從總細胞抽提物中確定與染色質結合的蛋白質實驗
免疫共沉淀的方法實驗方法原理完整的細胞經甲醛處理通過蛋白質－DNA 和蛋白質－蛋白質之間的交聯固定體內染色質的結構。抽得細胞總抽提物并進 超聲破碎使染色質溶解并將 DNA 剪切為適當長度的片段。可溶的染色質與感興趣蛋 白質的一抗孵育，蛋白質－抗體復合物可以通過與偶聯到 Sepharose 上的 G 蛋白共孵育而 被沉淀下來，因此與感興趣的特殊蛋白交聯的 DNA 分子就同時被共沉淀下來。通過對抗體復合物膠珠的洗脫，破壞蛋白質－DNA 的交聯并純化 DNA。沉淀得到的 DNA 可用 于使用特定的引物進行 PCR 擴增來鑒定富集的 DNA 序列。實驗材料酵母培養RNase A （無 DNase）試劑、試劑盒甲醛甘氨酸（加熱滅菌）TBS 溶液裂解緩沖液LiCl 去垢劑洗滌劑TE 緩沖液洗脫緩沖液蛋白酶 K 溶液LiCl酚 氯仿 異戊醇乙醇儀器、耗材旋蓋管平底微量離心管多孔禍旋混合器26－G 針頭圓底管（17 mm×100 mm）微量離心......閱讀全文
從總細胞抽提物中確定與染色質結合的蛋白質實驗
免疫共沉淀的方法實驗方法原理完整的細胞經甲醛處理通過蛋白質－DNA 和蛋白質－蛋白質之間的交聯固定體內染色質的結構。抽得細胞總抽提物并進 超聲破碎使染色質溶解并將 DNA 剪切為適當長度的片段。可溶的染色質與感興趣蛋 白質的一抗孵育，蛋白質－抗體復合物可以通過與偶聯到 Sepharose 上的 G
用免疫共沉淀的方法從總細胞抽提物中確定與染色質結...
用免疫共沉淀的方法從總細胞抽提物中確定與染色質結合的蛋白質實驗實驗方法原理 完整的細胞經甲醛處理通過蛋白質－DNA 和蛋白質－蛋白質之間的交聯固定體內染色質的結構。抽得細胞總抽提物并進 超聲破碎使染色質溶解并將 DNA 剪切為適當長度的片段。可溶的染色質與感興趣蛋 白質的一抗孵育，蛋白質－抗
蛋白質的抽提實驗
實驗材料 轉型菌株pQG11 M15 [pREP] 單一菌落試劑、試劑盒 LB amp kan液體培養基IPTGNa3PO4·12H2ONaClEDTATriton X-100液氮儀器、耗材 恒溫震蕩培養箱高速冷凍離心機離心管冰筒實驗步驟 一、儀器用具恒溫震蕩培養箱37℃；高速冷凍離心機及離心管 （
蛋白質的抽提實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 蛋白質在細菌中表現后，以反復的冷凍-解凍方法打破細胞，再用硫酸銨把蛋白質沉淀下來，此步驟可以去除大部份核酸、多醣、脂質等雜物。 實驗材料 轉
用－S190－抽提物進行染色質重組實驗
實驗方法原理 實驗材料 S-190 抽提物核心組蛋白DNA模板試劑、試劑盒 緩沖液 RATP 混合物MgCl2CaCl2微球菌核酸酶儲液EDTA Rnase A糖原終止緩沖液蛋白酶 K 酚 氯仿 異戊醇Tris· Cl乙酸銨乙醇瓊脂糖凝膠TBE 緩沖液DNA 梯度儀器、耗材 水浴鍋實驗步驟 1. 實
用－S190－抽提物進行染色質重組實驗
實驗材料S-190 抽提物核心組蛋白DNA模板試劑、試劑盒緩沖液 RATP 混合物MgCl2CaCl2微球菌核酸酶儲液EDTARnase A糖原終止緩沖液蛋白酶 K酚 氯仿 異戊醇Tris· Cl乙酸銨乙醇瓊脂糖凝膠TBE 緩沖液DNA 梯度儀器、耗材水浴鍋實驗步驟1. 實驗前準備1.1 材料S-1
細菌細胞的制備實驗實驗——細胞抽提物的制備
實驗材料細胞試劑、試劑盒弗氏破碎緩沖液勻漿緩沖液儀器、耗材弗氏破碎器實驗步驟1. 將 5~10 g 新鮮或凍存的細胞沉淀物垂懸于弗氏破碎緩沖液中或者適當的勻漿緩沖液中。通常 4L 的大腸桿菌培養物可以獲得大約 7.5 g 的細胞沉淀。2. 懸液中加入無 RNase 的 DNase 至終濃度為 2 μ
果蠅－S190－染色質重組抽提物的制備實驗
實驗方法原理 實驗材料 0～6 h 果蝸胚胎試劑、試劑盒 脫色洗液胚胎洗液鹽洗液緩沖液 RMgCl2 液氮儀器、耗材 細尼龍網玻璃燒杯錐形管玻璃棒塑料注射器真空吸氣機Wheaton 杜恩斯勻漿器 Sorvall Superspeed 離心機Beckman 超速離心機實驗步驟 1. 試劑準備：脫色洗液
果蠅－S190－染色質重組抽提物的制備實驗
實驗材料0～6 h 果蝸胚胎試劑、試劑盒脫色洗液胚胎洗液鹽洗液緩沖液 RMgCl2液氮儀器、耗材細尼龍網玻璃燒杯錐形管玻璃棒塑料注射器真空吸氣機Wheaton 杜恩斯勻漿器Sorvall Superspeed 離心機Beckman 超速離心機實驗步驟1. 試劑準備：脫色洗液：50％（V/V）家用漂白
植物總DNA的快速少量抽提實驗
實驗方法原理 CTAB法：該方法簡便、快速，DNA產量高(純度稍次，適用于一般分子生物學操作)。 CTAB是一種非離子去污劑，植物材料在CTAB的處理下，結合65 °C水浴使細胞裂解、蛋白質變性、DNA被釋放出來。CTAB與核酸形成復合物，此復合物在高鹽（>0.7 mM）濃度下可溶，并穩
植物總DNA的快速少量抽提實驗
CTAB法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 CTAB法：該方法簡便、快速，DNA產量高(純度稍次，適用于一般分子生物學操作)。?CTAB是一種非離子去污劑，植物材料在CTAB的
哺乳動物細胞抽提物中熒光素酶的測定實驗
實驗材料 用感興趣的 DNA 轉染的哺乳動物培養細胞試劑、試劑盒 細胞裂解緩沖液熒光素酶測定緩沖液熒光素溶液不含鈣鹽和鎂鹽的磷酸鹽緩沖液儀器、耗材 熒光光度計和光度計測置管橡膠棒實驗步驟 材料緩沖液和溶液貯存液稀釋到適當濃度。細胞裂解緩沖液25 mmol/L 雙甘氨肽（pH7.8)15 mmol/L
血與淚的RNA抽提抽提經驗
對大部分實驗人員來說，RNA 抽提比基因組 DNA 抽提要困難得多。事實上，現有的 RNA 抽提方法/試劑，如果用于從培養細胞中抽提 RNA，比抽提基因組 DNA 更方便，成功率也更高。那為什么同樣的方法用于組織 RNA 的抽提，總會碰到問題呢？組織 RNA 抽提失敗的兩大現象是： RNA 降解和組
植物總DNA的快速少量抽提實驗——CTAB法
DNA分子是分子生物學研究的基本材料，依不同的實驗目的可采取不同的抽提方法獲取數量和質量不等的DNA。實驗目的是了解植物DNA抽提的主要方法，掌握CTAB法快速抽提水稻DNA。實驗方法原理CTAB法：該方法簡便、快速，DNA產量高(純度稍次，適用于一般分子生物學操作)。?CTAB是一種非離子去污劑，
WB生物樣本總蛋白抽提
一、貼壁細胞蛋白提取A1..將水浴鍋的溫度調至100℃，等水浴鍋達到100℃溫度后，取出需要收樣的細胞的培養皿或者孔板。2.將緩沖液（1Xloading buffer）置于100℃水浴鍋中預熱10min。（loding buffer：?是5Xloding buffer用純水稀釋到1Xlodingbu
動物組織或細胞的蛋白質抽提步驟
一、培養的貼壁動物細胞的蛋白質抽提步驟1、從貼壁細胞培養瓶中小心傾去培養液。2、預冷的PBS清洗貼壁的細胞2次，小心傾去PBS。3、配置含抑制劑的蛋白質抽提試劑（1ml抽提試劑中加入5 μl蛋白酶抑制劑混合液，5 μl PMSF和5 μl磷酸酶混合液）。4、細胞瓶中加入預冷的含抑制劑的蛋白質抽提試劑
哺乳動物細胞抽提物中熒光素酶的測定
單細胞凝膠電泳實驗可應用于： （1）快速檢測單細胞DNA損傷； (2)遺傳毒性生物監測; (3)確定精子細胞中DNA片段化的程度。實驗方法原理螢光素酶是理想的報告基因，因為哺乳動物細胞中不含內源性螢光素酶，一旦轉錄完成立刻就生成功能性的螢光素酶，同時在所有的化學發光反應中，它的光產物具有最高的量子效
哺乳動物細胞抽提物中熒光素酶的測定
哺乳動物細胞抽提物中熒光素酶的測定實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 螢光素酶是理想的報告基因，因為哺乳動物細胞中不含內源性螢光素酶，一旦轉錄完成立刻就生成功能性的螢光素酶，
細胞內cccDNA的抽提與純化
最常用的抽提細胞內cccDNA的方法是蛋白質－去污劑沉淀法，其原理是基于rcDNA和cccDNA與蛋白質結合能力的差異。rcDNA能與蛋白質共價結合，與絕大多數細胞染色體DNA一起形成沉淀，而cccDNA不能與蛋白質結合故游離于上清中，用酚氯仿抽提上清即可得到cccDNA。根據筆者的經驗，該方法的主
麥胚抽提物的概念
中文名稱麥胚抽提物英文名稱wheat-germ extract定 義用于測定信使核糖核酸(mRNA)活性的一種體外翻譯分析系統。系從小麥胚中制備的無細胞抽提物，須用RNA酶去除其中內源的mRNA。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
酵母抽提物的發展情況
最新數據表明, 近年來,中國的酵母抽提物年均需求增長率高于10%,而在美國和歐洲市場的增長速度大約在5%。目前全球酵母提取物的年生產規模在16萬噸左右。 全球現狀 20世紀初,YE產品率先在歐洲國家出現,60年代開始了工業化生產階段,但直到90年代后,隨著YE的優勢發揮、應用領域擴大以及植物
酵母抽提物的基本介紹
酵母抽提物是以食品用酵母為主要原料,以酵母自身的酶或外加食品級酶的共同作用下,酶解自溶（可再經分離提取）后得到的產品,并富含氨基酸、肽、多肽等酵母細胞中的可溶性成分。根據需要可添加適量輔料進行調配,也可在生產后期增加美拉德反應工藝,屬于食品配料。 酵母抽提物（又稱酵母提取物、酵母味素）,英文名
質粒抽提實驗中溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各有什么作用
溶液Ⅱ主要成分為氫氧化鈉(NaOH)和SDS。DNA在pH5～9的溶液中是穩定的，但當pH＞12或pH＜3時，就會引起DNA雙鏈之間氫鍵的解離而變性。溶液Ⅱ中NaOH濃度為0.2mob/L，加入溶液Ⅱ后，該系統的pH為12.0～12.6，因而促使染色體DNA與質粒的變性解離成單鏈。SDS是一種陰離子
質粒抽提實驗中溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各有什么作用
溶液Ⅱ主要成分為氫氧化鈉(NaOH)和SDS。DNA在pH5～9的溶液中是穩定的，但當pH＞12或pH＜3時，就會引起DNA雙鏈之間氫鍵的解離而變性。溶液Ⅱ中NaOH濃度為0.2mob/L，加入溶液Ⅱ后，該系統的pH為12.0～12.6，因而促使染色體DNA與質粒的變性解離成單鏈。SDS是一種陰離子
蛋白質的抽提實驗——超聲波破碎法
蛋白質的抽提實驗是進行蛋白質實驗分析的基本操作，可用于（1）蛋白質的分離（2）蛋白質功能結構檢測（3）蛋白質表達前的基本操作。實驗方法原理蛋白質在細菌中表現后，以反復的冷凍-解凍方法打破細胞，再用硫酸銨把蛋白質沉淀下來，此步驟可以去除大部份核酸、多醣、脂質等雜物。實驗材料轉型菌株pQG11 M15
植物總DNA抽提方法和優缺點
1、植物DNA的CTAB提取法：經典方法。效果較好，污染少。多用于核基因組提取。2、SDS提取法：較為簡易，提取的為全基因組，但有蛋白污染可能。3、簡易“一管法”提取方法：4、PCR研究的快速提取法：以上兩者方法簡單，快速，但污染多，不適合做酶切等操作。5、酚類、多糖類物質較多的植物DNA提取法：多
純化RNA實驗——從培養的細胞中純化總RNA
實驗材料細胞試劑、試劑盒RNA 提取緩沖液變性液水飽和酚儀器、耗材培養皿Falcon 2063 管實驗步驟1. 取 1 個細胞已長滿的 100 ml 培養皿，吸出培養液，加 2 ml RNA 提取緩沖液，用橡膠刮棒刮下細胞。RNA 提取緩沖液：變性液，20 mlβ-巰基乙醇，0.144 ml2 mo
蛋白質的抽提原理和方法
抽提是指利用某種溶劑使目的蛋白質和其他雜質盡可能分開的一種分離方法。其原理是不同蛋白質在某種溶劑中的溶解度不同，所以可以通過選擇溶劑，使得目的蛋白質溶解度大，而其他雜蛋白質溶解度小，然后經過離心，可以去除大多數雜蛋白質。方法：溶劑的選擇是抽提的關鍵，由于大多數蛋白質可溶于水、稀鹽、稀堿或稀酸，所以可
蛋白質的抽提原理和方法
抽提是指利用某種溶劑使目的蛋白質和其他雜質盡可能分開的一種分離方法。其原理是不同蛋白質在某種溶劑中的溶解度不同，所以可以通過選擇溶劑，使得目的蛋白質溶解度大，而其他雜蛋白質溶解度小，然后經過離心，可以去除大多數雜蛋白質。方法：溶劑的選擇是抽提的關鍵，由于大多數蛋白質可溶于水、稀鹽、稀堿或稀酸，所以可
水稻總DNA的快速少量抽提CTAB法
DNA分子是分子生物學研究的基本材料，依不同的實驗目的可采取不同的抽提方法獲取數量和質量不等的 DNA 。 實驗目的：了解植物 ?DNA 抽提的主要方法，掌握 CTAB 法快速抽提水稻 DNA 。 實驗材料及試劑： 水稻 ?葉片，1.5 × CTAB ，氯仿 / 異戊醇 (24:1) ，