DNA分子標記技術研究進展(一)
遺傳標記在遺傳學的建立和發展過程中有著舉足輕重的作用,隨著遺傳學的進一步發展和分子生物學的異軍突起,遺傳標記先后相應地經歷了形態標記、細胞學標記、生化標記和DNA分子標記四個發展階段。前三種標記都是以基因表達的結果為基礎的,是對基因的間接反映;而DNA分子標記則是DNA水平遺傳變異的直接反映,它具有能對各個發育時期的個體、各個組織、器官甚至細胞作出“中性”以及操作簡便等特點。正是這些特點,奠定了它極其廣泛的應用基礎。DNA分子標記本質上是指能反映生物個體或種群間基因組中某種差異的特異特DNA片段[1]。DNA分子標記大多以電泳譜帶的形式表現生物個體之間DNA差異,通常也稱為DNA的指紋圖譜。在過去10多年中,分子標記技術得到了突飛猛進的發展,至今已有幾十種分子標記技術相繼出現,并在基因庫構建、基因克隆、基因組作圖、基因定位、作物遺傳育種、植物親緣關系鑒別等各個研究領域得到了廣泛的應用。 1.第一代分子標記1.1&nbs......閱讀全文
DNA分子標記技術研究進展(一)
遺傳標記在遺傳學的建立和發展過程中有著舉足輕重的作用,隨著遺傳學的進一步發展和分子生物學的異軍突起,遺傳標記先后相應地經歷了形態標記、細胞學標記、生化標記和DNA分子標記四個發展階段。前三種標記都是以基因表達的結果為基礎的,是對基因的間接反映;而DNA分子標記則是DNA水平遺傳變異的直接反映,它具有
DNA分子標記技術研究進展(二)
2.第二代分子標記2.1 SSR標記技術??? 在真核生物基因組中存在許多非編碼的重復序列,如重復單位長度在15~65個核苷酸的小衛星DNA(Minisatellite DNA),重復單位長度在2~6個核苷酸的微衛星DNA(Microsatellite DNA)。小衛星和微衛星DNA分布
基于數字PCR的單分子DNA定量技術研究進展(一)
摘要 數字PCR是一項針對單分子目標DNA的絕對定量技術。該技術是將含有DNA模板的反應溶液分配到大量獨立的反應室中并且發生擴增反應,通過統計反應室中的陽性信號來定量DNA的拷貝數。DNA樣品在反應室中隨機和獨立分布是單分子成功擴增和準確定量D NA拷貝數的關鍵因素。本文綜述了數字PCR的發展歷
DNA快速檢驗全球研究進展(一)
影視作品《神探狄仁杰》中狄仁杰征求助手李元芳的意見從而借對話引出對案情分析的橋段,其中會包含對遇害者的情況分析診斷,也就是“古代法醫”的部分工作。1247年(中國南宋理宗淳祜七年),時任湖南提點刑獄兼大使行府參議官的宋慈編寫完成《洗冤集錄》,這是世界歷史上第一本以死亡方式系統編輯的法醫學著作。《洗冤
SSR分子標記技術及其在構建玉米DNA指紋庫上的應用1
SSR分子標記技術及其在構建玉米DNA指紋庫上的應用 康麗麗 周鴻飛(沈陽農業大學農學院) 玉 米是一種重要的飼用、糧用和工業加工作物,在國民經濟中占有重要的地位。玉米育種方法的改進對農業發展具有重要意義。長期以來,育種家們大多數是借用易于 鑒別的形態學和同工酶等遺傳標記來輔助育種,并取得了很大成功
SSR分子標記技術及其在構建玉米DNA指紋庫上的應用2
2玉米DNA指紋庫的構建2. 1利用SSR分子標記構建玉米DNA指紋庫目 前,國內外對玉米種質鑒定采用的遺傳標記仍以形態標記為主,參考同工酶和種子貯藏蛋白標記。但形態標記的表現受環境影響較大,鑒定工作量大,周期長,受季 節限制。同工酶和種子貯藏蛋白標記多態性不夠豐富,同工酶還存在組織和器官特異性,取
基于數字PCR的單分子DNA定量技術研究進展(二)
2 ?qPCR與dPCR比較研究 qPCR是目前DNA定量研究的主要技術,該技術通過在PCR反應體系中加入熒光結合染料(SYBR green I) 或熒光標記的探針( 如TaqMan Probes) ,利用實時積累的熒光信號監測整個擴增過程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析,以此來評估
基于數字PCR的單分子DNA定量技術研究進展(四)
NGS 是一種識別和確認未知致病菌的前景廣闊的技術,然而其在生物防御和公共健康應用等方面的時效性,卻往往因為缺乏快速、有效、可靠的自動DNA樣品制備方法而受到限制。為了突破這種限制,Kim 等設計了一種基于流體分布元件的數字微流體(DMF) 平臺,使得多子系統模塊能夠進入自動NGS庫樣品
基于數字PCR的單分子DNA定量技術研究進展(三)
3.2 dPCR在轉基因植物檢測方面的研究?轉基因植物及相關食品的定量分析主要測定轉入基因的相對含量。目前常用qPCR作為核酸定量方法。dPCR可以不需要校準物而準確測量低拷貝的DNA分子。Corbisier 等用dPCR分析了提取于MON810玉米種子的外源檢測基因和hmg基因的拷貝數,驗證了dP
微衛星DNA分子標記及其應用(一)
微衛星(Microsatellite,MS)又稱短串聯重復(Short Tandem Repeats,STR)或簡單序列重復(Simple Sequnce Repeat,SSR),是指基因組中以少數幾個核苷酸(多數為2-4個)為單位多次串聯重復組成的長達幾十個核苷酸的序列。其中最常見的是雙核
現代分子育種研究進展
從過去到現在,世界各國的頂尖育種工程師們一直都在為未來的發展提供更好的產品而努力。祖輩們和上一代的園丁們精心挑選出最適合當地條件的作物種子并加以妥善保存,以期在來年或今后更長的時間內能獲得好的收成。以番茄為例,在經過幾十年的選擇性育種后,各種地方品種的種子表現出了明顯的特定區域特征。這些品種隨著時間
線粒體DNA甲基化研究進展
DNA 甲基化是表觀遺傳修飾的重要方式之一. 線粒體是真核細胞內的關鍵細胞器, 線粒體DNA(mtDNA)編碼部分線粒體基因, 其 mtDNA 的甲基化修飾可能引起所編碼基因的異常表達, 從而參與調節生理和病理過程. 近期來自西安交通大學生命科學與技術學院的研究人員就目前 mtDNA 甲基化及其
DNA快速檢驗全球研究進展(三)
芯片毛細管電泳具有進樣量少,靈敏度高,分析速度快等特點,非常適合法醫DNA-STR的快速檢驗。毛細管電泳芯片由于尺寸小,可施加較大場強,所以在幾秒鐘內就可完成對樣品的分離,微陣列毛細管電泳芯片可實現高通量檢測則成為目前學者研究的熱點。2002年Emrich CA等[31]報道的將高通量384孔毛
DNA快速檢驗全球研究進展(二)
2.2 快速擴增檢驗一種常用的快速擴增研究方法是選用合適的快速酶并結合快速循環程序對現有的常規試劑盒進一步優化,以達到縮短PCR擴增時間為目的。如2008年Vallone等[13]將PyroStart和SpeedSTAR兩種酶結合使用,PyroStart酶(Fermentas,Glen Burn
DNA分子雜交原理
DNA分子雜交的原理是,具有互補堿基序列的DNA分子,可以通過堿基對之間形成氫鍵等,形成穩定的雙鏈區.如果兩DNA有一段相同堿基的話,就能形成氫鍵,且形成穩定的雙鏈區
重組DNA分子的轉化實驗原理和實驗步驟(一)
1實驗原理DNA重組分子在體外構建完成后,必須導入特定的受體細胞,使之無性繁殖并高效表達外源基因或直接改變其遺傳性狀,這個導入過程及操作統稱為重組DNA分子的轉化。對于不同的受體細胞,往往采取不同的轉化戰略。1.1 DNA重組分子的常用轉化方法1.1.1 Ca 2 誘導轉化1970年Mandel和H
DNA分子雜交的意義
分類學上不同物種的DNA分子之間可以進行分子雜交,但是,遠緣物種的DNA分子之間進行雜交分子的可能性遠比近緣物種的要小得多。例如,細菌與真核細胞DNA分子之間形成雜交分子的可能性很小;不同細菌的 DNA分子之間雜交時,能形成某些互補片段;人的DNA分子與小鼠的 DNA分子之間雜交時,只有少量的人DN
量子點標記技術實現分子馬達在活細胞的示蹤
基于量子點的單分子熒光示蹤技術,對于體外研究分子馬達在細胞骨架上的行走模式具有重要意義。目前對于細胞內分子馬達運動特性的研究,是通過對內吞體、黑素體等細胞器的示蹤而間接實現的。這些細胞器通過分子馬達運輸,因此,對細胞器的運動監測可間接分析分子馬達的運動特性。巴黎第六大學Giovanni Capp
RFLP標記技術
實驗概要DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction ?Fragment Length ?Polymorphism,限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同品種(個體)基因組的限制性內切酶的酶
AFLP標記技術
實驗概要AFLP也是通過限制性內切酶片段的不同長度檢測DNA多態性的一種DNA分子標記技術。但AFLP是通過PCR反應先把酶切片段擴增,然后把擴增的酶切片段在高分辨率的順序分析膠上進行電泳,多態性即以擴增片段的長度不同被檢測出來(附圖)。實驗中酶切片段首先與含有與其共同粘末端的人工接頭連接,連接后的
RAPD標記技術
實驗概要運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(randomly ?amplifiled polymorphic ?DNA,隨機擴增的多態性DNA.)該RAPD技術建立于PCR基礎上,它是利用一系列(通常數百個)不同的隨機排列堿基順序的寡聚核苷酸單鏈(通常為十聚體)
血流感染分子診斷的研究進展
血流感染(blood stream infection)是一種嚴重的全身感染性疾病,其中僅有30%~40%的血流感染者可以通過培養的方式發現致病菌[ 1, 2]。引起血流感染的微生物包括細菌、真菌、病毒及寄生蟲,陽性血培養可為臨床提供病原學診斷的依據。血流感染初期的24 h內,若未能及時
分子印跡微萃取技術的研究進展
微萃取技術是一種將分析物高效萃取富集于微體積的聚合物或有機溶劑中,集采樣、萃取、濃縮、進樣于一體的無(少)溶劑、易于與其他技術在線聯用的樣品前處理方法。分子印跡聚合物是一種具有強大分子識別功能的材料,具有高效的選擇特異性,可從復雜樣品中選擇性分離富集目標分析物,在微萃取技術中得到了廣泛的應用。本文綜
RNAi的研究進展(一)
RNA干擾(RNA interference ,RNAi) 現象是一種進化上保守的抵御轉基因或外來病毒侵犯的防御機制。將與靶基因的轉錄產物mRNA 存在同源互補序列的雙鏈RNA(double strand RNA ,dsRNA) 導入細胞后,能特異性地降解該mRNA ,從而產生相應的功能表型缺失
DNA--RNA-寡聚核苷酸的準確分子質量測定(一)
1. 前言隨著人們對核酸結構和功能的深入了解,特異性結合或者裂解致病基因的核酸藥物也逐漸成為了藥物研究的新熱點, 核酸藥物的作用效率高、應用范圍廣,可以對傳統藥物進行補充,并且在前期的臨床診斷中也可以起到重要的指示作用。核酸藥物主要是指各種具有不同功能的寡聚核糖核苷酸(RNA)或者寡聚脫氧核糖核
Nat-Chem:一種分子能直接剪斷DNA摧毀癌細胞
??????? 日前,美國耶魯大學的研究人員發現一種由海洋細菌產生的物質能夠通過破壞DNA的方式殺滅癌細胞,新發現為低劑量化療藥物的研發鋪平了道路。相關論文發表在5月11日出版的《自然·化學》雜志上。 物理學家組織網5月13日(北京時間)報道稱,這種物質名為lomaiviticin A,先前已經被
DNA分子雜交技術的簡介
DNA分子雜交的基礎是,具有互補堿基序列的DNA分子,可以通過堿基對之間形成氫鍵等,形成穩定的雙鏈區。在進行DNA分子雜交前,先要將兩種生物的DNA分子從細胞中提取出來,再通過加熱或提高pH的方法,將雙鏈DNA分子分離成為單鏈,這個過程稱為變性。然后,將兩種生物的DNA單鏈放在一起雜交,其中一種
簡述DNA分子雜交的意義
分類學上不同物種的DNA分子之間可以進行分子雜交,但是,遠緣物種的DNA分子之間進行雜交分子的可能性遠比近緣物種的要小得多。例如,細菌與真核細胞DNA分子之間形成雜交分子的可能性很小;不同細菌的 DNA分子之間雜交時,能形成某些互補片段;人的DNA分子與小鼠的 DNA分子之間雜交時,只有少量的人
簡述DNA分子雜交的意義
分類學上不同物種的DNA分子之間可以進行分子雜交,但是,遠緣物種的DNA分子之間進行雜交分子的可能性遠比近緣物種的要小得多。例如,細菌與真核細胞DNA分子之間形成雜交分子的可能性很小;不同細菌的 DNA分子之間雜交時,能形成某些互補片段;人的DNA分子與小鼠的 DNA分子之間雜交時,只有少量的人
簡述DNA分子雜交的意義
分類學上不同物種的DNA分子之間可以進行分子雜交,但是,遠緣物種的DNA分子之間進行雜交分子的可能性遠比近緣物種的要小得多。例如,細菌與真核細胞DNA分子之間形成雜交分子的可能性很小;不同細菌的 DNA分子之間雜交時,能形成某些互補片段;人的DNA分子與小鼠的 DNA分子之間雜交時,只有少量的人