檢測黃曲霉毒素M1的免疫親和柱法分析步驟介紹
(1)樣品預處理 液體牛乳及牛乳制品,取50mL樣品,加入1.0gNaCl,4000r/min離心10min,移取下層(上層脂肪層),用玻璃 纖維濾紙過濾備用。固體奶粉及制品,稱取5.0g樣品,用50mL130℃~ 60℃熱去離子水溶解混勻,以下同液體牛乳預處理方法。 (2)柱凈化 先將免疫親和柱與玻璃注射器連接好,準確加入10mL預處理的澄清濾液,接上空氣壓力泵,調節壓力使溶液以3~6mL/min的流速通過免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過柱體,用10mL甲醇:水(1:9)清洗柱子2次,棄去全部流出液,然后準確加入1.0mL甲醇:水(8:2)洗脫已免疫結合于柱上的AFM1,流速調整為1~2mL/min,收集洗脫液于玻璃試管中,備進一步儀器檢測用......閱讀全文
檢測黃曲霉毒素M1的免疫親和柱法分析步驟介紹
(1)樣品預處理 液體牛乳及牛乳制品,取50mL樣品,加入1.0gNaCl,4000r/min離心10min,移取下層(上層脂肪層),用玻璃 纖維濾紙過濾備用。固體奶粉及制品,稱取5.0g樣品,用50mL130℃~ 60℃熱去離子水溶解混勻,以下同液體牛乳預處理方法。 (2)柱凈化 先將免
檢測黃曲霉毒素M1的免疫親和柱法原理介紹
試樣經過離心、脫脂、過濾后,濾液經過鍵合有AFM1特異性單克隆抗體的免疫親和柱凈化,AFM1被柱吸附,先用某一溶劑洗滌雜質,再用洗脫液將AFM1洗下,得到較純的AFM1洗脫液,最后結合熒光光度計或高效液相色譜儀進行AFM1含量的測定。
關于黃曲霉毒素M1酶聯免疫吸附法檢測分析步驟介紹
(1)樣品處理 牛奶樣品:將50ml含脂牛奶降溫至10℃以下,3500r/min離心10min,用吸管吸棄上層脂肪層,取下層牛奶液 作為待測液。奶粉樣品:稱取5g奶粉于100ml三角瓶中,加入50ml蒸餾水振搖5~10min混勻,以下步驟同上述牛奶樣品處理方法。 (2)試劑準備 抗體:將小
關于黃曲霉毒素M1的薄層色譜法檢測分析步驟介紹
(1)AFM1標準溶液的配制 用三氯甲烷配制10μg/mL的AFM1標準溶液,用紫外分光光度計在357nm波長AFM1標準溶液的準確濃度(AFM1的摩爾消光系數為19950),避光4℃保存備用。 (2)樣品提取 液體樣品直接加入甲醇振蕩過濾得提取液,固體樣品粉碎過篩或研磨混勻后,用一定比例
關于黃曲霉毒素M1的高效液相色譜法檢測分析步驟介紹
(1)AFM1標準溶液的配制 先用乙腈配制2000μg/mL的AFM1標準溶液,再用苯-乙腈(9:1)溶液配制成0.5μg/mL的AFM1標準濃度工作液,可用紫外分光光度計校正濃度(AFM1在乙腈中的摩爾消光系數為19850)。 (2)色譜條件 色譜柱:含球形的5μm顆粒大小的
黃曲霉毒素M1免疫親和柱操作說明書
【概要】黃曲霉毒素(Aflatoxin)是黃曲霉、寄生曲霉等真菌產生的次級代謝產物,被世界衛生組織的癌癥研究機構劃分為1類致癌物,同時又是一種毒性極強的劇毒物質,廣泛存在于各種食物中。玉米,花生,大米,小麥等谷物及其副產品是黃曲霉毒素的主要來源,同時飼料中的黃曲霉毒素B1經過動物代謝后產生的黃曲霉毒
奶及奶制品中黃曲霉素M1檢測
一、背景介紹黃曲霉毒素M1?(Aflatoxin?M1)屬于黃曲霉毒素一類結構相似的化合物中的一種,在濕熱地區食品和飼料中出現黃曲霉毒素的機率最高。物理化學性質相當穩定,不被巴氏消毒法破壞。哺乳類動物攝入被黃曲霉毒素B1污染的飼料或食品后,通過羥基化作用轉化成黃曲霉毒素M1。黃曲霉毒素M1危害主要表
檢測黃曲霉毒素M1的酶聯免疫吸附法原理介紹
該方法結合了抗原抗體的特異性免疫反應和酶的高效催化顯色反應。首先將抗AFM1抗體包被于固相的聚乙烯微孔上,加入作為抗原的AFM1標準品或含AFM1的樣品,同時加入AFM1酶結合物,與抗體進行免疫競爭反應,然后加入酶基質:顯色劑進行顯色,通過標準品孔、樣品孔的顏色深淺來確定樣品中AFM1的含量。
免疫親和柱凈化熒光法測定黃曲霉毒素M1
1、黃曲霉毒素 M1?簡述黃曲霉毒素 M1?是動物攝入黃曲霉毒素B1后在體內經羥基化代謝的產物,一部分從尿和乳汁排出,一部分存在于動物的可食部分,如乳、肝、蛋類、腎、血和肌肉中,其中以乳最為常見,且乳和乳制品中的黃曲霉毒素 M1在生產和貯藏期間相對穩定,不被巴氏消毒破壞。用含有黃曲霉毒素 B1100
免疫親和柱熒光分光光度法檢測分析黃曲霉毒素
黃曲霉毒素免疫親和柱-高效液相色譜法比傳統的 HPLC 法更加安全、可靠、靈敏度和準確度高。它采用單克隆抗體免疫技術可以特效性地將黃曲霉毒素或其他真菌毒素分離出來,分離效率和回收率高。分析原理??試樣中的黃曲霉毒素用一定比例的甲醇/水提取,提取液經過過濾、稀釋后,用免疫親和柱凈化,以甲醇將親和柱上的
強致癌物質黃曲霉毒素M1檢測(二)
免疫柱凈化步驟:完全符合GB/T 18980-2003┅┅取出免疫親和層析柱, 恢復至室溫,將上方塞子取出斜剪斷,再插回親和柱上。┅┅將免疫親和柱連接于玻璃注射器下。準確移取清澈液注入玻璃注射器;┅┅將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調節壓力使溶液以約2-3mL/min流速緩慢通過免疫親和柱,直至2~3
免疫親和柱凈化熒光計快速測定黃曲霉毒素M1案例分析
免疫親和柱凈化熒光計快速測定法1、黃曲霉毒素 M1?簡述黃曲霉毒素 M1?是動物攝入黃曲霉毒素B1后在體內經羥基化代謝的產物,一部分從尿和乳汁排出,一部分存在于動物的可食部分,如乳、肝、蛋類、腎、血和肌肉中,其中以乳最為常見,且乳和乳制品中的黃曲霉毒素 M1在生產和貯藏期間相對穩定,不被巴氏消毒破壞
食品安全國家標準乳和乳制品中黃曲霉毒素M1-的測定
針對近日來國家質檢總局公布了的蒙牛乳業(眉山)和福建長富純牛奶抽查的產品被檢出黃曲霉毒素M1超標的問題。蒙牛乳業對此向民眾進行了致歉申明,反應了民族企業的責任心和對食品安全的重視。對于黃曲霉毒素M1的限量,在之前的相關食品衛生標準中有明確規定,其中:鮮乳及其乳制品(折算為鮮乳汁)不得超過0.5u
迪馬SPE法快速、低成本檢測奶粉中黃曲霉毒素M1
7月20日,廣州市工商局在官網公布了近期對市面上乳制品及含乳食品的抽檢結果。由湖南長沙亞華乳業有限公司生產的南山奶粉問題最為嚴重,5個批次的嬰幼兒奶粉均檢出含有黃曲霉毒素M1。值得注意的是,知名品牌光明奶油、本土沙灣姜汁撞奶均在不合格之列,愛馨多洋奶粉更是兩月三登“黑榜”。 目前檢測黃曲霉
黃曲霉毒素M1的檢測方法介紹
(1)光光度計法 首先在激發波長360nm,發射波長450nm波長下進行熒光光度計的校準,綠色標定管為0,紅色標定管 為2.0,黃色標定管為1.0±0.2,然后于50mL AFM1顯陰性的樣品中添加AFM1系列標準溶液(濃度分別為0、0.1、0.5、1.0μg/L)按上述分析步驟進行分離純化得
食品安全國家標準乳和乳制品中黃曲霉毒素M1-的測定
針對近日來國家質檢總局公布了的蒙牛乳業(眉山)和福建長富純牛奶抽查的產品被檢出黃曲霉毒素M1超標的問題。蒙牛乳業對此向民眾進行了致歉申明,反應了民族企業的責任心和對食品安全的重視。對于黃曲霉毒素M1的限量,在之前的相關食品衛生標準中有明確規定,其中:鮮乳及其乳制品(折算為鮮乳汁)不得超過0.5
SPE法檢測黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1
方案優勢 ? ? ? 迪馬科技最新開發出新型、快速、低成本的ProElutTM固相萃取方法。該方法可實現與免疫親和柱法相當的高精度回收率結果,但使用成本卻大大降低。ProElutTM固相萃取法單個樣品的檢測成本為免疫親和柱法的1/4,酶聯免疫法的1/2,同時ProElutTM固相萃取法簡單易操作
牛乳中黃曲霉毒素M1的測定
1.奶產品中黃曲霉毒素M1的限量我國GB 2761-2011 《食品安全國家標準 食品中真菌毒素的限量》中明確規定牛乳中黃曲霉毒素M1的限量為0.5μg/kg,與美國、日本一致,歐盟成員國以及與歐盟有貿易部分國家相對嚴格,為0.05μg/kg,而歐盟對嬰幼兒配方食品,包括嬰幼兒配方牛奶則限量0.02
免疫親和層析法測定黃曲霉毒素M1
1、范圍適用于測定牛奶、奶粉,以及低脂牛奶、脫脂牛奶、低脂奶粉和脫脂奶粉中黃曲霉毒素 M1?的含量。奶粉中的最低檢測限是0.08μg/kg,牛奶中的最低檢測限是0.008μg/kg。2、原理試樣通過免疫親和柱時,黃曲霉毒素 M1?被提取。親和柱含有特性的抗體鍵合在固體支持物上。當樣品通過親和柱時,抗
免疫親和層析法凈化高效液相色譜法測定黃曲霉毒素M1
1、范圍適用于測定牛奶、奶粉,以及低脂牛奶、脫脂牛奶、低脂奶粉和脫脂奶粉中黃曲霉毒素 M1?的含量。奶粉中的最低檢測限是0.08μg/kg,牛奶中的最低檢測限是0.008μg/kg。2、原理試樣通過免疫親和柱時,黃曲霉毒素 M1?被提取。親和柱含有特性的抗體鍵合在固體支持物上。當樣品通過親和柱時,抗
關于黃曲霉毒素M1的薄層色譜法檢測原理介紹
樣品經提取、濃縮、薄層分離后,AFM1在波長365nm的紫外光下產生藍紫色熒光,根據其在薄層板上顯示熒光的最低檢出量與標準溶液的熒光強度相比較來測定含量。
黃曲霉毒素總量免疫親和柱操作說明
【概要】黃曲霉毒素(Aflatoxin)是黃曲霉、寄生曲霉等真菌產生的次級代謝產物,被世界衛生組織的癌癥研究機構劃分為1類致癌物,同時又是一種毒性極強的劇毒物質,廣泛存在于各種食物中。玉米,花生,大米,小麥等谷物及其副產品是黃曲霉毒素的主要來源,同時飼料中的黃曲霉毒素B1經過動物代謝后產生的黃曲霉毒
乳品中黃曲霉毒素檢測(二)
針對乳品企業黃曲霉毒素超標,分析原因是由于奶牛食用了霉變飼料,導致乳汁中黃曲霉毒素M1超標。因此乳品的黃曲霉毒素污染主要來源是飼料,像玉米、稻谷、豆粕等,放久得飼料就可能發霉產生這種毒素。然而即使是牛奶加工中用高溫的巴氏殺菌法也無法清除黃曲霉毒素,因此從源頭嚴格監控和檢測,是避免此類事件發生的
藥典中藥黃曲霉毒素檢測-免疫親和柱光化學柱后衍生法
本法系用高效液相色譜法(通則0512)測定藥材、飲片及制劑中的黃曲霉毒素(以黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素G1、黃曲霉毒素G2總量計),除另有規定外,按下列方法測定。 色譜條件與系統適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑 流動相:甲醇-乙腈-水(40:18:42
藥典中藥黃曲霉毒素檢測免疫親和柱光化學柱后衍生法
15版藥典中藥材黃曲霉毒素檢測方案 免疫親和柱---光化學柱后衍生法 本法系用高效液相色譜法(通則0512)測定藥材、飲片及制劑中的黃曲霉毒素(以黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素G1、黃曲霉毒素G2總量計),除另有規定外,按下列方法測定。 色譜條件與系統適用性試驗
藥典中藥黃曲霉毒素檢測-免疫親和柱光化學柱后衍生法
15版藥典中藥材黃曲霉毒素檢測方案 免疫親和柱---光化學柱后衍生法 本法系用高效液相色譜法(通則0512)測定藥材、飲片及制劑中的黃曲霉毒素(以黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素G1、黃曲霉毒素G2總量計),除另有規定外,按下列方法測定。 色譜條件與系統適用性試驗
簡述黃曲霉毒素M1的高效液相色譜法檢測分析原理
用C18柱抽提純化樣品中的AFM1,乙醚對C18柱洗滌,再用CH2Cl2-乙醇洗脫AFM1,然后加入三氟乙酸(TFA)對AFM1進行衍生化處理,利用液相色譜熒光檢測器檢測,并與標準AFM1-TFA的衍生物比較,進行定性、定量分析。
酶聯免疫法檢測黃曲霉毒素
ELISA法也是近年來研究開發出來的一種較為新穎的方法。其原理是根據抗體和抗原之間特異性的免疫學反應,最后用測定酶活力的方法來增加測定的靈敏度。 該方法檢測速度快、對人體危害小、但重復性差、試劑壽命短、需低溫保存、假陽性概率較高、需要配置專門的酶標儀,且對一些富含鹽和脂肪的試樣需進行額外的處理
黃曲霉毒素M1柱CH09003
華安麥科生物技術有限公司是國內首家將免疫親和層析柱(IAC)系列產品化的公司 一、用途: 免疫親和層析柱可選擇性吸附樣品液中的黃曲霉毒素M1,從而對黃曲霉毒素M1樣品起到非常針對性的純化作用,過柱凈化后的樣品液可直接用于液相進行黃曲霉毒素M1含量的檢測。親和層析柱與HPLC配合使用
黃曲霉毒素M1柱CH09003
華安麥科生物技術有限公司是國內首家將免疫親和層析柱(IAC)系列產品化的公司 一、用途: 免疫親和層析柱可選擇性吸附樣品液中的黃曲霉毒素M1,從而對黃曲霉毒素M1樣品起到非常針對性的純化作用,過柱凈化后的樣品液可直接用于液相進行黃曲霉毒素M1含量的檢測。親和層析柱與HPLC配合使用