內含肽
內含肽intein是位于宿主蛋白質中的一段插入序列,前綴in一取自inventing, 后綴tein一取自protein。與內含肽相對應的另一專用術語是外顯肽。內含肽基因不是一個獨立的基因, 必須插入于外顯肽基因才能復制轉錄,可從前體蛋白中切除并將兩側外顯肽連接起來成為成熟蛋白質。其對應的核苷酸序列嵌合在宿主蛋白對應的核酸序列之中,與宿主蛋白基因存在于同一開放閱讀框架(open reading frame,ORF)內,并與宿主蛋白質基因進行同步轉錄和翻譯,當翻譯形成蛋白質前體后,內含肽從宿主蛋白質中切除,從而形成成熟的具有活性的蛋白質。......閱讀全文
內含肽
內含肽intein是位于宿主蛋白質中的一段插入序列,前綴in一取自inventing, 后綴tein一取自protein。與內含肽相對應的另一專用術語是外顯肽。內含肽基因不是一個獨立的基因, 必須插入于外顯肽基因才能復制轉錄,可從前體蛋白中切除并將兩側外顯肽連接起來成為成熟蛋白質。其對應的核苷酸序列
內含肽的結構
被人們公認的標準內含肽的結構模體為:N端剪接區+中部歸巢核酸內切酶區域+ C剪接區域 。兩端剪接區參與蛋白質的剪接,中部區域參與蛋白質歸巢過程,少數內含肽不含核酸內切酶區域。全功能型內含肽包括8個保守區或基序,一般由244~1650個氨基酸堿基組成,大部分在500個氨基酸殘基左右。自導引歸巢核酸內切
內含肽的種類
從內含肽的內部有無自導引歸巢核酸內切酶結構域,可將內含肽分為2種類型。一種是全功能型內含肽(maxi—intein),具有蛋白剪接活性和自導引核酸內切酶序列(homingendonuclease);另一種是微型內含肽(mini—intein),只有蛋白剪接活性。其中自導引歸巢核酸內切酶結構域的缺失在
內含肽的應用內含肽可作為治療線粒體疾病藥物靶標
內含肽可作為治療線粒體疾病藥物靶標粒體DNA(mtDNA)突變,將導致mtDNA編碼、與氧化磷酸化有關的13種蛋白質的突變,從而起很多罕見的疾病,這也可能是人類衰老的原因之一。由于該13種蛋白質高度的疏水性,通過轉基編碼表達的有生物活性的蛋白質很難從細胞質中進入線粒體。根據內含肽的作用機制,首先在胞
內含肽的分離純化
內含肽具自切割特性的這種特性而實現目標蛋白與親和標簽分離的目的。內含肽在蛋白質純化中的應用修飾后(位點特異性突變)的內含肽經誘導能夠介導N端或C端單側肽鍵斷裂。首先將編碼親和標簽、內含肽及目標蛋白的基因序列連接在一起,在合適的宿主系統中表達出一個標簽-內含肽-目標蛋白的三聯體,利用修飾后的內含肽構建
內含肽的應用介紹
內含肽序列加上C端外顯肽的第一個氨基酸殘基包含了蛋白剪接的全部信息,甚至可以介導非“原配”的外源蛋白質的剪接。內含肽與上游和下游的外顯肽序列之間幾乎沒有同源性,所以,如果外源目的蛋白替換天然外顯肽,內含肽仍然可以保持剪接活性。但是利用好這一特點對蛋白質人工剪接需要考慮一些影響因素:外源蛋白及剪接位點
內含肽的作用機制
內含肽剪接是一個快速、高效的反應過程,前體蛋白在細胞中幾乎分離不到。反應亦不需要任何輔助因子、酶和ATP能量,其催化結果是將內含肽兩側的外顯肽通過肽鍵連接成成熟的天然肽。基于剪接位點氨基酸殘基的化學性質以及帶分支的剪接中間產物分子的發現,人們提出了多種假說來描述這一反應過程。目前被普遍接受的剪接機制
內含肽的應用內含肽可作為抗結核分支桿菌藥物靶標
由于肺結核的復發率高,且病菌對抗生素耐藥具有適應性,針對結核分支桿菌(Mycobacteriumtuerculosis)的快速而獨特的診斷工具就顯得非常需要。分支桿菌是通過內含肽的作用影響人類的相關病,如結核、麻風病。在肺結核的發生中,DNA編碼RecA和DnaB這兩個蛋白質起重要作用,RecA和D
關于內含肽的應用介紹
內含肽序列加上C端外顯肽的第一個氨基酸殘基包含了蛋白剪接的全部信息,甚至可以介導非“原配”的外源蛋白質的剪接。內含肽與上游和下游的外顯肽序列之間幾乎沒有同源性,所以,如果外源目的蛋白替換天然外顯肽,內含肽仍然可以保持剪接活性。但是利用好這一特點對蛋白質人工剪接需要考慮一些影響因素:外源蛋白及剪接
關于內含肽的結構介紹
被人們公認的標準內含肽的結構模體為:N端剪接區+中部歸巢核酸內切酶區域+ C剪接區域 。兩端剪接區參與蛋白質的剪接,中部區域參與蛋白質歸巢過程,少數內含肽不含核酸內切酶區域。全功能型內含肽包括8個保守區或基序,一般由244~1650個氨基酸堿基組成,大部分在500個氨基酸殘基左右。自導引歸巢核酸
內含肽介導的蛋白連接
通過改變裂解條件以及對內含肽進行適當修飾,可以生物合成c端帶有硫酯鍵或N端帶有半光氨酸的蛋白質分子。兩種蛋白質混合以后,硫酯鍵和半光氨酸利用“自然化學連接”(native chemical ligation)的原理進行自發的連接反應,在硫酯和半光氨酸之間形成肽鍵,從而將兩種蛋白質連接起來。自然化學連
關于內含肽的種類介紹
從內含肽的內部有無自導引歸巢核酸內切酶結構域,可將內含肽分為2種類型。一種是全功能型內含肽(maxi—intein),具有蛋白剪接活性和自導引核酸內切酶序列(homingendonuclease);另一種是微型內含肽(mini—intein),只有蛋白剪接活性。其中自導引歸巢核酸內切酶結構域的缺
概述內含肽的作用機制
內含肽剪接是一個快速、高效的反應過程,前體蛋白在細胞中幾乎分離不到。反應亦不需要任何輔助因子、酶和ATP能量,其催化結果是將內含肽兩側的外顯肽通過肽鍵連接成成熟的天然肽。基于剪接位點氨基酸殘基的化學性質以及帶分支的剪接中間產物分子的發現,人們提出了多種假說來描述這一反應過程。目前被普遍接受的剪接
內含肽的基本信息介紹
生物體本身就是一個神秘而精密地高效運作的機器。大到各系統之間,小到每個細胞,無一不展示著生命的神奇,他們之間的配合是那樣的天衣無縫。繼內含子的自我剪接功能發現之后,第一個內含肽——命名為Sce VMA1 發現了,它的發現使內含肽陸續在各種生物中發現,它們在單細胞真核生物、真細菌、古細菌、噬菌體和
關于內含肽的基本信息介紹
內含肽intein是位于宿主蛋白質中的一段插入序列,前綴in一取自inventing, 后綴tein一取自protein。與內含肽相對應的另一專用術語是外顯肽。內含肽基因不是一個獨立的基因, 必須插入于外顯肽基因才能復制轉錄,可從前體蛋白中切除并將兩側外顯肽連接起來成為成熟蛋白質。其對應的核苷酸
內含肽剪接調控以作為藥物“開關”
含肽作為藥物靶標的研究于內含肽這種可調控的作用機制,Bonnanl51為,通過改變剪接結構域上、下游的序列,自主設蛋白質內含肽,可以調控蛋白質的剪接。因為包含內含肽的前體蛋白無活性的,所以那些能阻斷剪接的化學物質將具有重要的藥用價值。由于目前在動物和人體正常新陳代謝中沒有發現內含肽的報道,作為藥
概述內含肽的分離純化的介紹
內含肽具自切割特性的這種特性而實現目標蛋白與親和標簽分離的目的。內含肽在蛋白質純化中的應用修飾后(位點特異性突變)的內含肽經誘導能夠介導N端或C端單側肽鍵斷裂。首先將編碼親和標簽、內含肽及目標蛋白的基因序列連接在一起,在合適的宿主系統中表達出一個標簽-內含肽-目標蛋白的三聯體,利用修飾后的內含肽
關于內含肽介導的蛋白連接的介紹
通過改變裂解條件以及對內含肽進行適當修飾,可以生物合成c端帶有硫酯鍵或N端帶有半光氨酸的蛋白質分子。兩種蛋白質混合以后,硫酯鍵和半光氨酸利用“自然化學連接”(native chemical ligation)的原理進行自發的連接反應,在硫酯和半光氨酸之間形成肽鍵,從而將兩種蛋白質連接起來。自然化
內含肽可作為治療線粒體疾病藥物靶標
粒體DNA(mtDNA)突變,將導致mtDNA編碼、與氧化磷酸化有關的13種蛋白質的突變,從而起很多罕見的疾病,這也可能是人類衰老的原因之一。由于該13種蛋白質高度的疏水性,通過轉基編碼表達的有生物活性的蛋白質很難從細胞質中進入線粒體。根據內含肽的作用機制,首先在胞質合成線粒體目標蛋白前體片段序
內含肽的應用剪接調控以作為藥物“開關”
含肽作為藥物靶標的研究于內含肽這種可調控的作用機制,Bonnanl51為,通過改變剪接結構域上、下游的序列,自主設蛋白質內含肽,可以調控蛋白質的剪接。因為包含內含肽的前體蛋白無活性的,所以那些能阻斷剪接的化學物質將具有重要的藥用價值。由于目前在動物和人體正常新陳代謝中沒有發現內含肽的報道,作為藥靶標
內含肽可作為抗結核分支桿菌藥物靶標
由于肺結核的復發率高,且病菌對抗生素耐藥具有適應性,針對結核分支桿菌(Mycobacteriumtuerculosis)的快速而獨特的診斷工具就顯得非常需要。分支桿菌是通過內含肽的作用影響人類的相關病,如結核、麻風病。在肺結核的發生中,DNA編碼RecA和DnaB這兩個蛋白質起重要作用,RecA
關于內含子歸巢的第Ⅱ類內含子介紹
在第Ⅱ類內含子中大部分開放讀框都具有一個與反轉錄轉座子相關的區域(除核酸內切酶編碼區之外)。這種類型的內含子在低等真核生物和某些細菌中都有發現。反轉錄酶對于內含子來說是特異的,而且和歸巢有關。反轉錄酶以初始mRNA為模板合成內含子的DNA拷貝,通過采用與反轉錄病毒相似的機制使內含子插入到靶位點中
內含子的定義
內含子(Intron)又稱間隔順序,指一個基因或mRNA分子中無編碼作用的片段? 。是真核生物細胞DNA中的間插序列。這些序列被轉錄在前體RNA中,經過剪接被去除,最終不存在于成熟RNA分子中。內含子和外顯子的交替排列構成了割裂基因。在前體RNA中的內含子常被稱作“間插序列”。在轉錄后的加工中,它比
內含子的特點
特點內含子(introns)在轉錄后的加工中, 從最初的轉錄產物除去的內部的核苷酸序列。術語內含子也指編碼相應RNA內含子的DNA中的區域。大多數真核結構基因中的間插序列(intervening sequence)或不編碼序列。它們可以轉錄,但在基因轉錄后,由這些間插序列轉錄的部分(也可用內含子這個
關于內含子歸巢的第I組類內含子介紹
第I組內含子具有編碼核酸內切酶的開放續框;有時成熟酶的活性和此蛋白有關。第II類內含子具有編碼核酸內切酶和反轉錄酶式的序列,另外成熟酶的活性也與此蛋白有關。在有些情況下還具有與其它酶活性相關聯的成熟酶功能的遺傳信息,成熟酶主要功能是使內含子的構象穩定,這于剪接來說是很必要的。 現已知道有些
細胞質及內含物
放線菌是單細胞絲狀體,菌絲中無橫隔,整個細胞質都是貫通的。細胞質主要是有蛋白質、核酸、糖類、脂類、無機鹽和大量的水所組成的半透明的膠狀物,其中水的含量為60%-80%,尤其是基內菌絲的含水量更高。最重要的顆粒狀內含物是核糖體,此外還有多聚磷酸鹽、類脂及多糖等內含物。放線菌細胞質中的糖和其他細胞壁
細胞內含物是什么
①概念 細胞質:是指除核以外,質膜以內的原生質。 ②細胞質的主要成分 細菌細胞質是含水的、含有細胞功能所需的各種分子、RNA和蛋白質的混合物。對所有的細菌都是一樣的,細胞質中的主要結構是核糖體。 ③核糖體 核糖體 由一個小的亞基和一個大的亞基組成,核糖體的亞基是由蛋白質和RNAs組成的
核內含子的概念
中文名稱核內含子英文名稱nuclear intron定 義存在于核基因中的、隔開外顯子的、但轉錄后須經加工切除的序列。核內含子的5′端和3′端分別具有保守的GT和AG序列,為內含子被剪接除去的識別位點。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
內含子起源的假說
內含子起源有兩種假說。1.內含子與它所在的基因一樣古老,在裝配第一個這樣的基因時,內含子就已存在。早期的內含子具有自催化、自我復制等能力,因此,它們是原始基因和基因組的組織與復制必不可少的部分。而原核生物和少數低等的真核生物,由于它們需要進行快速的DNA復制從而進行快速的細胞分裂,因而失去了內含子。
內含子的類型介紹
根據剪接過程為自發還是要經過剪接體的加工,人們將內含子分為自剪接和剪接體內含子。自剪接內含子:在1981年由湯瑪斯·切希發現的自剪接內含子中,又分為:Ⅰ型內含子與Ⅱ型內含子。剪接體內含子:這類內含子的剪除要有剪接體的幫助。一段序列在剪接中是內含子還是外顯子,取決于其自身。GT-AG-內含子:最常見的