免疫酶染色法
(一) 原理 免疫酶染色法亦稱免疫酶標組織化學法。標本制備后，首先將其內源酶抑制，接著即可進行免疫酶染色檢查。常規的免疫酶染色法可分為直接法和間接法兩種。前者固定標本中的抗原直接與酶標抗體結合，達到酶染色目的；后者是抗原先與其抗體(第一抗體)結合后，再與酶標抗體(第二抗體)結合，而進行酶染色的。免疫酶染色法的酶底物產物為不溶性物質，可沉著于抗原上，使其顯色。間接法雖然多一步驟，但使用范圍廣。此外，酶標記第二抗體可用酶標記A或生物素與親和素系統等代替。 (二) 材料和方法(以檢測空腸彎曲菌為例) 1 材料 (1) 去除內源性酶試劑：1%H2O2甲醇溶液。 (2) 空腸彎曲菌免疫血清(第一抗體)：CjC37(雞源)和CjP5(豬源)抗血清，自制。 (3) 驢抗兔IgHRP(第二抗體)：自制。 (4) 稀釋液與洗液(pH值74 )。 (5) 底物溶液(DABH2O2)： ①T......閱讀全文
免疫酶染色試驗——斑點免疫酶染色法
斑點免疫酶染色法 (dot-ELISA)實驗 （以檢測輪狀病毒抗原為例說明）實驗方法原理該技術是進行 ELISA 測定時，借用了免疫印跡技術的某些原理和方法，利用硝酸纖維素膜為固相載體，使抗原抗體反應在膜上進行，結合在硝酸纖維素膜上的酶抗體結合物通過將底物分解成不溶性的產物而沉積，在硝酸纖維素膜上形
免疫酶染色試驗_細胞免疫酶染色法
細胞免疫酶染色法（以檢測血清中 EB 病毒 IgA 抗體為例說明）實驗方法原理免疫酶染色試驗 (immunoenzymatic staining test, IEST) 是用酶（如辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等）標記已知抗體或抗原，與相應抗原或抗體結合，形成酶標記抗體－抗原復合物，復合物中的酶在遇到相
免疫酶染色試驗_細胞免疫酶染色法
細胞免疫酶染色法（以檢測血清中 EB 病毒 IgA 抗體為例說明）實驗方法原理免疫酶染色試驗 (immunoenzymatic staining test, IEST) 是用酶（如辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等）標記已知抗體或抗原，與相應抗原或抗體結合，形成酶標記抗體－抗原復合物，復合物中的酶在遇到相
免疫酶染色試驗
實驗方法原理 免疫酶染色試驗 (immunoenzymatic staining test, IEST) 是用酶（如辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等）標記已知抗體或抗原，與相應抗原或抗體結合，形成酶標記抗體－抗原復合物，復合物中的酶在遇到相應的底物時，能催化底物產生顏色反應，根據有色產物的有無及其濃
免疫酶染色法
實驗概要免疫酶染色法亦稱免疫酶標組織化學法。標本制備后，首先將其內源酶抑制，接著即可進行免疫酶染色檢查。常規的免疫酶染色法可分為直接法和間接法兩種。前者固定標本中的抗原直接與酶標抗體結合，達到酶染色目的；后者是抗原先與其抗體(第一抗體)結合后，再與酶標抗體(第二抗體)結合，而進行酶染色的。免疫酶染色
免疫酶染色法
實驗概要免疫酶染色法亦稱免疫酶標組織化學法。標本制備后，首先將其內源酶抑制，接著即可進行免疫酶染色檢查。常規的免疫酶染色法可分為直接法和間接法兩種。前者固定標本中的抗原直接與酶標抗體結合，達到酶染色目的；后者是抗原先與其抗體(第一抗體)結合后，再與酶標抗體(第二抗體)結合，而進行酶染色的。免疫酶染色
免疫酶染色法
(一) 原理 免疫酶染色法亦稱免疫酶標組織化學法。標本制備后，首先將其內源酶抑制，接著即可進行免疫酶染色檢查。常規的免疫酶染色法可分為直接法和間接法兩種。前者固定標本中的抗原直接與酶標抗體結合，達到酶染色目的；后者是抗原先與其抗體(第一抗體)結合后，再與酶標抗體(第二抗體)結合，而進
免疫酶染色試驗_免疫印跡法
免疫印跡法 （以檢測流行性出血熱病毒結構蛋白和 NP 核蛋白為例說明）實驗方法原理免疫印跡法 是將電泳與免疫酶染色結合起來的一種方法。它先經電泳 (SDS--PAGE)將病毒結構蛋白進行分離，通過轉印將被分離的各區帶原位轉移到硝酸纖維素膜 (nitrocellulose membrane, NC 膜
酶免疫細胞化學染色操作指南1
一、材料和試劑1、玻片：須用免疫組化專用玻片，或用2%多聚賴氨酸包被處理玻片。2、5-10%正常山羊血清封閉液，用PBS配。3、3%牛血清白蛋白（BSA），用PBS配。4、0.01M pH7.4 PBS5、1% BSA-PBS（含0.05% Tween20）6、AEC底物（1）底物緩沖液（20X）
酶免疫細胞化學染色操作指南2
2、加3% H2O2，細胞片20ul/孔，培養板100ul/孔，使充分覆蓋住細胞。3、室溫10分鐘后，甩掉 H2O2，用PBS輕輕淋洗2分鐘。用濾紙吸干細胞周圍水份，96孔在濾水紙上扣干，但注意保持細胞濕潤。三、封閉細胞片用5-10%正常山羊血清（20ml/孔），細胞板用2-5%BSA（PBS配制）
酶標記抗體免疫組化染色知識點
（一）直接法：將酶直接標記在特異性抗體上，與組織細胞內相應的抗原進行特異性反應，形成抗原-抗體-酶復合物，最后用酶底物顯色。直接法的優點在于操作簡便及特異性強，缺點是敏感性低，制備的抗體種類有限。 （二）間接法：將酶標記在第二抗體上，先將第一抗體（特異性抗體）與相應的組織抗原結合，形成抗原抗體
免疫金染色
中文名稱免疫金染色英文名稱immuno-gold staining定 義將用膠體金（直徑大于20 nm）標記的間接抗體或A蛋白再與特異性抗體結合，在光鏡下就可見紅色的反應物出現，不需進行呈色反應的方法。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
酯酶染色
酯酶是分解各種酯類的水解酶，根據機制的不同，分為非特異性酯酶和特異性酯酶，非特異性酯酶易水解像acetate和butyrate之類具有短鏈的酯類，特異性酯酶易水解像naphthol AS‐D cholroaceteta之類的具有長鏈的酯類。單核‐巨噬細胞類為非特異性酯酶反應染色，中性粒細胞類
免疫金銀染色
中文名稱免疫金-銀染色英文名稱immuno-gold-silver staining;IGSS定 義使已在抗原位置沉積的金顆粒發揮催化作用，促進銀離子被氫醌還原為銀原子，后者圍繞金顆粒形成一層銀殼，利用膠體金和膠體銀的雙重標記抗體對抗原進行染色的方法。增強了檢測靈敏度。應用學科細胞生物學（一級學科
雙酶雙底物的雙重免疫染色—多種組織抗原配對的雙重酶
改良的 EnVision-HRP/AP 雙酶雙底物的雙重免疫染色（間接法）——Ki-67-CK20 等多種組織抗原配對的雙重酶實驗步驟1. 恒冷切片或石蠟切片，厚 4～6 μm，常規處理。2. 0.1％NaN3+0.3％H2O2/TBS（50 mmol/L，pH 7.8）或 0.3％H2O2/甲醇，
雙酶雙底物的雙重免疫染色—淋巴瘤輕鏈κ、λ的雙重酶標記
實驗步驟1. 石蠟切片常規脫蠟至水（若用含汞固定液固定的組織，則需用內含 0.5％ 碘的乙醇溶液脫汞 5 min，乙醇濃度為 70％，經自來水洗后以 2.5％ 硫代硫酸鈉浸洗 1 min，水洗）。2. 0.3％H2O2 甲醇液浸泡切片 30 min，自來水洗，蒸餾水洗，入 PBS（0.01mol/L
堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶（APAAP）免疫組化染色技術
實驗方法原理APAAP（Alkaline phosphatase-anti-alkaline phosphatase technique）技術的基本原理為：抗鼠IgG抗體作為橋梁，將鼠源性識別細胞抗原的第一抗體與鼠源性的抗堿性磷酸酶單克隆抗體-堿性磷酸酶復合物相連接，使之成為Ag，-Ab1－Ab2-
熒光免疫染色和DAPI染色實驗步驟
免疫染色實驗方法和步驟免疫染色(immunol staining)包括免疫熒光(immunol fluorescence)、免疫組化(immunol histochemistry)、免疫細胞化學(immunol cytochemistry)等，可以參考如下步驟進行操作。?1. 樣品準備(Sample
免疫熒光染色技術
抗原物質固定劑固定條件（min）蛋白質抗原95%～100%乙醇室溫3～10酶、激素丙?酮4℃?30免疫球蛋白四氯化碳病?毒丙酮、四氯化碳、無水乙醇室溫5～10或4℃?30～60多糖、細菌等微火加熱，甲醇、10%甲醛、丙酮室溫5～10或4℃?30～60類?脂?（異嗜性抗原）10%甲醛，10%佛茂爾（F
細胞免疫熒光染色
實驗概要細胞免疫熒光染色實驗原理利用抗原抗體反應，鑒定細胞是否表達某種蛋白。細胞經固定后，用特異性抗體（一抗）識別目的蛋白，再用一抗的抗體（二抗）識別一抗，二抗一般耦聯熒光基團或化學反應基團，通過熒光或化學發光顯示目的蛋白。主要試劑防淬滅劑、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、1
LSCM免疫熒光染色
免疫熒光染色?使用預冷的?PBS?緩沖溶液洗滌細胞，去除殘留的培養液。立即加入?4%?多聚甲醛(PFA)固定液。在室溫固定15 min。用?PBS?洗滌殘留的固定液后，用?0. 5% Triton X-100?處理細胞?5 min，這樣可以通透細胞膜，使抗體等大分子能通過細胞膜，進到固定細胞的內部。
組織免疫熒光染色
概述： 織免疫熒光染色多是使用組織的冰凍切片，因為在切片過程中基本上暴露了細胞和細胞核內結構，故不需要使用細胞通透劑(Triton-100,NP-40)。染色后的切片應放置冰箱內避光保存，防止熒光淬滅。常用的熒光素有：異硫氰酸(fluorescein isothiocyanate,FITC,發
免疫組織化染色
實驗材料 新鮮組織試劑、試劑盒 二甲苯酒精H2O2抗原修復液枸櫞酸鈉緩沖液石蠟福爾馬林PBSDAB蘇木素樹膠丙酮打孔液檸檬酸鈉APES儀器、耗材 恒溫搖床高壓鍋塑料切片架耐溫玻璃容器-80℃冰箱恒冷冰凍切片機載玻片實驗步驟 一．石蠟切片免疫組化染色實驗步驟：1．石蠟切片脫蠟至水：（石蠟切片染色前應置
免疫組織化染色
驗材料新鮮組織試劑、試劑盒二甲苯酒精H2O2抗原修復液枸櫞酸鈉緩沖液石蠟福爾馬林PBSDAB蘇木素樹膠丙酮打孔液檸檬酸鈉APES儀器、耗材恒溫搖床高壓鍋塑料切片架耐溫玻璃容器-80℃冰箱恒冷冰凍切片機載玻片實驗步驟一．石蠟切片免疫組化染色實驗步驟：1．石蠟切片脫蠟至水：（石蠟切片染色前應置60℃ 1
乳酸脫氫酶染色
【臨床意義】 ?乳酸脫氫酶（LDH）是糖酵解過程中的一個酶，近來發現LDH及其五種同功酶在胚胎和腫瘤組織的同功酶譜很相似，因此它在肝癌、白血病等的臨床診斷上也具有重要價值。 原始紅細胞胞漿內LDH顆粒比較豐富，隨著紅細胞系統進一步分化，酶的量逐漸減少。在晚幼紅細胞內僅能看到少數幾個顆粒。
酯酶染色的概述
酯酶存在于不同的白細胞中，根據不同的底物顯示酶的活性，可將酯酶分成三種，包括萘酚-AS-D氯乙酸酯酶、α-乙酸萘酚酯酶和α-丁酸萘酚酯酶。萘酚-AS-D氯乙酸酯酶為粒系細胞所特有，又稱特異性酯酶染色。α-乙酸萘酚酯酶可存在于多種細胞，故又稱非特異性酯酶染色。α-丁酸萘酚酯酶主要存在于單核系細胞中
異相酶免疫試驗和均相酶免疫試驗
Ag為待測抗原，AgAb-E為結合標記物，Ab-E為游離標記物。若抗原-抗體反應影響標記物中酶的活性,如酶活性消失，即結合標記物(AgAb-E)無酶活性，游離標記物(Ab-E)有酶活性； (1) 檢測時不需分離結合標記物(AgAb-E)和游離標記物(Ab-E),檢測體系中標記物酶活性(Ab-E
免疫組織/細胞化學染色1
一 基本原理免疫組織/細胞化學是利用抗原抗體具有高度特異性結合反應的原理，采用已知抗體檢測組織或細胞的抗原物質，然后以適當的方式顯示其結合信號以證明組織或細胞是否存在未知抗原，并進行定性、定位或定量的研究。二 基本步驟 1 三步法：以SP（鏈霉卵白素-過氧化物酶）試劑盒為例： 石蠟切片脫蠟至
免疫組織/細胞化學染色2
四 結果分析 編號 陽性片 待檢片 陰性對照 結論 1 - -
細胞免疫熒光染色實驗
實驗原理利用抗原抗體反應，鑒定細胞是否表達某種蛋白。細胞經固定后，用特異性抗體（一抗）識別目的蛋白，再用一抗的抗體（二抗）識別一抗，二抗一般耦聯熒光基團或化學反應基團，通過熒光或化學發光顯示目的蛋白。主要試劑防淬滅劑、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec