色(PAS)等
臨床化學檢查方法介紹糖原染色
糖原染色介紹: 細胞內含1,2-乙二醇基的多糖類經過碘酸氧化后產生醛基,與特殊染液作用,使無色品紅變成紅色化合物,沉淀于胞質之中。紅色的深淺與細胞中起反應的1,2-乙二醇基的量呈正比。糖原染色正常值: 正常情況下,紅細胞系統的原、幼紅細胞和成熟紅細胞;粒細胞系統的原粒細胞、原單核細胞和大多數淋巴
細胞化學詞匯染色體外DNA
中文名稱:染色體外DNA英文名稱:extrachromosomal DNA定 義:存在于染色體外的DNA。包括線粒體DNA、葉綠體DNA和質粒DNA等。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
常用血細胞化學染色2
三、α一醋酸荼盼醋酶染色 ? 染色原理 血細胞內的α-醋酸荼酚酯酶(α-naphythyol acetate esterase,α-NAE)在pH中性的條件下可水解基質液中的α-醋酸荼酚,釋放出α-荼酚與基質液中的重氮鹽偶聯形成不溶的有色沉淀,定位于細胞質內酶所在的部位。本試驗
免疫熒光細胞化學染色方法
一、標本制作 可制作涂片、印片、細胞單層培養物、組織切片,經適當固定或不固定,作免疫熒光染色用。 二、熒光抗體染色方法 (一)直接法 1.染色 切片經固定后,滴加經稀釋至染色效價如1:8或1:16的熒光抗體(如兔抗人γ-球蛋白熒光抗體或兔抗人IgG或IgA熒光抗體等),在室溫或37℃染色30
免疫組織化學染色
實驗概要本說明適用于沒有全自動染色機或 capillary gap system(如 Shandon Sequenza)等的實驗室。可用移液器人工加試劑,也適用于全自動或半自動系統。培養箱應配備有加濕器避免組織變干。變干發生在任何階段最后都會導致非特異性染色及高背景染色。帶密封蓋的淺塑料盒,底部鋪上
免疫熒光細胞化學染色方法
免疫熒光細胞化學染色方法 一、標本制作 可制作涂片、印片、細胞單層培養物、組織切片,經適當固定或不固定,作免疫熒光染色用。 二、熒光抗體染色方法 (一)直接法 1.染色 切片經固定后,滴加經稀釋至染色效價如1:8或1:16的熒光抗體(如兔抗人γ-球蛋白熒光 抗體或兔抗人 IgG 或 IgA 熒光抗體
細胞化學詞匯染色體外DNA
中文名稱:線粒體DNA外文名稱:Mitochondrial DNA,mtDNA定?????? 義:線粒體DNA是線粒體中的遺傳物質,線粒體能為細胞產生能量(ATP),是在細胞線粒體內發現的脫氧核糖核酸特殊形態。線粒體是為細胞提供能量(ATP)的細胞器。一個線粒體中一般有多個DNA分子。
組織細胞化學染色的范圍
結締組織、肌肉組織、神經組織、血液、造血組織、內分泌細胞、骨組織、軟骨組織、蛋白質(氨基酸、酶類)、核酸、多糖、脂類、色素類、內外源性沉著物、鹽類或金屬類、病原微生物等。
免疫組織化學染色
實驗概要本說明適用于沒有全自動染色機或 capillary gap system(如 Shandon Sequenza)等的實驗室。可用移液器人工加試劑,也適用于全自動或半自動系統。培養箱應配備有加濕器避免組織變干。變干發生在任何階段最后都會導致非特異性染色及高背景染色。帶密封蓋的淺塑料盒,底部鋪上
常用血細胞化學染色3
五、中性粒細胞堿性磷酸酶染色染色原理中性粒細胞堿性磷酸酶染色的方法有Gomori鈣-鉆法和kaplow偶氮偶聯法,因為鈣-鉆法操作較為繁瑣且所需時間長,偶氮偶聯法的試劑盒操作方便,染色時間短,故目前國內常用偶氮偶聯法,下面介紹該方法的原理。kaplow偶氮偶聯法成熟中性粒細胞堿性磷酸酶(neutro
雙重染色法免疫熒光組織化學染色步驟
1.一步雙染色法先將兩種熒光標{己抗體按適當比例混合(A+B),按直接法進行染色。2.二步雙染色法先用TRITC標記的A抗體進行免疫熒光染色,再用FITC標記的B抗體染色,根據兩種抗體的動物種屬不同,可用直接法也可用間接法,結果A抗原呈現橘紅色熒光,而B抗原呈現黃綠色熒光。在應用中,常用的方法是免疫