冰凍切片固定實驗
實驗方法原理原位雜交中所用冰凍切片必須用多聚甲醛固定，然后再脫水。實驗材料冰凍組織試劑、試劑盒PFAPBS乙醇儀器、耗材加濕盒實驗步驟1. 將承有切片的載玻片放入加濕盒中，加4%PFA覆蓋整個切片，蓋上加濕盒，如為預先未固定過的組織，則于室溫放置20 min，如是固定過的組織則放置5 min。2. 吸去固定液，用毛細吸管或用噴水瓶以3xPBS沖冼切片，并溫育5 min。3. 用1xPBS重復步驟2操作，吸去PBS，按順序以30%、60%、80%、95%和100%乙醇依次沖洗切片，每次2 min。4. 晾干載玻片并保存在放有干燥劑的密封盒中，于-70℃存放可達數周。開盒前應將其平衡至室溫。 圖一、加濕盒展開 注意事項1. 固定及時是冷凍切片制作的第一要 素 ,固定的最佳時機應在切片后馬上將裱好組織切片的載玻片放進固定液中固定。固定液要保持新鮮，經常更換。2. 甲醇......閱讀全文
冰凍切片固定實驗
實驗材料 冰凍組織試劑、試劑盒 PFAPBS乙醇儀器、耗材 加濕盒實驗步驟 1. ?將承有切片的載玻片放入加濕盒中，加4%PFA覆蓋整個切片，蓋上加濕盒，如為預先未固定過的組織，則于室溫放置20 min，如是固定過的組織則放置5 min。2. ?吸去固定液，用毛細吸管或用噴水瓶以3×PBS沖冼切片，
冰凍切片固定實驗
實驗方法原理原位雜交中所用冰凍切片必須用多聚甲醛固定，然后再脫水。實驗材料冰凍組織試劑、試劑盒PFAPBS乙醇儀器、耗材加濕盒實驗步驟1. ?將承有切片的載玻片放入加濕盒中，加4%PFA覆蓋整個切片，蓋上加濕盒，如為預先未固定過的組織，則于室溫放置20 min，如是固定過的組織則放置5 min。2.
組織病理實驗_冰凍切片
組織病理實驗廣泛應用于生物學、解剖學、病理學、腫瘤學、法醫學、臨床診斷學等實驗方法原理冰凍切片是指將組織在冷凍狀態下直接用切片機切片。它實際上是以水為包埋劑，將組織進行冰凍至堅硬后切片的。在冰凍切片前組織不經過任何化學藥品處理或加熱過程，大大縮短了制片時間。同時，由于此法不需要經過脫水、透明和浸蠟等
冰凍切片
實驗概要冰凍切片（frozen section）是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度，然后進行切片的方法。實驗步驟1. 冷凍切片的制作方法??? 1) 將恒冷箱冷凍切片機的速凍頭和箱內溫度調整到適宜的切溫度，一般情況下為-18～-25℃。??? 2) 在標本冷凍托上涂布一層冷凍包埋劑——OCT
冰凍組織制備及切片實驗
實驗材料?冰凍組織試劑、試劑盒?異戊烷OCT多聚-L-賴氨酸儀器、耗材?濾紙切片機加熱槽冰凍機細毛刷實驗步驟?1.? 將一個50 ml 硬質玻璃燒杯浸入盛有液氮的燒瓶（或敞口聚苯乙烯盒）中冰凍，燒杯中加CryoKwik（或異戊烷）。2.? 在濾紙條一端以鉛筆注明標簽，用鑷子將樣品放于另一端。?3.?
冰凍組織制備及切片實驗
實驗材料冰凍組織試劑、試劑盒異戊烷OCT多聚-L-賴氨酸儀器、耗材濾紙切片機加熱槽冰凍機細毛刷實驗步驟1. ?將一個50 ml 硬質玻璃燒杯浸入盛有液氮的燒瓶（或敞口聚苯乙烯盒）中冰凍，燒杯中加CryoKwik（或異戊烷）。2. ?在濾紙條一端以鉛筆注明標簽，用鑷子將樣品放于另一端。?3. ?保證C
石蠟切片與冰凍切片
一、組織和細胞標本類型：（一） 組織標本類：1、 石蠟切片：組織形態保存好2、 冰凍切片：抗原性保存好（二）細胞標本類：1、組織印片 2、細胞培養片（細胞爬片） 3、細胞涂片二、組織取材1、腦組織和神經組織應采用灌注固定后，再進行后固定。2、組織取材注意事項：（1）標本新鮮：組織要求離體后30min
冰凍切片的原位雜交實驗
細胞RNA的原位雜交實驗用于在混雜的細胞群體和組織中、定位特異的mRNA在細胞中的存在位置。冰凍切片（frozen section）是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度，然后進行切片的方法。因其制作過程較石蠟切片快捷、簡便，而多應用于手術中的快速病理診斷。實驗材料冰凍切片試劑、試劑盒Tris·
冰凍切片的原位雜交實驗
實驗材料 冰凍切片試劑、試劑盒 Tris·ClEDTA甘氨酸PBSSSC乙醇甲酰胺硫酸葡聚糖DTTNaCl儀器、耗材 加濕盒水浴鍋培養箱實驗步驟 1. ?從冰箱中取出載玻片，平衡至室溫，再打開玻片盒。置載玻片于架中，浸泡于以50 mmol/l Tris·Cl（pH7.5）/5 mmol/l EDTA
冰凍切片免疫熒光實驗步驟
1.組織用4%多聚甲醛固定6-8小時，轉至20%蔗糖溶液至組織沉底。2.冰凍切片8-10μm，推薦瑞沃德冷凍切片機，溫度穩定，切片質量高。室溫放置30分鐘以上防脫片，-20℃保存。從冰箱拿出的冰凍切片在室溫放置30分鐘以上再進行免疫熒光。3.1xPBS洗3次，每次3-5分鐘。4.用2%BSA室溫或3
冰凍切片免疫熒光實驗步驟
1.組織用4%多聚甲醛固定6-8小時，轉至20%蔗糖溶液至組織沉底。2.冰凍切片8-10μm，推薦瑞沃德冷凍切片機，溫度穩定，切片質量高。室溫放置30分鐘以上防脫片，-20℃保存。從冰箱拿出的冰凍切片在室溫放置30分鐘以上再進行免疫熒光。3.1xPBS洗3次，每次3-5分鐘。4.用2%BSA室溫或3
冰凍切片的原位雜交實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 冰凍切片 試劑、試劑盒
冰凍切片的定義
冰凍切片（frozen section）是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度，然后進行切片的方法。因其制作過程較石蠟切片快捷、簡便，而多應用于手術中的快速病理診斷。冰凍切片的種類較多，有低溫恒冷箱冰凍切片法，二氧化碳冰凍切片法，甲醇循環制冷冰凍切片法等。這些方法，隨著時代的變遷，科技的發展
冰凍切片的應用
（1）在手術進行中，突然發現病人的病變與原診斷，原定手術方案不相符合，或者懷疑時，需要病理確定。 （2）了解淋巴結內是否有轉移的腫瘤細胞，或者轉移的程度，以利于確定是否需要徹底掃除淋巴結或者其它的治療措施。 （3）對于已確定為惡性腫瘤的患者，則需要了解其手術范圍是否足夠，上下切緣是否有殘存的
冰凍切片實驗技巧（三）－學會看片子
這里指的是片子滑過刀片時就要辨別出質量的好壞，如果到鏡下才發現片子的缺陷那就無法挽救。1. 觀察片子的厚薄盡管冰凍切片機可以設置厚度，但人為辨別片子的厚度是否合適仍然很重要。片子太薄看起來象半透明的鏡紙，片子太厚看起來混濁、柔性差，對我來說，5-6um的片子較合適，象一張薄的打印紙。 2. 片子破裂
GFP骨的冰凍切片實驗方法
Protocol for Frozen section of GFP Bone:Fix the bone in 4% Paraformaldehyde at 4?C under constant agitation for 3 days.Decalcification in 14% EDTA sol
石蠟切片和冰凍切片的比較
（1）要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片，這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時要高溫烤片，可能會破壞組織的抗原性，如果組織的抗原性較穩定，則可作石蠟切片；但是要求做石蠟切片的，可作冰凍切片。（2）冰凍切片的優點是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性，做免疫組化時不需抗原修復這一步。缺點是細
石蠟切片、冰凍切片及振動切片的區別
一、石蠟切片??? 把修好的蠟塊裝在旋轉切片機上，即可進行切片(section)。切片必須保持切片刀銳利，切片厚度通常為5～7um，也可根據染色需要切成不同厚度，一般不旋轉式切片機超過10um。切好的蠟帶，放人40℃左右的溫水中將蠟片展平。良好的切片應無刀痕、裂痕，切片厚度均一平整。切片如有上述
細胞固定切片和包埋實驗
哺乳動物肌梭的初級終末—使 用 1 um 連續切片的光學顯微鏡研究實驗實驗材料貓 部分顯露肌梭試劑、試劑盒二甲砷酸鈉緩沖液戊二醛四氧化鋨乙醇環氧乙烷甲苯胺藍派羅寧儀器、耗材玻片實驗步驟一、固定將取出的肌肉置于含 5% 戊二醛的 0.1mol/l 二甲砷酸鈉緩沖液內，PH 值為 7.2, 原位固定 5
細胞固定切片和包埋實驗
經驗交流（0）實驗材料貓 部分顯露肌梭 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒二甲砷酸鈉緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
細胞固定切片和包埋實驗
哺乳動物肌梭的初級終末—使 用 1 um 連續切片的光學顯微鏡研究實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 貓 部分顯露肌梭
冰凍切片的制作技巧
這個主要看組織固定包埋技術和冰凍切片機性能吧，固定包埋因人而異，因為需要快速出診斷報告，這一點要求切片機的速凍效果好，機器能馬上進入工作狀態。這一點我覺得深圳瑞沃德廠家的冰凍切片機設計的很好，可以上班前自動喚醒（無需人員手動），上班了，機器也就可以馬上進入工作狀態。樣本快速制冷，2-3分鐘就可以了
徠卡冰凍超薄切片技術
?徠卡冰凍超薄切片技術是使樣品迅速冷凍，然后用冷凍切片機進行徠卡冷凍超薄切片。它省去了普通超簿切片法中繁雜的化學固定與包埋操作，在細胞化學研究中有著特殊的用途。為了很好保存形態結構，必須使游離水形成玻璃態的冰，防止產生冰晶。這就要求很高的冰凍速率（~度/秒），這對于傳熱性能差的生物材料來說是困難的。
怎么切好冰凍切片
冰凍組織的取材，就是選擇好合適的組織塊，放在一個小的金屬托上進行速凍，凍到一定的硬度后，就在病理切片機進行切片。然后將切片放入酒精或者專有的固定液里固定，最后進行相應的染色及封片。再蓋上蓋玻片，貼上病理號標簽，這樣一張冰凍切片就制作完成了。
冰凍切片的制作步驟
冷凍切片 1、取出組織支承器，放平擺好組織，周邊滴上包埋劑，速放于冷凍臺上冰凍，用吸熱器壓住組織，至包埋劑與組織凍結成白色冰體即可切片（1~3分種）。 2、將冷凍好的組織塊，夾緊于切片機持承器上，啟動粗進退鍵，轉動旋鈕，將組織修平。 3、調好欲切的厚度，根據不同的組織而定，原則上是細胞密集的薄切，纖
冰凍切片免疫熒光
實驗原理抗原抗體結合主要試劑固定液、梯度蔗糖、磷酸鹽緩沖液、封閉液、一抗、熒光標記的二抗、DAPI、熒光抗淬滅封片劑主要設備冰凍切片機、熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡實驗材料組織切片實驗步驟切片提取新鮮組織置于4%多聚甲醛中固定；2.梯度蔗糖脫水：10%-20%-30%；3.冰凍包埋劑包埋并切片，切片
冰凍切片免疫熒光
實驗概要冰凍切片免疫熒光實驗原理抗原抗體結合主要試劑固定液、梯度蔗糖、磷酸鹽緩沖液、封閉液、一抗、熒光標記的二抗、DAPI、熒光抗淬滅封片劑主要設備冰凍切片機、熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡實驗材料組織切片實驗步驟切片1.提取新鮮組織置于4%多聚甲醛中固定；2.梯度蔗糖脫水：10%-20%-30%；3
冰凍組織固定和蔗糖浸制實驗
實驗材料冰凍組織試劑、試劑盒PBSPFA蔗糖實驗步驟1. 于4℃，在2%PFA固定液（做免疫組織化學時）或4%PFA固定液（做原位雜交時） 中，固定小的組織樣品或分離的胚胎（如第7、第8天的小鼠胚胎）30 min。2. 在PBS中清洗組織樣品2次。3. 在30%蔗糖中浸制樣品，直至組織沉下（1~3
冰凍組織固定和蔗糖浸制實驗
實驗方法原理 實驗材料 冰凍組織試劑、試劑盒 PBSPFA蔗糖實驗步驟 1. 于4℃，在2%PFA固定液（做免疫組織化學時）或4%PFA固定液（做原位雜交時） 中，固定小的組織樣品或分離的胚胎（如第7、第8天的小鼠胚胎）30 min。2. 在PBS中清洗組織樣品2次。3. 在30%蔗糖中浸制樣品，直
冰凍切片實驗技巧（四）：脂肪組織的處理
脂肪組織無疑是冰凍切片者的絆腳石，道理很簡單脂肪不會結冰，把溫度降低讓脂肪變硬可以切出較薄的片子，但是這個溫度對同一組織中的其他成分來說顯得太低而不合適切片，當脂肪破碎影響切片時這個問題就變得明顯，下面是一些我的經驗總結。1.盡可能的削掉不需要的脂肪組織當我準備切淋巴結時，我會先檢查一遍，小心翼翼地