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  • 基因組DNASouthern雜交操作步驟

    1)基因組DNA Southern印跡的制備 預備 1.用適當的限制性內切酶消化基因組DNA樣品(10μg)。 2.進行瓊脂糖凝膠電泳。一般用0.7~1.0%的瓊脂糖凝膠分離基因組DNA,它在1~15kb的范圍內有較好的分辨率,可選用TBE或TAE緩沖液。瓊脂糖凝膠電泳需在1V/cm的電壓下進行,如果要分離片段大小相似的DNA帶,應用較大的凝膠(20×25cm)。常用的標準品是由Hind Ⅲ消化的λDNA、Hae Ⅲ消化的ΦX174 DNA和100或1000bp的梯形圖譜。電泳完畢,將凝膠放在紫外透射儀上,并在凝膠旁放一尺子進行拍照。當把凝膠從盤內移動紫外透射儀時,小心不要將凝膠滑落或弄破。 Southern印跡的制備 1.將凝膠轉移至塑料盒內。 2.加入至少4倍凝膠體積的0.25mol/L HCl使DNA脫嘌呤,置室溫搖床溫育15min。這時凝膠上樣緩沖液中的溴酚藍應變黃色,如果15min后仍呈......閱讀全文

    基因組DNA的定義

    中文名稱基因組DNA英文名稱genomic DNA定  義組成生物基因組的所有DNA。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)

    基因組DNA的提取

    第一節 概 述DNA的提取通常用于構建文庫、Southern雜交(包括RFLP)及PCR分離基因等。利用DNA較長的特性,可以將其與細胞器或質粒等小分子DNA分離。加入一定量的異丙醇或乙醇,的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團飄浮其中,可用玻棒將其取出,而小分子DNA則只形成顆粒狀沉淀附于壁上及底部,

    基因組DNA的提取

    基因組DNA的提取概 述?  基因組DNA的提取通常用于構建基因組文庫、Southern雜交(包括RFLP)及PCR分離基因等。利用基因組DNA較長的特性,可以將其與細胞器或質粒等小分子DNA分離。加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團飄浮其中, 可用玻棒將其取出,而小分

    純化DNA實驗_基因組DNA的快速純化

    試劑、試劑盒尾部緩沖液蛋白酶 K儀器、耗材離心管玻璃棒實驗步驟第 1 天1. 大約 1.5 cm 長的尾部活檢樣品放在一個 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部緩沖液的小離心管中,加 35 ul 10 mg/ml 蛋白酶 K,在 55℃ 振搖溫育過夜。尾部緩沖液(配 25 ml)50 mmol/L

    血基因組DNA提取實驗——血基因組DNA-試劑盒提取法

    血基因組DNA提取可用于:(1)從凍全血、血漿、血清、骨髓、其他體液、淋巴細胞、培養細胞、病毒和線粒體中提取DNA;(2)用于后續測序、遺傳信息學等研究。實驗方法原理采用特殊的細胞裂解和蛋白去除液(包括蛋白酶K 裂解)從抗凝全血中得到基因組DNA。實驗材料抗凝全血試劑、試劑盒血基因組DNA 試劑盒儀

    細胞化學詞匯基因組DNA

    中文名稱:基因組DNA英文名稱:genomic DNA定  義:組成生物基因組的所有DNA。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)

    血基因組DNA提取實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用特殊的細胞裂解和蛋白去除液(包括蛋白酶K 裂解)從抗凝全血中得到基因組DNA。 實驗材料 抗凝全血

    植物基因組DNA的RFLP

    實驗概要本實驗介紹了植物基因組DNA的RFLP多態性分析的原理及操作步驟。通過本實驗可了解不同植物或同一植物不同個體之間基因組DNA順序的差異性,掌握DNA限制性酶切片段長度多態性研究的基本方法。實驗原理DNA多態性是指DNA堿基順序的差異性。這種差異性不僅存在于不同的植物之間,也存在于同一種植物的

    基因組DNA的快速純化

    第 1 天1. 大約 1.5 cm 長的尾部活檢樣品放在一個 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部緩沖液的小離心管中,加 35 μl 10 mg/ml蛋白酶 K,在 55℃ 振搖溫育過夜。尾部緩沖液(配 25 ml)50 mmol/L Tris,pH 8??????????????????????

    小鼠肝基因組DNA制備

    原理DNA 以核蛋白形式存在于細胞核中,制備 DNA 的原則是既要將 DNA 與蛋白質、脂類和糖類等分離,又要保持 DNA 分子的完整。蛋白酶K 及鏈霉蛋白酶 E 的應用使這兩個原則得到了保證。蛋白酶K 或鏈霉蛋白酶 E 均為廣譜蛋白酶,其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。

    小鼠肝基因組DNA制備

    原理DNA 以核蛋白形式存在于細胞核中,制備 DNA 的原則是既要將 DNA 與蛋白質、脂類和糖類等分離,又要保持 DNA 分子的完整。蛋白酶K 及鏈霉蛋白酶 E 的應用使這兩個原則得到了保證。蛋白酶K 或鏈霉蛋白酶 E 均為廣譜蛋白酶,其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。

    細菌基因組DNA提取實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本試劑盒采用獨特的細胞裂解和相分離技術,結合DNA 制備膜選擇性地吸附DNA 的方法達到純化基因組DNA 的目的。適合于從1.0x109 細菌中獲得多至20 ug 的基因組DNA。用于PCR、Southern 印跡分析、RAPD

    細菌基因組DNA提取實驗

    實驗方法原理 本試劑盒采用獨特的細胞裂解和相分離技術,結合DNA 制備膜選擇性地吸附DNA 的方法達到純化基因組DNA 的目的。適合于從1.0×109 細菌中獲得多至20 μg 的基因組DNA。用于PCR、Southern 印跡分析、RAPD、RFLD 等分子生物學實驗。實驗材料 細菌培養物

    血基因組DNA提取實驗

    實驗方法原理 本試劑盒采用特殊的細胞裂解和蛋白去除液(包括蛋白酶K 裂解)從抗凝全血中得到基因組DNA。適用于從凍全血、血漿、血清、骨髓、其他體液、淋巴細胞、培養細胞、病毒和線粒體中提取DNA。實驗材料 抗凝全血試劑、試劑盒 血基因組DNA 試劑盒儀器、耗材 96孔深孔板96圓孔板96孔DNA制備板

    細菌基因組DNA提取實驗

    細菌基因組DNA提取可應用于:(1)獲得細菌基因組DNA;(2)作為PCR模板;(3)用于測序、遺傳信息分析等。實驗方法原理本試劑盒采用獨特的細胞裂解和相分離技術,結合DNA 制備膜選擇性地吸附DNA 的方法達到純化基因組DNA 的目的。適合于從1.0x109?細菌中獲得多至20 ug 的基因組DN

    擬南芥基因組DNA的提取

    實驗概要本實驗介紹了用CTAB法提取擬南芥基因組DNA。主要試劑CTAB提取液(2%CTAB,50mMEDTA,50mM Tris-HCl,PH 8.0,0.84M NaCI,0.05%巰基乙醇),氯仿,無水酒精,70%的酒精主要設備1.5 mL離心管,65℃水浴鍋,高速離心機,研缽實驗材料擬南芥葉

    關于土壤基因組DNA提取

    土壤樣品含有大量的微生物,其中絕大部分的微生物都是無法直接培養進行繁殖和研究。從土壤樣品中提取?DNA?是研究土壤微生物zui為有效的方法。目前從土壤樣品中提取微生物?DNA?的方法主要有直接法和間接法。直接法是指把土壤樣品放在裂解液中,經過有效的破壁方法使微生物的DNA?全部釋放到裂解液中,然后再

    血基因組DNA提取實驗——血基因組DNA大量試劑盒提取法

    實驗方法原理本試劑盒采用獨特的兩相分離技術,結合DNA 制備膜選擇性地吸附DNA 的方法達到純化基因組DN的目的。適合從5 ml 的抗凝人或哺乳動物全血,或500 ul 抗凝鳥類或兩棲動物全血中獲得多至250 ug 的基因組DNA。實驗材料抗凝全血試劑、試劑盒血基因組DNA大量試劑盒儀器、耗材DNA

    基因組DNA的得率較低或者無基因組DNA原因及解決方法

    1 ) 樣品材料老化或者反復凍融導致 DNA 含量下降: 應選擇新鮮的材料樣品,如新鮮血液、新鮮菌液、剛離體的動物組織或幼嫩的植物組織等,不能立即處理的樣品應放入液氮或-70℃低溫保存,以免DNA降解。 2 ) 樣品破壁或者裂解不完全, DNA 未充分釋放: 動植物樣品應在液氮中充分研磨

    哺乳動物中制備基因組DNA實驗——制備DNA

    在DNA提取過程中應盡量避免使DNA斷裂和降解的各種因素,以保證DNA的完整性,為后續的實驗打下基礎。一般真核細胞基因組DNA有107-9bp,可以從新鮮組織、培養細胞或低溫保存的組織細胞中提取,常是采用在EDTA以及SDS等試劑存在下用蛋白酶K消化細胞,隨后用酚抽提而實現的。實驗材料動物組織試劑、

    細菌中制備基因組DNA實驗

    小量制備 氯化銫法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 提取DNA的一般過程是將分散好的組織細胞在含SDS(十二烷基硫酸鈉)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白質,再用酚和氯仿

    細菌中制備基因組DNA實驗

    實驗方法原理?提取DNA的一般過程是將分散好的組織細胞在含SDS(十二烷基硫酸鈉)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白質,再用酚和氯仿/異戊醇抽提分離蛋白質,得到的DNA溶液經乙醇沉淀使DNA從溶液中析出。實驗材料?細菌試劑、試劑盒?TE氯化銫溴化乙錠NaCl乙醇CTAB儀器、耗材?離心機搖床實驗步驟 1

    核酸提取-基因組DNA的提取

    ?? DNA是遺傳信息的載體,是最重要的生物信息分子,是分子生物學研究的主要對象,因此DNA的提取也應是分子生物學實驗技術中的最重要、最基本的操作,如不能有效的完成DNA提取方面的工作,那就根本談不上進行分子生物學方面的實驗。在DNA提取過程中應做到1,根據不同研究需要,保證結構的相應完整性;2,盡

    從動物組織提取基因組DNA

    實驗概要本實驗以哺乳動物新鮮組織為材料,學習基因組DNA提取的一般方法。實驗原理基因組DNA的提取通常用于構建基因組文庫、Southern雜交(包括RFLP)及PCR分離基因等。利用基因組DNA較長的特性,可以將其與細胞器或質粒等小分子DNA分離。加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即沉淀

    植物組織制備基因組DNA實驗

    氯化銫法 CTAB法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團飄浮其中, 可用玻棒將其取出,而小分子DNA則

    植物組織制備基因組DNA實驗

    實驗方法原理?加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團飄浮其中, 可用玻棒將其取出,而小分子DNA則只形成顆粒狀沉淀附于壁上及底部, 從而達到提取的目的。實驗材料?植物組織試劑、試劑盒?抽提緩沖液十二烷基肌氨酸鈉TE異丙醇溴化乙錠氯化銫儀器、耗材?離心機實驗步驟 ? 收取1

    線粒體基因組的DNA相關介紹

      與細胞核DNA相比,mtDNA作為生物體種系發生的“分子鐘”(molecular clock)有其自身的優點:①突變率高,是核DNA的10倍左右,因此即使是在近期內趨異的物種之間也會很快地積累大量的核苷酸置換,可以進行比較分析;②因為精子的細胞質極少,子代的mtDNA基本上都是來自卵細胞,所以m

    生物基因組DNA的分類介紹

      1、蛋白編碼序列。以三聯體密碼方式進行編碼。編碼DNA在基因組中所占比例隨生物而異,在人類細胞基因組中,這一比例只有1.5%左右。這類編碼序列主要是非重復的單一DNA序列,一般在基因組中只有一個拷貝(單一基因),然而,也有可能有兩個或幾個拷貝甚至多達上千個拷貝的情況,這些都來自于從基因家族里派生

    怎樣對基因組DNA質量檢測

    怎樣對基因組DNA質量檢測用凝膠電泳看,有沒有質白質和RNA等物質的污染,還可以測OD,用OD260/280來判斷,當OD260/OD280< 1.8,表示蛋白質含量較高當OD260/OD280> 2.0,表示RNA含量較高當OD260/OD280=1.2.0,表示DNA較純

    真核細胞基因組DNA的提取

    實驗概要高等動物,高等植物的基因組相當龐大,如人類細胞基因組由30億個堿基對組成,果蠅基因組有1.4×108個堿基對,水稻基因組有1.4×109個堿基對。真核細胞基因組中,約1萬-1.5萬個可表達的結構基因,其它大量存在的是調控序列和內含子序列。可以說某特定物種的基因組,包含了該物種生長,發育,繁殖

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