純化的基因組DNA的微球菌核酸酶消化實驗
實驗方法原理 實驗材料 0.5～1 mg 純化的基因組 DNA微球菌核酸酶（MNase）試劑、試劑盒 核緩沖液 C0.5 mol L CaCl20.25 mol L EGTA氯仿儀器、耗材 設置在 68℃ 的加熱器冰塊實驗步驟 1. 取 100 ug 基因組 DNA 加入到室溫的核緩沖液 C 中，使終體積為 300 ug。準備 4～5 管此溶液。重要提示：對于每個溶液，直到反應進行到第 4 步后再進行下一管的反應。2. 加入 CaCl2 至終濃度為 3 mmol/L。3. 加入 MNase 至 0.5、1、2、3 U/ml。劇烈地混合使酶均勻的分布（溶液可能有些黏稠），反應 3 min。4. 將溶液轉移到含有 50 ul 0.25 mol/L EGTA 預熱到 68℃ 的管子中，68℃ 溫育 10 min。5. 將管子轉移到冰塊上。6. 在 1.2％ 的小型瓊脂糖凝膠上上樣 200 ng，電泳檢測消......閱讀全文
純化的基因組－DNA－的微球菌核酸酶消化實驗
實驗方法原理 實驗材料?0.5～1 mg 純化的基因組 DNA微球菌核酸酶（MNase）試劑、試劑盒?核緩沖液 C0.5 mol L CaCl20.25 mol L EGTA氯仿儀器、耗材?設置在 68℃ 的加熱器冰塊實驗步驟 1. 取 100 ug 基因組 DNA 加入到室溫的核緩沖液 C 中，使
純化的基因組－DNA－的微球菌核酸酶消化實驗
實驗材料0.5～1 mg 純化的基因組 DNA微球菌核酸酶（MNase）試劑、試劑盒核緩沖液 C0.5 mol L CaCl20.25 mol L EGTA氯仿儀器、耗材設置在 68℃ 的加熱器冰塊實驗步驟1. 取 100 ug 基因組 DNA 加入到室溫的核緩沖液 C 中，使終體積為 300 ug
純化DNA實驗_基因組DNA的快速純化
試劑、試劑盒尾部緩沖液蛋白酶 K儀器、耗材離心管玻璃棒實驗步驟第 1 天1. 大約 1.5 cm 長的尾部活檢樣品放在一個 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部緩沖液的小離心管中，加 35 ul 10 mg/ml 蛋白酶 K，在 55℃ 振搖溫育過夜。尾部緩沖液（配 25 ml）50 mmol/L
分離的細胞核的染色質的微球菌核酸酶消化實驗
實驗材料動物組織 ［如肝、腎和（或）脾］試劑、試劑盒核緩沖液 A、B、C無 Ca 和 Mg 離子（CMF） 的 PBSNaOH2×TNESK 溶液CaCl2微球菌核酸酶（MNase） 儲液儀器、耗材剃刀刀片或解剖刀培養皿帶有聚四氟乙烯包被的磨棒的組織勻漿器電動組織磨碎機相差顯微鏡輕薄棉布玻璃離心管（
分離的細胞核的染色質的微球菌核酸酶消化實驗
實驗方法原理 實驗材料 動物組織 ［如肝、腎和（或）脾］試劑、試劑盒 核緩沖液 A、B、C 無 Ca 和 Mg 離子（CMF） 的 PBSNaOH 2×TNESK 溶液CaCl2微球菌核酸酶（MNase） 儲液儀器、耗材 剃刀刀片或解剖刀培養皿帶有聚四氟乙烯包被的磨棒的組織勻漿器電動組織磨碎機 相差
動物基因組DNA－的分離純化實驗
鹽溶法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 根據核糖核蛋白與脫氧核糖核蛋白在一定濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同進行分離, 然后用蛋白質變性沉淀劑去除蛋白,使核酸釋放出來, 再利用
動物基因組DNA－的分離純化實驗
實驗方法原理 根據核糖核蛋白與脫氧核糖核蛋白在一定濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同進行分離, 然后用蛋白質變性沉淀劑去除蛋白,使核酸釋放出來, 再利用核酸不溶于乙醇的性質將核酸析出, 達到分離提純的目的。在0 . 14 mol/ L 的氯化鈉溶液中, RNA 核蛋白(RNP) 溶解度大, 而DNA
微球菌核酸酶的基本信息
微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease) 是只降解核小體連接區DNA的核酸酶，由于核小體處的DNA被組蛋白1保護而不被降解。
微球菌核酸酶的基本信息
中文名微球菌核酸酶外文名Micrococcal Nuclease微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease) 是只降解核小體連接區DNA的核酸酶，由于核小體處的DNA被組蛋白1保護而不被降解。只降解核小體連接區DNA的核酸酶，由于核小體處的DNA被組蛋白1保護而不被降解。
動物基因組DNA－的分離純化實驗——鹽溶法
本實驗目的是掌握鹽溶法大量制備動物基因組DNA 的基本原理和方法，根據核糖核蛋白與脫氧核糖核蛋白在一定濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同進行分離, 然后用蛋白質變性沉淀劑去除蛋白,使核酸釋放出來, 再利用核酸不溶于乙醇的性質將核酸析出, 達到分離提純的目的。實驗方法原理根據核糖核蛋白與脫氧核糖核蛋白在一
基因組DNA的快速純化
第 1 天1. 大約 1.5 cm 長的尾部活檢樣品放在一個 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部緩沖液的小離心管中，加 35 μl 10 mg/ml蛋白酶 K，在 55℃ 振搖溫育過夜。尾部緩沖液（配 25 ml）50 mmol/L Tris，pH 8??????????????????????
純化DNA實驗
從哺乳動物細胞或組織分離DNA 基因組DNA的快速純化 純化質粒（堿裂解法） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
DNA純化實驗
實驗方法原理 硅膠膜可在高鹽條件下結合DNA，又可在低鹽條件下與DNA分離。用于清潔目的的含DNA溶液中的引物、單核苷酸、酶、礦物油、鹽離子等雜質因為沒有與DNA相似的特性，所以被分離開來。實驗材料?PCR產物試劑、試劑盒?PCR清潔試劑盒儀器、耗材?96孔DNA制備板96孔深孔板96孔V型底板實驗
純化DNA實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 TBS抽提緩沖液儀器、耗材 離心管實驗步驟 1. 根據樣品類型，從下列方法中選一個作為步驟 1 進行操作。(1) 細胞樣品① 單層培養的細胞以用冰預冷的 TBS 將單層細胞洗滌 2 次，用刮棒把細胞刮入約 0.5 ml 的 TBS 中，將細胞懸液轉移到冰浴的離心管中，
DNA純化實驗
PCR清潔試劑盒純化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 硅膠膜可在高鹽條件下結合DNA，又可在低鹽條件下與DNA分離。用于清潔目的的含DNA溶液中的引物、單核苷酸、酶、礦物油
純化DNA實驗
從哺乳動物細胞或組織分離DNA 基因組DNA的快速純化 純化質粒（堿裂解法） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
基因組DNA的純化與回收
實驗概要質粒、噬菌體等經酶切，電泳；PCR產物經電泳后，常常需要對一些DNA電泳片段進行回收和純化，用于亞克隆、探針標記、測序等。DNA回收和純化常用方法有壓碎法、低融點瓊脂糖法、凍融法等，也有現成的試劑盒供應。主要試劑酚、氯仿、NaAc、無水乙醇、TE、Tris-HCl飽和酚、異丙醇、低融點瓊脂糖
從全血中純化基因組－DNA－實驗方法
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 乙醇 異丙醇 RNA 酶 A 全血 儀器、耗材 瓊脂糖凝膠電泳
從全血中純化基因組－DNA－實驗方法
試劑、試劑盒 乙醇異丙醇RNA 酶 A全血儀器、耗材 瓊脂糖凝膠電泳離心管Wizard 基因組 DNA 純化試劑盒實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑乙醇，70%，室溫異丙醇, 室溫RNA 酶 A將 RNA 酶 A 溶解于 DNA 再水合液中至終濃度為 4 mg/ml, 煮沸 10min 以去
從全血中純化基因組－DNA－實驗方法
用于從全血（10 ml) 中分離基因組 DNA 的 Wizard 基因組 DNA 純化試劑盒建立在一個四步程序基礎上的。純化程序的第一步包括血紅細胞的裂解、可溶部分的棄除，隨后是白細胞及其細胞核的裂解。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。試劑、試劑盒乙醇異丙醇RNA 酶 A
使用重組的果蠅因子進行染色質裝配實驗
實驗方法原理 實驗材料 重組的 NAP－1純化的果蠅核心組蛋白重組的 ACF質粒 DNA試劑、試劑盒 HEG 緩沖液KClPvOH PEG 溶液BSA 溶液MgCl2CaCl2重組的拓撲異構酶 Ⅰ 工作溶液緩沖液 R微球菌核酸酶儲液 EDTARNase A糖原終止緩沖液 酚 氯仿 異戊醇乙醇儀器、耗
使用重組的果蠅因子進行染色質裝配實驗1
實驗材料重組的 NAP－1純化的果蠅核心組蛋白重組的 ACF質粒 DNA試劑、試劑盒HEG 緩沖液KClPvOH PEG 溶液BSA 溶液MgCl2CaCl2重組的拓撲異構酶 Ⅰ 工作溶液緩沖液 R微球菌核酸酶儲液EDTARNase A糖原終止緩沖液酚 氯仿 異戊醇乙醇儀器、耗材27℃ 和 30℃
基因組DNA提取純化的注意事項
大多數動物組織可以用裂解緩沖液和蛋白酶/蛋白酶 K 進行高效裂解。在加入裂解液之前需要將組織切成小塊，有條件的話建議使用 TissueLyser 或研缽等提前進行均質化。骨骼肌，心臟，皮膚等組織含有收縮蛋白，結締組織和膠原蛋白，所以利用蛋白酶 / 蛋白酶 K 進行充分消化是必須的。FFPE
DNA純化實驗——DNA凝膠回收試劑盒純化法
DNA純化可用于：（1）獲得高純度的DNA；（2）濃縮DNA；（3）測序、遺傳信息分析等分子生物學應用。實驗方法原理本試劑盒適合從各種瓊脂糖凝膠中提取多至 8 μg DNA（70 bp-10 Kb），回收率為 60-85%。瓊脂糖凝膠在溫和的緩沖液(DE-A 溶液)中溶解，其中的保護劑能防止線狀 D
高質量－DNA－的純化實驗
實驗材料 乳腺瘤組織試劑、試劑盒 EDTA異丙醇裂解緩沖液細胞核裂解緩沖液Triton 裂解緩沖液儀器、耗材 水浴鍋破璃棒實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑EDTA，100 mmol/L異丙醇裂解緩沖液10 mmol/LTris-HCl1mmol/LEDTA150 mmol/LNaCl0.5
高質量－DNA－的純化實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 乳腺瘤組織 試劑、試劑盒 EDTA 異丙醇裂解緩沖液 細胞核裂解緩沖液
高質量－DNA－的純化實驗
應用經過修改的 Miller 等（1988) 的鹽沉淀方法純化 DNA，不使用酚和氯仿，比較溫和，有效防止了長的染色體 DNA 的斷裂。在第 9 章中講述了另一種 DNA 純化的方法。這種方法可以沉淀細胞核，已被成功地用于對血液樣品、培養的細胞和乳腺瘤組織DNA 的純化。本實驗來源于 PCR 實驗指
DNA純化去雜質實驗
這周我們來討論一項常用的技術，即使常用但仍引起部分人核酸分離焦慮癥。那就是基因組DNA的純化去雜質。場景是這樣的：你有一份采自南太平洋中部一個偏僻小島上首次發現的古老蘭花品種根際土壤樣品。你使用了非PowerSoil Kit法提取其中的微生物DNA。最終DNA含有太多雜質，無法PCR擴增。因此需要去
DNA作圖實驗——多種酶消化
主要用于顯示基因以及其他序列待征在基因組上位置的圖。實驗方法原理應用遺傳學技術構建能顯示基因以及其他序列待征在基因組上位置的圖。實驗材料DNA試劑、試劑盒限制酶緩沖液儀器、耗材電泳儀實驗步驟1. ?用低頻率切割的不同限制性內切酶分別完全消化DNA。?2. ?從每個反應取小份樣品作電泳分析，用已知的分
限制性內切酶消化DNA實驗——消化多個DNA
實驗方法原理當消化多個樣品時，以下方案可減少取吸次數，節省時間和減少污染的機會。實驗材料DNA實驗步驟1. ?分別加入相同體積的各個樣品DNA至不同微量離心管中。 為避免交叉污染，各樣品用不同的吸頭。?2. ?制備好"預混合液"，它含有足夠量的消化所有樣品的10x反應緩沖液和水，置于冰浴。?3. ?